优良鸡品种禽白血病净化技术操作规程

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1、ICS11.220B41DB45广西壮族自治区地方标准DB45/TXXXXX—2011优良鸡品种禽白血病净化技术操作规程点击此处添加标准英文译名点击此处添加与国际标准一致性程度的标识（本稿完成日期：2010年12月）2011-XX-XX发布2011-XX-XX实施广西壮族自治区质量技术监督局发布DB45/TXXXXX—2011目次前言II引言III1　范围12　术语和定义13　试验材料23.1　试剂23.2　DF-1细胞系23.3　检测样品23.4　仪器设备及耗材24　操作程序34.1　种鸡群的A

2、LV流行病学调查34.2　种鸡群的排毒规律的确定34.3　种鸡群的净化34.4　ALV净化后的饲养管理34.5　ALV净化效果检验4附录A（规范性附录）　DF-1细胞系培养条件及溶液的配制5附录B（规范性附录）　禽白血病毒检测样品的采集7附录C（规范性附录）　禽白血病抗原检测试剂盒9附录D（资料性附录）　种鸡群的ALV排毒规律13附录E（规范性附录）　ALV的分离和分离培养物的检测14参考文献1615DB45/TXXXXX—2011前言本标准根据GB/T1.1—2010给出的规则起草。本标准由广西

3、壮族自治区水产畜牧兽医局提出。本标准起草单位：广西大学动物科学技术学院。本标准主要起草人：韦平、韦天超、张胜斌、吴天威。本标准为首次发布。15DB45/TXXXXX—2011引言禽白血病（Avianleukosis）,AL是由反转录病毒科的禽白血病/肉瘤病毒群病毒（ALV/SV）引起的禽类多种肿瘤性疾病的总称。它可诱发产生肿瘤，造成鸡只的直接死亡；也可以产生非肿瘤综合症，表现为生长发育不良、生产性能下降，同时引起免疫抑制导致抵抗力下降，引发多种疾病。该病是危害我国养禽业的重要疫病之一。禽白血病病毒

4、分为外源性病毒（包括A、B、C、D和J亚群）和内源性病毒（包括E、F、G、H和I亚群），其中A、B、C、D、E和J这六个亚群的自然宿主是鸡。本标准仅涉及与鸡相关的亚群。禽白血病在农业部发布的第1125号公告的《一、二、三类动物疫病病种名录》中属二类动物疫病。在国际种禽贸易中，外源性白血病感染是最主要的检测对象之一。该病目前对我国养禽业的危害很大，特别是在我国地方肉鸡品系中，禽白血病感染情况比较严重。因此，加强地方优良鸡品种禽白血病的净化和防控，对保护我国养禽业的发展具有重要的意义。目前，禽白血病的

5、防制主要是通过对鸡的原种群开展外源性病毒的净化工作。本技术规范在实验室研究的基础上，经生产应用验证后制订，适合广西地方优良鸡品种禽白血病净化操作。15DB45/TXXXXX—2011优良鸡品种禽白血病净化技术操作规程1　范围本标准规定了广西地方优良鸡品种禽白血病净化的检测样品的采集、检测方法、净化的程序及技术指标。本标准适用于广西地方优良鸡品种禽白血病的净化。2　术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2.1　禽白血病（Avianleukosis,AL）和禽白血病病毒（Avianleukosisvi

6、rus,ALV）禽白血病（Avianleucosis）,AL是由禽白血病病毒(Avianleukosisvirus),ALV和禽肉瘤病毒(Aviansarcomavirus),ASV群中的病毒引起的禽类多种肿瘤性疾病的统称。它可引起病鸡严重生长发育不良、受精率和孵化率等生产性能下降，同时可发生免疫抑制，导致疫苗免疫效果不佳甚至失败并引起肿瘤死亡。ALV既可通过种蛋垂直感染，也可以水平传播，因此该病一直是种鸡和蛋鸡生产中危害严重的疫病。禽白血病病毒(Avianluekosisvirus),ALV归属

7、于反转录病毒科，a反转录病毒属。病毒粒子为一直径为80～120nm（平均是90nm）的球状物，其外周是囊膜糖蛋白，其中gp85基因是囊膜蛋白表面的主要成分，主要决定了病毒亚群的特性；内部病毒子核心，有一主要的群特异性抗原p27蛋白，其为核衣壳蛋白，主要用于群特异性抗原的检测。2.2　酶联接免疫吸附实验(Enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)酶联接免疫吸附实验(Enzyme-linkedimmunosorbentassay)是在免疫酶技术(Immunoenzym

8、atictechniques)的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术，ELISA过程包括抗原（抗体）吸附在固相载体上称为包被，加待测抗体（抗原），再加相应酶标记抗体（抗原），生成抗原（抗体）－－待测抗体（抗原）－－酶标记抗体的复合物，再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体（抗原）的量。待测抗体（抗原）的定量与有色产物成正比，从而检测出待测样品是否含有特异的抗原抗体。此方法尤其适合于大量样品的检测。2.3　DF-1细胞系DF-1细胞系（DF-1celllin