uv-型紫外分光光度计操作指导书

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1、UV-2600型紫外分光光度计操作指导书1概况1.1仪器概况：UV-2600型紫外分光光度计是由日本岛津（Shimadzu）生产制造，与功能强大的操作软件UVProbe结合，操作简单方便，且符合SH/T0181方法的测量精度要求。1.2主要技术参数波长范围185nm～900nm（使用积分球附件ISR-2600Plus时220nm～1400nm）分辨率0.1nm波长准确性±0.3nm谱带范围0.1、0.2、0.5、1、2、5nm测光方式双光束方式杂散光0.005%以下检测器光电倍增管R-928测光范围-5～5Abs比色池1cm光源50W卤素灯、氘灯单

2、色器切尼尔-特纳单色器主电压AC100V～240V主频率50/60Hz1.3使用条件操作温度：15～35℃操作湿度：30%～805%2仪器结构仪器由UV-2600型紫外分光光度计和计算机组成。3操作步骤3.1开机在使用前先确认仪器和计算机的工作电源，检查仪器样品室应无遮挡光路的物品。确认后先开启计算机，然后开启仪器电源。待分光光度计外侧的指示灯显示绿色时，启动电脑桌面上的UVPROBE程序。首先从下拉式菜单的仪器项上追加需要的仪器，操作完毕如下图①所示，然后点击上图的连接键②，这样仪器与计算机连接（当然，中间的通讯电缆的连接、通讯口的指定等都是必须

3、的，此处不再赘述）并开始下示的初始化面。①②⑧①⑨②⑩③⑾④⒀⑿⑥⑤⒁⑦初始化大约需要5分钟左右，进行一系列的检查和初置，如一切顺利通过就可以开始测定。3.2测定首先选择测定的方式，在主菜单上能发现右图所示的各键，自左至右分别为：①报告生成器：用于制作各种格式的报告。②动力学测定方式：一般测定吸收值随时间的变化，通常用于酶反应随时间的变化。③光度测定（定量）方式：可进行多波长、单波长、峰高或峰面积定量。校准曲线可使用多点、单点、K因子等方法。由于具有自定义方程的功能，DNA/蛋白质测定等以前需要特殊选购的软件才能进行的工作，使用UVPROBE可自编

4、程序进行测定。④光谱测定方式：可进行紫外可见区的光谱测定。3.3光谱测定方式3.3.1参数的设定点击菜单栏上的键，即可出现如下图所示的选择测定条件的画面：在此对话框中可选择波长测定的范围、扫描的速度、采样间隔等条件。点击图中［试样准备］标签，可输入重量、体积、稀释因子、光程长等信息。点击图中［仪器参数］标签，可选择测定种类（吸收值、透射率、能量、反射率）以及通带（狭逢）等条件。数据处理面板方法面板图象面板点击主菜单上的键，可分别开关图象面板（图中的左键）、数据处理面板（中）以及方法面板（右键）。①　②　　③　④　　⑤3.3.2光谱测定首先点击上图的

5、②进行基线校正，然后点击③波长设置到500nm，再点击①自动调零。为何要如此做？原因非常简单，由于一般的分光光度计的能量在500nm左右最强，在此自动调零可得到最正确的基线。通常上述操作在开机后进行一次就足够了。此后，设置样品点击④键即可开始测定。3.4光度测定方式3.4.1参数的设定点击菜单栏中的键，出现下图：测定的方式选择测定波长的列名选择和登录波长登录后的波长显示区此处显示的波长类型是“点”表示测定高度，如果选择的是范围，则需输入起始和结束波长，并可选择最大、最小、峰、谷或面积等作为定量的依据。无论如何选择，波长都是必须的，并要加入以后才有效

6、。在某单栏上有右列各键，点击以后分别出现标准表（最左）、样品表（左2）、工作曲线图（右2）和样品图（最右）。工作曲线标准表样品图样品表3.4.2定量测定首先如前所述，选择了点及波长，然后在方法中选择校准，在此决定用工作曲线法定量，并选择多点、单点或K因子法等。进行定量测定也需要基线校正和自动调零，方法如前面所述。此后，样品室内逐个放入标准，点击上图下方的读数键即可。注意，无论是测定标准或未知样品，必须输入名称才有效。标准测定完毕，工作曲线自动显示。接下去就可测定未知样品的浓度了。有时不测定浓度，只测定某些波长的读数，则在校准方法中选择“原始数据”，

7、在登录时选择若干需要的波长，即可测定各波长的读数。使用SH/T0181方法标准进行光谱测定时，点击③设置波长到287.5nm，再放入两只均装有光谱纯异辛烷的比色皿，点击①自动调零，最后，将外面一只比色皿中装入需要测定的样品，点击④键读数，即可测得在该波长处的样品的吸光度值。在工作曲线图象上点击鼠标右键，选择属性，可从该图象上得到许多有用的信息，见下图：只需在这些显示的项目中做标记，相应的信息即出现在工作曲线图象的左下方。见下图的划圈部分：所谓K因子法实际上可称为已知工作曲线法（而且不局限于直线），即工作曲线回归方程的系数和次数已知，故而只要输入这些

8、系数以及工作曲线的次数。这一方法对工作曲线较为稳定的日常分析非常有效。设置方法见下图：3.5动力学分析在菜单栏中点击方法键