珍稀观赏竹组织培养实验报告

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1、珍稀观赏竹组织培养实验报告食品科学与工程101何诗瑾201016020121实验日期：3月10日—4月8日实验一培养液与培养基的配置一、实验目的学习母液法配制培养基以及掌握培养基灭菌的方法二、实验原理组织培养所用的培养基含有植物生长所必需的各类营养物质，同时也是微生物繁殖的极好场所，因此必须对培养基灭菌处理，以确保无菌操作的顺利进行。1.试剂MSNH4NO3,KNO3,KH2PO4,CaCl2·2H2O,MgSO4·7H2O,FeSO4·7H2ONa2-EDTA,MnSO4·4H2O,ZnSO4·7H2O,CuSO4·5H2O,维他命，盐酸硫胺素，BA1培养液

2、，去离子水。2.仪器设备电子天平，精密电子天平，烧杯（50ml、100ml、500ml、1000ml）量筒（1000ml、100ml、10ml），容量瓶(1000ml、500ml、100ml)，试剂瓶，玻璃棒，药芍，称量纸，转子等。四、实验步骤1母液的配制先用量筒称量适当去离子水放入500ml烧杯中，用电子天平称取30g糖，放入烧杯中溶解，放入转子，不断搅拌，然后按照配方表中用10ml量筒依次分别称取：NH4NO3,KNO3,KH2PO4,MgSO4·7H2O,CaCl2·2H2O等，待第一种化合物完全溶解后再加入第二种化合物，依次按照顺序把微量元素母液分别加

3、入到烧杯中，当最后一种化合物完全溶解后，先测量溶液PH，然后用标准1mol/LNAOH调节PH至5.7，搅拌,将溶液转移至1000ml量筒中，用蒸馏水润洗3-6次，再加蒸馏水至980ml,用精密电子天平称取琼脂2.5g,倒入1000ml容量瓶中，搅拌均匀，再将原先配制好的母液倒入，加去离子水定容至1000ml，用锡箔纸封口，并贴好标签，注明培养液名称，配置日期，配置人。放入高温杀菌箱杀菌15min。趁热将配好的培养液，分装到试管内。五、试验结果分析及注意事项配制母液时注意药品只能出不能进。注意焦头滴灌不可碰到量筒。配制培养基前先大致估计一下药品数量，不够时提前

4、配制。培养基灭菌时注意要放干净冷空气。分装培养基时要趁热，以免琼脂凝固。实验二无菌植株的建立一、实验目的通过实验，初步掌握外植体材料消毒及在超净工作台上接种的方法与注意事项二、实验原理植物细胞具有全能型，其外植体接种在无菌的人工培养基上，能长成完整的无菌植株。三、实验材料、试剂和仪器设备超净工作台、培养基，大号镊子，剪刀，酒精灯，喷雾器，烧杯，手术刀四、实验步骤1．取材去温室，取竹子的芽，每人5根2．剪裁将取来的芽完整的截取，放入烧杯中，取新烧杯，剪两块纱布，一块沾取洗洁精，擦洗烧杯，清洗完毕后，将剪好的植株放入烧杯中，用新纱布将烧杯口盖住，剪一个口子，将水管

5、插入，用清水冲洗1小时。此间，穿好实验服去清理时去清洁手臂，洗手致手肘部位两遍。3.准备打开超净工作台，用酒精清洗桌面与器材，高温杀菌器材。将高温杀菌器预热。4.灭菌将洗净的植物放入次氯酸钠溶液里真空抽滤10分钟。将器材放入高温中杀菌。每组分配四个培养皿，一个放次氯酸钠，三个放去离子水，培养皿盖子用来切植株。将培养皿用去离子水清洗。5.接种将灭菌处理好的材料在超净工作台上，用镊子和刀片将竹子的芽剥出，放入配有培养基的试管中，试管开封须在酒精灯上加热，芽朝向外三分之一放入培养基内，密封。6.接种完毕后，用记号笔写上制作人编号等相关信息。7．清理接种完毕后，将器具

6、拿去清洗，用洗洁精洗一次，ROA水洗一次，去离子水洗一次，打扫实验室。五、试验结果分析及注意事项注意事项：做本次实验时在灭菌时注意要靠近超警工作台内侧，不可接触外部空气，进出超净工作台时都需要灭菌。实验三组培苗的移栽一、实验目的组织培养中培育出来的苗通常称为组培苗或试管苗。由于试管苗是在无菌、有营养供给、适宜光照和温度近100％的相对湿度环境条件下生长的，因此，在生理、形态等方面都与自然条件生长的正常小苗有着很大的差异。所以必须通过炼苗，例如通过控水、减肥、增光、降温等措施，使它们逐渐地适应外界环境，从而使生理、形态、组织上发生相应的变化，使之更适合于自然环境

7、，只有这样才能保证试管苗顺利移栽成功。通过实验，要求学生学会和掌握组培苗的驯化和移栽方法及移栽后的管理。二、实验原理试管苗由于是在无菌、有营养供给、适宜光照和温度近100%的相对湿度环境条件下生长的，因此，在生理、形态等方面都与自然条件生长的小苗有着很大的差异。所以需要移栽到自然化境生长，这样才能使之在自然生态下存活。三、实验材料、试剂和仪器设备1、材料：组培苗。2、试剂与用具：蛭石、珍珠岩、腐殖土，草炭土、砂子、喷壶、育苗盘、塑料钵等四、实验步骤1．移栽基质的配制：用珍珠岩，蛭石，草炭土或腐殖土比例为1：1：0．5；也可用砂子：草炭土或腐殖土为1：1。这些介

8、质在使用前应高压灭菌。2．移栽前的练苗