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时间:2017-11-10
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1、实验细菌分离培养与培养性状观察一、目的要求从混杂微生物中获得单一菌株纯培养的方法成为分离;纯培养是指一株菌种或一个培养物中所有的细菌都是由一个细菌分裂、繁殖而产生的后代;分离培养的目的在于从被检材料中、或者从污染的众多杂菌中分离出纯的病原菌。一、目的要求被检材料或病料分离单个菌落纯培养物纯培养移植培养。。。。。。一、目的要求1、掌握细菌(需氧菌、厌氧菌)分离培养的基本要领2、掌握钓菌、纯培养及移植技术3、了解细菌在固体、液体培养基中的生长表现4、了解培养性状对细菌鉴别的重要意义接种工具接种针和接种环:由三部分组组成,即环(针)、金属柄和绝缘柄。接种前后都要过火灭菌。接种针用于穿
2、刺接种细菌,接种环用于固体、液体培养基的细菌接种。接种环境VS-1300-U型洁净工作台接种的基本程序灭菌接种环沾取标本接种灭菌接种环杀灭接种环沾染的细菌,以免污染标本杀灭接种环沾染的细菌,以免污染环境一、目的要求(一)常用的细菌培养方法1、需氧菌分离培养法(1)平板划线分离法目的:使混合的细菌呈单个分散生长,形成单个菌落,以便获得纯菌。一、目的要求一、常用的细菌培养方法1、需氧菌分离培养法(1)平板划线分离法方法:分区划线法:适用于含菌量较多的标本。连续划线法:适用于含菌量较少的标本。一、目的要求1、常用的细菌培养方法(1)需氧菌分离培养法1.平板划线分离法方法:分区划线法:
3、适用于含菌量较多的标本。分区划线法第一区划线灭菌接种环第二区划线灭菌接种环第三区划线灭菌接种环连续划线法一、目的要求(一)常用的细菌培养方法2、厌氧菌分离培养法(1)肝片肉汤培养法(2)焦性没食子酸法一、目的要求(一)常用的细菌培养方法3、兼性厌氧菌分离培养法一、目的要求(二)钓菌、纯培养及细菌移植技术细菌移植斜面培养基接种法:用于培养,保存菌种及其它实验用。液体培养基接种法:用于增菌及鉴定细菌生长特点,如表面生长,沉淀生长,均匀混浊生长等。二、材料1.器材:接种环、酒精灯、打火机。2.培养基:牛肉膏蛋白胨琼脂培养基及其培养液,试管斜面培养基。3.菌种:大肠杆菌、未知混合菌种各
4、1支。一、目的要求(三)细菌在培养基上的生长表现1、细菌在固体培养基中的生长现象菌落定义:指单个细菌在平板培养基上生长繁殖,形成单一肉眼可见的细菌集团。菌落特征:大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性。菌苔:指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。菌落与菌苔菌落菌苔一、目的要求(三)细菌在培养基上的生长表现2、细菌在液体培养基中的生长现象混浊沉淀:多见于链状排列的细菌。菌膜:多见于厌氧菌。菌膜菌沉淀均匀浑浊对照一、目的要求(三)细菌在培养基上的生长表现3、细菌在半固体培养基中的生长现象有鞭毛细菌:在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长,穿刺线边缘模糊。无鞭毛细菌:只
5、沿穿刺线生长,穿刺线边缘清晰。有动力现象无动力现象思考?1、细菌分离培养的目的是什么?何谓纯培养?2、培养皿培养时为什么要倒置?3、分别描述大肠杆菌、混合菌种在液体培养基、固体培养基中的生长表现。谢谢!
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