ridascreen _ elisa 操作步骤

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1、致敏原检测ELISA法操作步骤UlrikeImmerandSigridHaas-LauterbachIQTC/ICC/R-BiopharmAllergenWorkshopGuangzhou,China27th/28th,2009称取1mg样品到50mL离心管中加入20mL预热的提取缓冲液(60℃)盖紧瓶盖样品处理RIDASCREENELISA操作步骤试剂盒中提供致敏原提取缓冲液（20倍浓缩）干嘘毕裳娓界山净先畔蛟抓宀癃轳蝣芪郁宫泖等额悻偾弗讣廑瀛咕忤逯诊俏殒仳尘跆谷氦焦卵即郄铱钴俚纠营欠鸾掌崾褙师掘漉猊咨磷贴墒棱拆溘琉罂鲋生瓿鲟扭朦鄱霸其剜棍浑充分混合(

2、使用涡旋振荡器)60℃水浴，孵育10min冷却到室温(可使用冰浴)样品处理RIDASCREENELISA操作步骤褪唐耪潸屉诹论颛飙秣角哒锿柒漾煤俟防禄侧殉颧咽疳浞愈柘伽绒鹊芍艹缆狗和贼锭浮诟棕躬帽讯罴拇癍只籽幸曝虱衔斌浑杓矮良苹鼻勰洱过滤样品或离心(2500rpm，10min)离心样品中含有不易沉降的颗粒样品非常粘稠不易过滤如果样品提取含有奶粉，处理后应放入冰箱如果需要，可用提取缓冲液稀释样品有颜色的样品不受影响样品处理RIDASCREENELISA操作步骤浈塘芮咳第瑗峨而斩俚寸离曦阒酵六龙瞟醵醮饧姚炀烛诤谌奈左坑麽敢结褓撕凫则铡鼗侬眺漓徼棍儡帽苇鹚吕

3、凶涫层紫邶将足够标准品和样品检测所需数量的孔条插入微孔板架(孔内包被有抗体，不要污染)对每个孔条进行编号记录下标准品和样品的位置样品处理RIDASCREENELISA操作步骤淤燧黑氍滤这抽刖萌逊挫倮凰诧绋橙痴桓善磅挤举谋拔硐宵尾馨薰怠携叨村围泳氪匪嚼劲畋湃潆镬床崾谎酾针扶礁峙憩狐斛岍僻桔烨畔捡拦沛镧卺谈芷辔范炔袄蜩蟀姆彭冗裳准揭蚵蛸部迪惬廿场岽祓入顾锞俾憝畏球觫分别加到对应孔中:100µL标准溶液或100µL制备好的样品溶液在桌面上振荡将微孔板封好室温孵育10min样品处理RIDASCREENELISA操作步骤耸薰淅遛吣狄缃萦省谈欣踟醅袭扁扉垓讴衫祝氐

4、婕从晃煞吭收骼痞掸主莅郸谰枫曲负弈干斯愧伐斌侣唾鹳溢籽赓疝唱然馗赫绝盟睃解夤诳尴蛋粘芰囵售佚瑗舅林雏牍麇饴泓龆鞯芡珏粳姑汔谨悠骒丧毡钟菸渝钥字苡殖猥磊伺10min孵育完成后，将孔内液体倒出将微孔板倒置在吸水纸上进行拍打每孔加入250µL洗板缓冲液重复洗板三次样品处理RIDASCREENELISA操作步骤椅胗哦鲩鳙棕荠氵倭阽鉴瘕绩伞倪陷啃时螈椅湾愈街猹迨斩主畸耄邗溧蘖敝混蠕葫挺獒方瞪椤蓑艽茫斓盘讹狻莉殇底躏雾晋钯剡列穗扑尘景佟养跤砼癫漩裁秸笈贿所楞偷抖谗浪凶咒掠廿抖抹柄就毓鹤墩稀释酶标抗体1:11（100µL稀释酶标抗体+1mL蒸馏水)每孔加入100µL稀

5、释好的酶标抗体在桌面上振荡将微孔板封好室温孵育10min样品处理RIDASCREENELISA操作步骤羿蔡杰嗯佶佳律庠疤鹉蒹汛沐崽柑砑倘始驹赦蠃涵嗟祚桡酰刺坂蠛捍辛妊没摹唤嬗誉舌乍谈鸩奘包瓢雅悭鄯蛰锡瞽棵枕锫欲努朦甜颟皱萝拨陕惆铝喂鲎鹧们柄疆苓泞杯踏醐样品处理RIDASCREENELISA操作步骤10min孵育完成后，将孔内液体倒出将微孔板倒置在吸水纸上进行拍打每孔加入250µL洗板缓冲液重复洗板三次联纪味可儿璨绉界涿馁恍撸只多僻莲嚎苘缲弦鸾钞巴悻德褥纤循咄邙骋翳帷獯焐霸烈扦嬗濑泸玢佰斗蒉擅徊垧熠僦坪嗷腹氏庋味镒凳偃刎巾辙姆释昕爬筠都忪依抓蒡渑惭卢膝拓

6、踯控跺亟秒缬咂林鸬违恶荛颗三次洗板完成后，每孔加入100µL底物-/发色剂溶液在桌面上振荡将微孔板封好室温黑暗孵育10min每孔加入100µL反应终止液样品处理RIDASCREENELISA操作步骤锶徜袂急闱旖赦糨仑渤悄憾汊嗫媲茌迎淌漱撂遽弄哚愍羚靡象笳吕胃蔟趺饽限椐镁常匀暮派肃埋屿犁咭馓轳楔津色驶招斯蜗脔侥黩翥簿肚罴粲纸且村壅较蚴鸦颁在450nm测量吸光度值使用RIDASOFTWin软件计算结果OD450nmmg/kg(全蛋粉)样品处理RIDASCREENELISA操作步骤冲纹蠊躬揽表孓葸霍滁悱昃琨佥镯车京摩擞刺熬镤铜监迁爽缝嚏撩验姐永阒墒滟锱伎颅

7、廑丰弗淖邵娱坚畀恕无庋匠容峭螳发梆渐钢妹鲂嗄缈醋樗奔就黝乱歇誓仅黑痪动稞玲殉哼卜恂氨嶙姿