吉林大学博士研究生盲审

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1、分类号：S852.65单位代码：10183研究生学号：密级：公开吉林大学博士学位论文H5N1亚型禽流感病毒活病毒实验全过程实验室微环境集群监测和评价Monitoringandevaluation ofH5N1avianinfluenza virus live virus experiments thewholeprocessof laboratory micro-environment cluster作者姓名：专业：基础兽医学研究方向：动物分子病理与免疫病理学指导教师：培养单位：2012年5月5H5N1亚型禽流感病毒活病毒实验全过程实验室微环境集群监测和评价M

2、onitoringandevaluation ofH5N1avianinfluenza virus live virus experiments thewholeprocessof laboratory micro-environment cluster作者姓名：专业名称：临床兽医学指导教师：学位类别：兽医博士论文答辩日期：年月日授予学位日期：年月日答辩委员会主席：论文评阅人：5未经本论文作者的书面授权，依法收存和保管本论文书面版本、电子版本的任何单位和个人，均不得对本论文的全部或部分内容进行任何形式的复制、修改、发行、出租、改编等有碍作者著作权的商业性使用（

3、但纯学术性使用不在此限）。否则，应承担侵权的法律责任。吉林大学博士学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的博士学位论文，是本人在指导教师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日5《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》投稿声明研究生院：本人同意《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》出版章程的内容，愿意将本人的学位论文委托研究生院向中国学术期刊（光盘

4、版）电子杂志社的《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》投稿，希望《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》给予出版，并同意在《中国博硕士学位论文评价数据库》和CNKI系列数据库中使用，同意按章程规定享受相关权益。论文级别：□硕士博士学科专业：基础兽医学论文题目：H5N1亚型禽流感病毒活病毒实验全过程实验室微环境集群监测和评价作者签名：指导教师签名：年月日作者联系地址（邮编）：作者联系电话：5本研究由“国家科技重大专项”（项目编号2009ZX10004）资助FundedbyNationalScienceandTechnologyMajorProject(No.2009Z

5、X10004)5中文摘要雌激素和孕酮对牛子宫TLRs表达及功能的影响子宫内膜炎是奶牛养殖中常见多发病，严重制约奶牛的繁育能力。病原侵入子宫引起炎症反应，与子宫内膜上皮的功能直接相关，子宫内膜上皮细胞通过TLRs等模式相关识别受体来识别病原微生物，并启动一系列信号传导，引起机体防御性的免疫反应。在临床生产实践中子宫内膜炎的发生与E2和P等性激素的生理周期性变化密切相关，性激素通过调节TLR信号传导通路对机体免疫功能产生影响，但相关细节尚不清楚。本研究旨在通过体外实验，从TLRs的角度，通过不同的刺激变化，验证TLR2、4的表达及其诱导产生的细胞因子及炎症趋化因子

6、分泌水平的变化情况，从分子水平分析激素对子宫免疫机制的调节作用，寻找E2、P对子宫内膜免疫调节的作用靶点，并为激素治及预防疗子宫内膜炎的后续试验提供理论依据和体外实验数据。首先，对牛子宫上皮细胞进行培养，分别通过添加LAT、LPS、E2、P，建立细胞模型，确定各种添加物的最佳工作浓度，为后续试验奠定稳定良好的基础。在E2对子宫内膜上皮细胞TLRs影响的实验中，通过添加E2+LAT/LPS、LAT/LPS+E2，检测TLR2/4表达及功能的变化，观察炎性物质刺激细胞前后E2所起的作用。结果显示，加入LTA/LPS，TLR2/4的mRNA、蛋白表达水平显著提高，T

7、LR2/4诱导产生的细胞因子和炎症趋化因子的分泌水平显著增加，说明LTA和LPS作为一种PAMP，能够诱导TLR2和TLR4的促炎作用，增加TLRs的生物学活性，并产生细胞因子等产物，在炎症反应中起重要作用。但是E2对LTA/LPS作用下的子宫内膜上皮细胞中TLR2/4的mRNA、蛋白的表达水平有抑制作用，同时，降低了TLR2/4诱导产生的细胞因子和炎症趋化因子的分泌水平，提示E2的调节作用可以通过TLR来进行，主要是通过抑制其诱导产生的细胞因子和炎症趋化因子来实现的。在P对子宫内膜上皮细胞TLRs影响的实验中，通过添加P+LAT/LPS、LAT/LPS+P，

8、观察炎性物质刺激细胞前后P所起的作用。