elisa试剂盒报价表

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1、ELISA试剂盒报价表子包项目名称型号规格数量类别单价(元)小计(元)1猪瘟病毒抗体检测试剂盒见下附件一1进口2猪伪狂犬gB抗体检测试剂盒见下附件二1进口3猪瘟病毒抗原检测试剂盒见下附件三2进口4猪蓝耳抗体检测试剂盒见下附件四1进口5猪伪狂犬gE抗体检测试剂盒见下附件五1进口合计附件一:猪瘟病毒抗体检测试剂盒技术参数(一)试剂数量用猪瘟病毒抗原包被的ELISA反应板5块。(二)操作步骤在使用时,所有的试剂盒组分都必须恢复到室温18~25℃。使用前应将各组分放置于室温至少一小时。1.分别将50μl样品稀释液加入每个检测孔和对照孔中。2.分别将50μl的阳

2、性对照和阴性对照加入相应的对照孔中,注意不同对照的吸头要更换。3.分别将50μl的被检样品加入剩下的检测孔中,注意不同检样的吸头要分开,以防污染。4.轻弹微量反应板或用振荡器振荡,将反应板中的溶液混匀。5.将微量反应板用封条封闭或于湿箱中(18~25℃)孵育2小时,也可以将微量反应板用封条封闭或于湿箱中孵育过夜。6.吸出反应孔中的液体,并用稀释好的洗涤液洗涤3次,注意每次洗涤时都要将洗涤液加满反应孔,弃去反应孔中的洗涤液并拍干反应板。也可以用洗板机洗涤3次,每个反应孔应加300μl左右的洗涤液。注意洗板时要小心,以免样本之间的交叉污染。7.分别将100

3、μl的抗-CSFV酶标二抗(即取即用)加入反应孔中,用封条封闭反应板并于室温下或湿箱中孵育30分钟。8.洗板(见6)后,分别将100μl的底物溶液加如反应孔中,并于黑暗的、室温条件下放置10分钟。加完第一孔后即可计时。9.在每个反应孔中加入100μl的终止液终止反应。注意要按加酶标二抗的顺序加终止液。10.在450nm处测定样本以及对照的吸光度值,也可用双波长(450nm和620nm)测定样本以及对照的吸光度值。空气调零。11.计算样本和对照的平均吸光度值。(三)计算计算被检样本的平均值OD450(=ODTEST)、阳性对照的平均值(=ODPOS)、阴

4、性对照的平均值(=ODNEG)。根据以下公式计算被检样本和阳性对照的阻断率;(阳性对照阻断率的计算方法基本一致)ODNEG-ODTEST阻断率=————————X100ODNEG(四)试验有效性阴性对照的平均OD450应大于0.50。阳性对照的阻断率应大于50%。(五)结果判定如果被检样本的阻断率大于或等于40%,该检样就可以被判为阳性(有CSFV抗体存在)。如果被检样本的阻断率小于或等于30%,该检样就可以被判为阴性(无抗CSFV抗体存在)。如果被检样本的阻断率在30~40%之间,就应过些天再对该动物进行重测。附件二、猪伪狂犬gB抗体检测试剂盒技术参

5、数(一)试剂数量PRV抗原包被的酶标板6块(二)操作步骤注意:所有试剂在使用前一律恢复至室温(20~25℃)。试剂应该旋转或颠倒混匀。1.取出PRV抗原包被板,在记录纸(表)上记录样品位置。2.加100μl2倍稀释的阴性对照血清至A1、B1孔。3.加100μl2倍稀释的阳性对照血清至C1、D1孔。4.加100μl处理好样品至相应的孔。5.全部的单一血清样本和全部的混合血清样本的测试在室温(20~25℃)孵育1小时或2~7℃过夜孵育(16-20小时);其中从滤纸上得到的洗出液不必稀释,每孔100ul,要在2~7℃过夜孵育(16-20小时)。6.每孔用大约

6、300μl稀释好的洗液洗涤微孔3~5次。每次洗涤后,甩掉孔内的液体。在甩掉液体后,加入酶标抗体前,避免孔壁变干。在最后一次甩干后,在吸水材料上轻扣板,彻底去掉剩余的液体。7.每孔加入100μl抗PRVgB酶标抗体。8.室温(20~25℃)孵育20分钟。9.重复步骤6。10.每孔加100μlTMB底物溶液。11.室温(20~25℃)孵育15分钟。12.每孔加入50μl终止液终止反应。13.以空气作为空白对照对酶标仪进行空白设定。14.在650nm,A(650)测量和记录样品和所有对照的吸光值。15.计算结果。(三)试验有效性要使试验有效,必须满足以下条件

7、:阴性对照平均值减去阳性对照平均值,其差必须大于等于0.30;如测定结果无效,首先应怀疑是操作技术,并在仔细阅读产品说明后重新检测。针对抗原成分的抗体的存在与否,通过计算每个样品的S/N值来决定。(四)结果判定对于血清和全血样本:A快速模式:(1小时孵育/室温:20~25℃)1.若S/N比值小于或等于0.60,样品为PRV抗体阳性。2.若S/N比值小于或等于0.70但大于0.60,该样品必须被重测。如果结果相同,则过一段时间后重新从动物取样进行检测。3.若S/N比值大于0.70,样品则为PRV抗体阴性。B过夜模式:(16-20小时/2~7℃)1.S/N

8、比值小于或等于0.50,样品为PRV抗体阳性。2.若S/N比值小于或等于0.60但大于0.50

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