产品信息和操作指南

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时间:2018-07-25

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1、产品信息和操作指南HumanPerforin预包被ELISAkitCat#:DKW12-1830-048/DKW12-1830-096本试剂盒专用于科研,而非用于诊断HumanPerforinDKW12-1830目录产品简介……………………………………………………………1知识背景……………………………………………………………1试剂盒提供的试剂…………………………………………………2需要实验者自行准备的试剂与仪器………………………………2注意事项……………………………………………………………3试剂的配制…

2、………………………………………………………5操作过程……………………………………………………………7结果分析……………………………………………………………9试剂盒的保存………………………………………………………9操作步骤一览表……………………………………………………10参考文献……………………………………………………………11ELISA测定中可能会出现的问题及解决方法……………………12预包被ELISA试剂盒系列产品…………………………………151、产品简介:QuickEIATM人PerforinELI

3、SA试剂盒是通过酶联免疫吸附技术,体外定量检测人血清、血浆、缓冲液或细胞培养液中的Perforin,可同时检测天然的和重组的Perforin。本试剂盒为预包被板,整个过程孵育时间不超过3hr,洗涤6次。本试剂盒专用于科研,而非用于诊断。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂盒组分,若有任何疑问请与达科为生物技术有限公司联系,E-mail:RD@dakewe.com.检测范围:4000-62.5pg/ml灵敏度:40pg/ml重复性:板内、板间变异系数均<10%。2、知识背景:Perforin又称成孔蛋白(po

4、re-formingprotein,PFP)、溶细胞素(cytolysin),是一个70kDa的溶细胞蛋白,在NK细胞和细胞毒性T淋巴细胞的胞浆颗粒里表达,是NK细胞和细胞毒性T淋巴细胞介导靶细胞溶解的主要效应分子之一(1,2)。-1-1、试剂盒提供的试剂:试剂规格配制Cytokinestandard2/1瓶*干粉状,按瓶上说明操作Biotinylatedantibody2/1瓶*1:50用DilutionbufferR(1×)稀释Streptavidin-HRP2/1瓶*1:100用Dilutionb

5、ufferR(1×)稀释DilutionbufferR(1×)3/2瓶*即用型Washingbuffer(50×)1瓶1∶50用蒸馏水稀释TMB1瓶即用型Stopsolution1瓶即用型PrecoatedELISAplate8×12或8×6*即用型封板膜2/1张*即用型说明书1份*:96/48Tests2、需要实验者自行准备的试剂与仪器:1.酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热)2.微量加液器及吸头:P10,P50,P100,P200,P10003.蒸馏水或去离子水4.全新滤纸5.旋涡振荡器和磁力搅拌

6、器-2-1、注意事项:1.试剂应按瓶上标签说明储存,使用前室温平衡20-30min。实验前室温平衡对Washingbuffer(50×)、DilutionbufferR(1×)、PrecoatedELISAplate和TMB有重要意义。2.冻干标准品冰上操作,按照标签说明溶解干粉,充分混匀,按照一次使用量分装,-20℃贮存,避免反复冻融。3.预包被板条使用前,请恢复到室温后再打开外包装袋,实验中不用的板条立即放回包装中,密闭封口,4℃可保存1个月。其余不用试剂应包装好或盖好。4.Washingbuffe

7、r(50×)在4℃保存可能有结晶析出,使用前务必使结晶完全溶解后(如加热、平衡温度后混匀等)再配置成Washingbuffer(1×)工作液。5.HRP和检测抗体体积量很小,使用前请高速短暂离心管子,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。6.实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。7.使用前检查试剂盒内各种试剂;试剂稀释、加样和中止反应充分混匀或者摇匀对实验结果尤为重要,最好使用低速频率振荡器或者反应过程中每15分钟手工摇匀一次。8.实验板孔加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应孔的孵育时间一致。9.使用洁

8、净的塑料容器盛装洗涤液。-4-1.洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,滤纸上看不到水印。勿将滤纸直接放入反应孔中吸水。2.TMB对光敏感,避免长时间暴露于光下,避免金属接触影响结果。有毒,避免用手接触!准备使用的TMB若变为蓝色,表明TMB已经污染,请丢弃。请在终止反应后10min内读取OD值。3.请严格按照说明书标明的时间和温度进行孵育。冬季室内温度偏低,请使用恒温箱或培养箱孵育为好。4.试剂盒在保质期内使用,且不同批号试剂

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