(1122-1123班学生用)食品微生物技术实验

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1、第一天实验时间：2015年5月23日实验时间安排：12级食检2-3班：下午13:00开始。实验分组：12组，卫生：第1、2组实验内容：见下表。（先配后包）第一组1.配制磷酸盐缓冲稀释液：所用试剂：磷酸盐缓冲贮存液配制方法：配1000mL磷酸盐缓冲稀释液(用蒸馏水稀释1.25mL贮存液到1000mL)分装容器：18ⅹ180mm试管、250mL三角瓶分装量：9mL（试管，精确）、90mL（三角瓶，精确，内置10粒玻珠）分装数量：70管、26瓶总配制量：3600mL高压条件：121℃，15′（大肠菌群培养基）第二组1.配制无菌水：所用试剂：蒸馏水分装容器：500m

2、L三角瓶、18ⅹ180mm试管分装量：350mL、9mL（试管，精确）分装数量：14瓶、40管高压条件：121℃，15′2.配制缓冲蛋白胨水（BPW）增菌液：所用试剂：BPW增菌液分装容器：250mL三角瓶（内放置玻珠10粒）分装量：90mL分装数量：13瓶总配制量：1200mL高压条件：121℃，15′（沙门氏菌培养基）第三组1.配制月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤：所用试剂：LST肉汤分装容器：18ⅹ180mm试管分装量：10mL（带倒管）分装管数：60管总配制量：700mL高压条件：121℃，15′（大肠菌群培养基）第四组1.包扎13个150mL空的

3、三角瓶（加硅胶塞）、4个空的白瓷杯、4个100mL量筒、2长玻棒（5支）、镊子和剪刀72套、10mL吸管24支、涂布棒36个装入电热干燥箱，进行干热灭菌。（用棉绳包扎）灭菌条件：150℃2小时。2.包扎枪头盒14个（内含60支枪头）。第五组1.配制EC肉汤：所用试剂：EC肉汤分装容器：18ⅹ180mm试管分装量：8mL（带倒管）分装管数：60管总配制量：700mL高压条件：121℃，15′（大肠菌群培养基）第六组1.配制煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤：所用试剂：BGLB肉汤分装容器：18ⅹ180mm试管分装量：10mL（带倒管）分装管数：60管总配制量：700

4、mL高压条件：121℃，15′（大肠菌群培养基）10第七组1.配制无菌水：所用试剂：蒸馏水分装容器：250mL三角瓶分装量：90mL（精确，内放置玻珠10粒）分装数量：13瓶高压条件：121℃，15′2.配制营养琼脂斜面：所用试剂：营养琼脂分装容器：15ⅹ150mm试管分装量：4mL分装管数：55管总配制量：250mL高压条件：121℃，15′注：高压后取出摆成斜面备用。（霉菌和酵母菌培养基）第八组1.配制孟加拉红培养基：所用试剂：孟加拉红培养基分装容器：250mL三角瓶分装量：100mL分装管数：13瓶总配制量：1400mL高压条件：121℃，15′（霉菌

5、和酵母菌培养基）2.配制胰胨大豆琼脂斜面（TSA）：所用试剂：胰胨大豆琼脂分装容器：15ⅹ150mm试管分装量：4mL分装管数：55管总配制量：250mL高压条件：121℃，15′注：高压后取出摆成斜面备用。（副溶血性弧菌培养基）第九组1.配制EC肉汤：所用试剂：EC肉汤分装容器：18ⅹ180mm试管分装量：8mL（带倒管）分装管数：60管总配制量：700mL高压条件：121℃，15′（大肠菌群培养基）第十组1.配制平板计数琼脂：所用试剂：平板计数琼脂分装容器：250mL三角瓶分装量：150mL分装瓶数：13个总配制量：2100mL高压条件：121℃，15′

6、第十一组1.配制月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤：所用试剂：LST肉汤分装容器：18ⅹ180mm试管分装量：10mL（带倒管）分装管数：60管总配制量：700mL高压条件：121℃，15′（大肠菌群培养基）第十二组1.配制煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤：所用试剂：BGLB肉汤分装容器：18ⅹ180mm试管分装量：10mL（带倒管）分装管数：60管总配制量：700mL高压条件：121℃，15′（大肠菌群培养基）注意：第2组的无菌水用于配制TTB、BS、DHL、TCBS培养基；第4组灭菌的白瓷杯和100mL量筒用于配制以上培养基。带倒管培养基用小灭菌锅效果较好。

7、10第二天实验时间：2015年5月24日上午实验时间安排：12级食检2-3班：上午第二大节。卫生：第3组实验内容1.大肠菌群样品接种：称取样品于磷酸盐缓冲稀释液中稀释到10-2，10-3，实验选择稀释度为10-1，10-2，10-3；使用培养基为LST肉汤。（每个稀释度接3管共9试管，36±1℃，48±2h）2.沙门氏菌样品接种：称取样品于缓冲蛋白胨水增菌液（BP）中进行前增菌4h。（37±1℃，每组1瓶BP，不用包）3.第三组配制四硫磺酸盐煌绿（TTB）基础液：用第一天的无菌水、量筒、白瓷杯、150mL灭菌三角瓶。（9瓶，100mL/瓶）注意：TTB增菌基

8、础液，上午配好一些，配好后瓶底会有一些白色沉淀。下午