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1、NY329一1997前言本标准根据农业部1993年下达的制定行业标准《苹果无病毒苗木繁育规程》计划编制本标准的附录A、附录B、附录C都是标准的附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由中国农业科学院果树研究所、河北农业大学、农业部农业司、山东省农业厅果茶站、辽宁省农业厅果蚕站负责起草本标准主要起草人:王国平、马宝馄、史光瑚、孔庆信、孙守友、洪霓。中华人民共和国农业行业标准NY329一1997苹果无病毒苗木Virus-freeseedlingofapple1范围本标准规定了苹果无病毒苗木的质量要求,适用于全国各苹果苗木产地及栽培区。2引用标准下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为
2、本标准的条文。本标准出版时,所示版本均为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB8370-87苹果苗木产地检疫规程GB9847-88苹果苗木GB12943-91苹果无病毒母本树和苗木检疫规程3定义本标准采用下列定义.31苹果无病毒母本树指用苹果无病毒原种材料繁育的用于提供品种接穗或营养系砧木的母株。32苹果无病毒砧木指用无病毒无性系砧木母本树材料繁育的无性系砧木或未经嫁接的实生砧木。3.3苹果无病毒苗木指用无病毒接穗和无病毒砧木繁育的苹果嫁接苗或用无病毒材料通过组织培养方法繁殖的苹果自根苗4质f要求4门不带下列病毒及类病毒。4.1.1苹果绿皱果病毒Ap
3、plegreencrinklevirus.4.1.2苹果锈果类病毒Applescarskinviroid,4.1.3苹果花叶病毒Applemosaicvirus,4.1.4苹果褪绿叶斑病毒Applechloroticleafspotvirus,4.1.5苹果茎痘病毒Applestempittingvirus,4.1.6苹果茎沟病毒Applestemgroovingvirus.4.2不带GB837。中规定的检疫对象。4.3苗木规格符合GB9847标准的质量要求。5检测方法5.1田间症状鉴定法中华人民共和国农业部1997一12一19批准1998一05一01实施NY329一19975.1门苹果绿皱果
4、病毒、锈果类病毒和花叶病毒三种显性病毒在苹果树上有明显症状,可直接在田间进行观察。5.1.2三种显性病毒在苹果树上的症状见表1.表1病毒种类主要症状病株的幼果表面出现水演状斑块,逐渐发展为凹凸不平畸形果,病部果皮逐渐形苹果绿皱果病毒成木拴化呈锈色锈果型先从顶部出现淡绿色水渍状斑块,最后向果梗扩展成栓化锈斑与纵纹。苹果锈果类病毒花脸型:果实着色后表现红绿相间花脸状锈果一花脸复合型呈现有锈斑又有花脸的复合症状斑驳型:从小叶脉开始发生鲜黄色病斑,形状不规则,大小不一。环斑型病树叶上产生圆形或椭圆形黄色环斑苹果花叶病毒花叶f:病斑不规则,有较大的深绿、浅绿相间色。条斑型:病树叶片沿叶脉失绿黄化。镶边型
5、病叶片的边缘发生黄化5.2指示植物检测法5.2.1苹果褪绿叶斑病毒、茎痘病毒、茎沟病毒三种潜隐病毒和花叶病毒、锈果类病毒可采用木本指示植物检测法。5.2.2检测上列五种病毒的木本指示植物是:a)苏俄苹果(R12740-7A):检测苹果褪绿叶斑病毒;b)司派227(SPY227)或光辉(Radiant):检测苹果茎痘病毒;c)弗吉尼亚小苹果(Virginiacrab):检测苹果茎沟病毒;d)兰蓬王(Lordlambourne):检测苹果花叶病毒;e)国光(Rails):检测苹果锈果类病毒。5.2.3五种病毒在木本指示植物上的主要症状表现见表2.表2病毒种类指示植物症状s月中下旬以后,在苏俄苹果叶
6、片上出现褪绿斑点.多发生于叶片一侧,病株叶苹果褪绿叶斑病毒片较健株叶片小。有的向一侧弯曲呈舟形叶,植株矮化.或生长衰弱s月中下旬以后,在光辉指示植物上出现叶片反卷,植株矮化。在SPY227指示植苹果茎痘病毒物上出现叶片反卷、皮层坏死等症状只在弗吉尼亚小苹果上表现症状,病株较健株矮小,叶片小而色淡,有的病株嫁苹果茎沟病毒接口周围肿胀,接合部内有深褐色坏死环纹。木质部产生深褐色纵向陷条沟,严重时从外部即可辨认。在温室鉴定中.表现叶部黄斑或环状斑、叶片扭曲变形苹果花叶病毒叶片上产生黄斑、沿叶脉条斑苹果锈果类病毒弯叶和茎干锈斑、坏死斑5.2.4木本指示植物检测法可在田间和温室内进行,其操作步骤分别见附
7、录B和附录C,5.3血清学检测法5.3.1本法采用A蛋白酶联免疫吸附法(PAS-ELISA),其操作步骤见附录A,5.3.2凡能制备出抗血清的苹果病毒均采用本法进行检测。6检验规则6门检验步骤NY329一19976门.1档案核查:在进行病毒抽样检测之前,要检查无病毒苗圃是否有无病毒苗木生产许可证和无病毒苗木准产数量证明,并要对其使用的接穗,砧木的来源、数量,以及苗木类型、数量进行查核。6.1.2圃
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