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《杜仲降血压成分的组合及血管舒张作用研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、4杜仲降血压成分的组合及血管舒张作用研究江春艳1，许激扬*1，卞筱泓*1，沈继朵1，阚静1，刘超晔2（1.中国药科大学，江苏南京210009；2.南京市产品质量监督检验院江苏南京210009）[摘要]目的：本实验对杜仲降血压有效成分进行组合，研究单组分及组合物对大鼠胸主动脉的舒张作用。方法：从杜仲皮中提取降血压有效成分松脂醇二葡萄糖苷，绿原酸，京尼平苷，京尼平苷酸，槲皮素，芦丁，桃叶珊瑚苷，以大鼠胸主动脉环为标本，观察单组分以及各组分两两组合后对NE预收缩的血管舒张作用。结果：实验表明，组合后有效成分的舒血管作用较单个组分明显。结论：松脂醇二葡萄糖苷和槲皮素在组合比例为1：1时，其血
2、管舒张作用最好。[关键字]杜仲，降血压，成分组合，血管舒张，主动脉环[中国图书分类号][文献标识码][文章编号]杜仲是我国特有的传统名贵中药，中医很早就利用杜仲治疗类似高血压的症状。杜仲皮、叶中的降血压成分大致分为4类：木脂素类、苯丙素类、环烯醚萜类和黄酮类。现代中药药理学研究表明，杜仲中木脂素类化合物松脂醇二葡萄糖苷，苯丙素类化合物绿原酸、，环烯醚萜类京尼平苷酸、京尼平苷、桃叶珊瑚苷和黄酮类中的槲皮素、芦丁均有降血压作用[1]。本实验室许激扬等[2]曾从杜仲中分离到的木脂素和黄酮类两种有效部位，以及绿原酸，京尼平苷，京尼平苷酸，并通过相互组合研究了组合物的血管舒张作用。本研究在之前
3、研究的基础上进一步分离出了PDG，桃叶珊瑚苷，槲皮素，芦丁4种降血压有效成分。与之前分离出的另外3种有效化合物进行两两组合，以大鼠胸主动脉环为标本，观察了单组分以及它们在不同的比列条件下的两两组合，对NE预收缩的血管舒张作用。从中筛选出最佳组合方式，为杜仲的进一步开发及临床用药提供理论依据。1材料与方法1.1动物：SD雄性大鼠，体重180～250g，由江宁县青龙山动物繁殖场提供,动物质量合格证号SCXK(苏)200220018。1.2药品与试剂1.2.1七种降压组分表1本实验从杜仲中分离纯化出的七种降压组分及其制备方法降压组分制备方法鉴定及含量检测松脂醇二葡萄糖苷溶剂萃取,大孔树脂层
4、析，硅胶柱层析相结合[3，4]薄层层析鉴定，高效液相色谱法检测含量[5]绿原酸铅盐沉淀，与溶剂萃取相结合高效液相色谱京尼平苷溶剂萃取与固相萃取法相结合[6]高效液相色谱京尼平苷酸同上高效液相色谱槲皮素芦丁酸水解法高效液相色谱芦丁碱溶酸沉法高效液相色谱桃叶珊瑚苷溶剂萃取法，大孔树脂层析法[7]高效液相色谱1.2.2其它试剂：重酒石酸去甲肾上腺素(NE，2g.L-14)；氯化乙酰胆碱（Ach,上海三爱思试剂有限公司）；盐酸维拉帕米片（Ver）；其他试剂均为市售国产分析纯。1.3仪器HV-4型离体组织器官恒温灌流系统（成都泰盟科技有限公司）；JZ-100型肌张力换能器（北京新航兴业科贸有限
5、公司）；BL-420F生物机能实验系统（成都泰盟科技有限公司）；HW-1000型超级恒温水浴（成都泰盟科技有限公司）。1.4大鼠胸主动脉条标本的制备 SD大鼠处死,迅速打开胸腔,取其胸主动脉,移入盛有4℃纯氧饱和K-H液的培养皿中。仔细剔除血管周围结缔组织,冲洗血管内血液,剪成长3～4mm的血管环。一端用不锈钢钩垂直悬吊于血管平滑肌浴槽中,另一端接张力传感器,静息张力1.0g。浴槽中加入K-H液,pH7.4,持续不断的通入纯氧,37℃平衡2h,每15min换液1次。使用生物机能实验系统记录血管张力的变化。平衡期末,以60mmol·L-1的KCl预收缩血管环3次,检查血管活性。当达到最
6、大收缩后洗脱,平衡2次,每次15min。用NE(10-6mol/L)预收缩动脉环,待收缩稳定加入乙酰胆碱(Ach)10-5mol·L-1,血管内皮功能,以舒张幅度大于70%认为内皮完整,选择内皮完整的血管条进行下一步实验[8]。2实验方法：2.1筛选出1：1组合下，血管舒张效果较好的组合分别精密称取杜仲水提浸膏，七种有效组分单体，以及它们经过1：1两两组合后，配制成100g.L-1的溶液，进样10次，每次2μl，累计进样加入NE预收缩的大鼠离体主动脉条，累加终浓度分别为（0.02，0.10,0.20g.L-1），对照组加入相同量的100g.L-1的维拉帕米溶液，空白组加入相同体积的K
7、-H液，记录张力变化，筛选出大于水提浸膏及各有效组分单体血管舒张效果的组合2.2调节2.1筛选出的舒张效果较好的组合中两种成分的比例（分别按照1：9，2：8，3：7…9:1的比例），按照2.1的实验方法，记录每种组合在以不同比例的组合方式下所能达到的最大舒张效果，进一步筛选出舒张效果最好的比例组合。3数据统计结果与分析3.1单组分血管舒张效果实验结果表明，杜仲中分离纯化得到的绿原酸，京尼平苷，桃叶珊瑚苷，槲皮素，京尼平苷酸，芦丁，松脂醇二葡萄糖苷对NE预收
