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时间:2018-07-25
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1、种子检验学考试要点种子科学与工程1. 四唑染色(1)测定原理:有生活力的种子活细胞在呼吸过程中都会发生氧化还原反应。四唑溶液(无色)被种子活组织吸收后,参与活细胞的还原反应,从脱氢酶接受氢离子,被还原成红色、稳定、不扩散、不溶于水的三苯基甲臜; DPNH2 + TTC→DPN+ TTCH+ HCl(辅酶IH2) (四唑) (辅酶I) (甲臜) (氯化氢)(2)测定方法<1>试验样品 从净度分析后并经充分混合的净种子中,随机数取100粒种子,4次重复。如果是测定发芽试验末期休眠种子的生活力,则单用发芽试验末期所发现的休
2、眠种子。<2>染色前的种子准备(预湿、预措):1)种子预湿(方法:①快速水浸预湿:适用于直接浸入水中不会造成组织破裂损伤,不会影响鉴定正确性的种子;②缓慢纸床预湿:适用于直接浸在水中容易破裂和损伤的种子,以及衰弱的种子或过分干燥的种子;③H2O2溶液浸种:为加快种子吸胀、促进酶的活化,缩短预湿时间。)2)染色前的种子处理(预措):(方法:①刺穿:对经过预湿的种子或硬实种子,可利用解剖针或解剖刀,刺穿种子的非主要部位,适用于小粒牧草等种子。②纵切:通过胚中轴和胚乳,纵向切开,使胚的主要构造暴露出来,适用于具有直立胚的大粒禾本科等种子。③横切:用解剖
3、刀、刀片、弯曲剪子或其他适当的方法,沿种子非主要组织横向切断。)3)染色程序:将准备好的100×4种子放入适宜大小的培养皿或烧杯中。加入适宜浓度的四唑溶液,以淹没种子为度,移置到一定温度的(黑暗或弱光)恒温箱内进行染色反应。4)一般鉴定原则:<1>凡是胚的主要构造及有关活营养组织染成有光泽的鲜红色,且组织状态正常的,为有生活力种子。<2>凡是胚的主要构造局部不染色或染成异常的颜色和光泽,并且活营养组织不染色部分已超过1/2,或超过允许范围以及组织软化的,为不正常种子。<3>凡是完全不染色或染成无光泽的淡红色或灰白色,且组织已软腐或异常、虫蛀、损伤
4、、腐烂的为死种子。2. 离体胚测定的原理:将离体胚在规定的条件下培养5~10d有生活力的胚仍然保持坚硬新鲜的状态,或者吸水膨胀、子叶展开转绿,或者胚根和侧根伸长、长出上胚轴和第1叶;无生活力的胚,则呈现腐烂的症状3. 染料染色法测定原理:活细胞原生质膜具有选择透性,染料大分子不能进入活细胞内,胚部等活组织不能被染料染色;死的种胚细胞因原生质膜丧失选择吸收能力,故可被染料染色4. 种子活力:决定种子或种子批在发芽和出苗期间的活性水平和行为的那些种子特性的综合表现。5. 种子活力、种子生活力、种子发芽力三者之间的关系:
5、(1)高活力的种子一定具有高的发芽力和生活力(2)具有高发芽力的种子也必定具有高的生活力(3)具有生活力的种子不一定都具发芽力,能发芽的种子活力也不一定高。6. 发芽测定法(3类):4(1)标准发芽试验(发芽速率测定)法(最古老和最为简单的方法,适用于各种作物。)(2)幼苗生长量测定法:适用于具有直立胚芽或胚根的禾谷类和蔬菜种子,采用纸卷直立发芽法。(3)幼苗评定试验:对大粒豆类种子,细弱苗也可达到相当的长度,不能用幼苗长度表示活力,采用标准发芽试验方法,幼苗评定时分成不同等级。7. 电导率测定:(1)测定原理:种子吸胀初期,细胞
6、膜重建和修复能力影响电解质(如氨基酸、有机酸、糖及其他离子)渗出程度,膜完整性修复速度越快,渗出物越少。高活力种子能够更加快速地重建膜,且最大限度修复任何损伤;高活力种子浸泡液的电导率低于低活力种子。(2)测定方法:取50粒种子称重(精确至2位小数)2个重复。取烧杯3个,用热水和去离子水洗净。将种子放入烧杯中,加入250ml去离子水,另一烧杯内加去离子水作对照。所有烧杯于20℃条件下放置24h,用电导仪测定浸泡液和对照的电导率。8. 种子真实性:指一批种子所属品种、种或属与文件描述(品种证书、标签等)是否相同。即种子样品的真假。9.
7、 品种纯度:品种个体之间在特征、特性方面典型一致的程度,用本品种的种子数占供检样品种子数的百分率表示。即品种一致性程度的高低。10. 品种真实性和纯度鉴定的方法分类(1)根据其所依据的原理不同主要可分为:1)形态鉴定:籽粒、种苗、植株形态测定;2)物理化学法鉴定:荧光鉴定法、煮沸法;苯酚染色法、碘化钾染色法;3)生理生化法鉴定:愈创木酚染色法、电泳法、色谱法、免疫技术;4)分子生物学方法鉴定:分子标记技术;5)细胞学鉴定:染色体数目(2)依据检验的对象分:1)种子纯度测定2)幼苗纯度测定3)植株纯度测定(3)根据检验的场所分:1)田间纯度检验2
8、)室内纯度检验3)田间小区种植检验11. 苯酚(石炭酸)染色法(1)染色原理:由于每个品种皮壳内酚酶活性不同,将苯酚氧化呈现深浅不同的褐
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