新疆额尔齐斯河水系银鲫克隆多样性研究

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1、水生生物学报ACTAHYDROBIOLOGICASINICA第33卷第3期2009年5月Vol133,No13May,2009DOI号:1013724/SP1J1000012009130363新疆额尔齐斯河水系银鲫克隆多样性研究李风波1,2莉1桂建芳1周(11中国科学院水生生物研究所,淡水生态与生物技术国家重点实验室,武汉430072;21中国科学院研究生院,北京100039)摘要:银鲫(CarassiusauratusgibelioBloch)由于其独特的遗传背景和繁殖方式而成为研究进化遗传学和选择育种的一个独特的模式生物。到目前为止,我们对新

2、疆额尔齐斯河水系银鲫群体的多样性状况一直知之甚少。为了更好地了解额尔齐斯河水系银鲫群体的克隆多样性状况,本研究中,我们采集了来自新疆额尔齐斯河水系的4个鲫鱼群体。通过流式细胞术分析血细胞样品,结果证实这些鲫鱼均为三倍体银鲫。通过血清转铁蛋白电泳表型分析,我们从这些银鲫群体中鉴定出总共8个不同的克隆。在这些鉴定的克隆中,有4个克隆(克隆A、J、M和S)同于以前鉴定的克隆,而另外的4个克隆是新发现的。克隆A和M分布最广,出现在所调查的4个群体中;克隆J出现在2个不同的群体中;其余的5个克隆中每个克隆均为单个群体所拥有。不同克隆在群体中的这种分布谱式可

3、能反映了银鲫的各个克隆可在不同水体之间迁移以及同一克隆在不同水体中生存能力存在有差异。在取样的银鲫群体中,发现有一个群体的克隆多样性水平明显低于其他3个群体,而这后3个群体的克隆多样性水平是与已报道过的银鲫群体相似的。这一结果可能暗示着修建水利工程和过度捕捞等人类活动的不利影响。本研究所揭示的克隆多样性将有助于进化遗传学和选择育种研究。同时,也反映了保护额尔齐斯河水系银鲫克隆多样性的重要性。关键词:银鲫;克隆;克隆多样性;转铁蛋白;流式细胞术;三倍体文章编号:100023207(2009)0320363206中图分类号:Q347文献标识码:A根据

4、目前的形态分类,鲫属(Carassius)仅有两个种:黑鲫或称欧鲫(C1carassius)和鲫(C1auratus)。根据形态特征和染色体数目的差异,鲫又分为指名亚种(C1a1auratus)和银鲫(C1a1gibelio)亚种。据文献记载,鲫几乎遍布中国各主要水系,而银鲫则分布于黑龙江水系和额尔齐斯河水系[1]。雌核生殖银鲫最初发现于中国东北的黑龙江省方正县双凤水库[2]。相对于染色体数目为100的普通鲫鱼,染色体数目在150左右的银鲫被认为是三倍体[3,4]。此外,银鲫还有一些有趣的特征,如存在异精雌核发育现象,群体中有5%—20%的雄性个

5、体,群体中存在克隆多样性,具有雌核生殖和有性生殖的双重生殖方式等[2,5—9]。这些特征使得银鲫成为研究进化遗传学和遗传育种的一个模式系统[10,11]。目前,我们对黑龙江水系银鲫群体的遗传多样性状况有了一定的了解[5,7,8],而对于额尔齐斯河水系银鲫群体的多样性状况知之甚少。因此,本研究的主要目的是检测额尔齐斯河水系银鲫群体的克隆多样性。由于银鲫和普通鲫鱼外形相似,很难从形态特征上将它们直接区分开。为了更好地区分它们,需要鉴定它们的倍性水平,而流式细胞仪术可能[12]是鉴定鲫鱼倍性的一种快速有效的方法。最近,转铁蛋白电泳表型分析已成功地应用于

6、方正银鲫群体克隆多样性分析,并证实为鉴定银鲫克隆的一种[7]简单有效的方法。本研究就是采用这些方法对额尔齐斯河水系银鲫的克隆多样性进行了探索。1材料与方法111样品收集收集的4个鲫鱼群体来自新疆额尔齐斯河水系(图1、表1):采样的阿克塔拉七号湖面积有117万多亩,与额尔齐斯河直接相通;采样的二牧场下塘面积有116万多亩,通过克兰河与额尔收稿日期:2007211209;修订日期:2008212206基金项目:国家自然科学基金(30630050);中国科学院农业基地创新方向项目(KSCX22YW2N2020);淡水生态和生物技术国家重点实验室项目(2

7、007FB17)资助作者简介:李风波(1980—),男,汉族,湖北天门人;博士;主要从事鱼类种群遗传学研究。E2mail:fengboli@gmail1com通讯作者:桂建芳,E2mail:jfgui@ihb1ac1cn;Tel:027268780707齐斯河相连;采样的乌伦古湖面积约为120万亩,通过一条3km的长渠与额尔齐斯河相连;采样的吉力湖面积约27万亩,与乌伦古湖相通。所有的鲫鱼样品直接在当地取材。具体来说,将1mL或2mL一次性注射器用011%的肝素润湿,从鱼体尾静脉取血012—1mL,于低温静置至分层以分离血清和血细胞,吸取上层的血

8、清用于转铁蛋白的制备和电泳表型分析,而位于下层的血细胞用于倍性水平分析。然后,从收集的血细胞样品中各取5μL,分别用1mL预冷的1×PB

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