高中生物复习提纲 人教版选修三 记忆要点

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1、高三生物复习提纲选修三基因工程识记要点1、限制酶主要是从原核生物中分离纯化,其作用部位是双链DNA每一条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键;解旋酶的作用部位为氢键;DNA连接酶的作用部位为磷酸二酯键;DNA聚合酶的作用部位为磷酸二酯键;上述四种酶中DNA聚合酶作用于单链。2、经限制酶切割产生的DNA片段末端有两种形式黏性末端和平末端。EcoRI酶切割后产生黏性末端,其识别序列为GAATTC。E·coliDNA连接酶可以连接黏性末端,T4DNA连接酶可以连接黏性末端和平末端。3、载体必须具备哪些基本条件?①能在宿

2、主细胞内稳定保存并大量复制;②有一至多个限制酶切割位点,供外源基因(或外源DNA片段)插入其中;③有特殊的遗传标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。4、基因工程中使用的载体为质粒、入噬菌体的衍生物和动植物病毒等。5、基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:目的基因的获取、基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定,其中,第2步为基因工程的核心步骤。6、目前常用的获取目的基因的方法为:①从基因父库中获取目的基因;②利用PCR技术扩增目的基因;③如果基因比较小,核苷酸序列已知,也可以用化学合成法。7、基因文

3、库分为两类基因组文库和部分基因文库。cDNA如何获得?通过反转录(或逆转录)方法获得。8、(1)PCR的全称为聚合酶链式反应,原理为DNA双链复制,利用PCR技术获取目的基因的前提是:要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物。(2)PCR中需要一种特殊的热稳定DNA聚合(或耐热的DNA聚合酶或Taq酶)酶。(3)PCR分为哪三步,分别是什么温度?①变性,温度900-950C(940C);②复性,温度55-600C(550C);③延伸,温度70-750C(720C)。9、构建基因表达载体的目的是使目的基因

4、在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用,一个基因表达载体的组成必须包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。10、标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。11、将目的基因导入植物细胞最常采用的方法是农杆菌转化法,在此方法中,目的基因应插入到Ti质粒的T-DNA上。单子叶植物常用的基因转化方法为基因枪法,我国科学家独创的、将目的基因导入植物细胞的方法是花粉管通道法。12、将目的基因导入动物细胞最常用、最有效的方法是显微注射技术。该方法的基本操

5、作程序是:首先将含有目的基因的表达载体提纯;最终要将注射了目的基因的受精卵经胚胎的早期培养后,再移植到雌性动物的输卵管或子宫内,使其发育成为具有新性状的动物。13、早期的基因工程操作为什么都用原核生物作受体细胞?因为原核生物繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少。大肠杆菌细胞最常用的转化方法是:首先用Ca2+处理细胞,使细胞成为感受态细胞。第二步是在一定的温度下将重组表达载体与上述细胞溶于缓冲液(溶液)中完成转化过程。也常利用酶母菌作基因工程的受体细胞,是因为酵母菌有易培养、繁殖快等特点。14、什么叫转化?是指目的基因进入

6、受体的细胞,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。15、动物基因工程常用受精卵或胚胎干细胞作受体细胞,原因是上述细胞具有全能性,能直接发育形成新个体,还能使目的基因在特定(或相应)部位表达。16、目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键是转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因,其检测方法是采用DNA分子杂交技术。在此技术中,探针应如何制备?将含目的基因的DNA片段用放射性同位素等作标记(用放射性同位素标记的目的基因片段作探针)。17、目的基因的检测通常要检测三个方面,①检测转基因生物染色体DNA上是否插入目的基因,检

7、测方法为DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出mRNA,检测方法分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质,检测方法为用相应的抗体进行抗原-抗体杂交。除上述分子(水平)检测外,有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫棉是否抗虫,应如何检测?做抗虫的接种实验(将抗虫棉接种到转基因棉花植株上,看其是否抗虫),鉴定过程是:做抗虫的接种实验,让害虫吞食转基因棉花的叶子,观察害虫的存活(或发育)情况,以确定抗虫棉是否具有抗虫性状。18、转基因抗虫棉转入的是Bt毒蛋白基因,此基因的来源是来自苏云金芽孢杆菌。此抗虫基因编

8、码的蛋白质进入害虫的肠道后经消化后产生有毒的多肽,最终导致害虫死亡。19、抗病转基因植物使用最多的是病毒外壳蛋白基因和病毒的复制酶基因,抗真菌转基因植物可以使用的基因有几丁质酶基因和抗毒素合成基因。20、抗盐碱和抗干旱转基因农作物是利用一些可以调节细胞渗透压的基因;提高作物的耐寒能力可以利用鱼的抗冻蛋白基因。21、如

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