猪链球菌病的诊治开题报告

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1、河北北方学院毕业论文开题报告题目：猪链球菌的分离培养与鉴定姓名：庞铭院系：动物科技学院专业：动植物检疫年级：2007级动植物检疫本科班学号：20071040137指导教师：薛永志开题时间：2010年11月15日河北北方学院教务处制7论文题目猪链球菌的分离培养与鉴定课题来源研究方向病原学报告内容：1立题依据（研究的目的与意义）猪链球菌病(Streptococcosis)是危害养猪业的一种常见人畜共患传染病，属国家规定的二类动物疫病[1-3]，猪链球菌根据荚膜多糖抗原性的差异可以分为35个血清型(1～34型及1/2型)，其中2型是从病猪体内最常分离

2、出的血清型。猪链球菌能引起猪的败血症、支气管肺炎、脑膜炎、心内膜炎、关节炎、动脉炎、脓肿及新生仔猪死亡，同时可感染人，也是一种重要的人畜共患传染病。20世纪80年代后期发病有严重之势，在许多地方呈大规模发生，因此建立行之有效的、在基层能快速推广的诊断方法成为当务之急。猪链球菌病主要发生于仔猪和架子猪,体温升高,呈稽留热型,食欲废绝,精神沉郁,喜卧,粪便干硬;眼结膜潮红、充血、流泪;部分病猪出现多发性关节炎、跛行、爬行或不能站立;耳廓、胸、腹下及四肢内侧皮肤呈紫红色,并有大量出血斑;有的病猪出现共济运动失调,无目的的走动、磨牙、空嚼等神经症状。病

3、的后期出现呼吸困难,四肢麻痹。病的经过急促,发病后常在1~3d内死亡。本次实验病料采自唐山市滦南县某猪场，养殖户讲已发病5d,曾经请当地兽医人员治疗,诊断为高致病性蓝耳病,应用干扰素和安乃近等药物治疗,疫情并没有得到控制。推断可能是诊断失误,药不对症造成的。本文利用传统的试验方法对疑似病例进行病原分离、血清学鉴定、毒力试验及药敏试验，从而为猪链球菌病的诊断和流行病学调查提供理论依据。2研究内容72.1通过分离细菌的形态观察、培养特性、生化试验、毒力试验和药敏试验结果，表明分离菌为猪链球菌。目前在猪链球菌中已鉴定出的35种血清型(1～34型及1/

4、2型)中，2型是最有致病力，最常从病猪体内分离出的血清型[4-5]，而猪链球菌主要凭借血清学方法进行定型鉴定[3，8-9]。2.2通过药敏试验表明猪链球菌具有较强的抗药性，而且不同药物的敏感性也存在较大差异，对土霉素、链霉素、青霉素、庆大霉素产生耐药性，因此在治疗时应选择特异有效的抗生素，掌握适应症，不能滥用抗生素，注意用药剂量和疗程，在饲养预防过程中及时接种猪链球菌的疫苗，达到防治该病的目的。2.3分析结果3研究方法与技术路线3.1研究方法3.1.1病原分离无菌采集疑似链球菌病病死猪肝、脾、肾、淋巴结和关节液，分别接种马丁肉汤中，37℃需氧培

5、养24h后，革兰氏染色后镜检[5]，并将镜检后含有疑似菌的培养物划线接种于鲜血琼脂平板上，37℃培养24h，挑取平板上单个可疑菌落革兰氏染色镜检，确定为待检目的菌后接种于马丁肉汤中，经培养无杂菌生长者，置4℃冰箱中备用。3.1.2分离菌株的鉴定3.1.2.1生化试验：随机抽取4份上述分离菌肉汤培养物，标记为1、2、3、4号，分别接种于蔗糖、山梨醇、棉实糖、葡萄糖、甘露糖、蕈糖、乳糖、菊糖、水杨苷、马尿酸钠培养基，37℃培养24h后，观察其对糖的利用情况。3.1.2.2血清学鉴定：将1、2、3、4号菌肉汤培养物分别经缓冲肉汤培养8h，通过3000

6、r/min离心10min，PBS洗涤2次，用pH值7.2的0.01mol/LPBS制成细菌悬液，取1滴上述细菌悬液与适当的抗血清在洁净玻片上混匀，立即观察凝集现象。3.1.2.3毒力试验：小鼠共25只，分5组，每组5只，前4组小鼠分别腹腔注射1～4号马丁肉汤20h培养物0.5ml/只，第5组作为马丁肉汤空白对照组，观察各组发病及致死情况。3.1.2.4药敏试验：采用纸片扩散法，用无菌棉签蘸取分离菌马丁肉汤培养物，均匀涂布于9cm鲜血平板，待稍干后，用无菌镊子将各种药敏纸片分别平贴在培养基表面，4℃、2h使药物扩散，然后置37℃培养20～24h，

7、观察结果。3.1.2.5药物治疗试验：选取敏感药物对20头猪进行治疗试验，另选20头猪作对照，观察治疗效果。3.2技术路线7采集病料接种于马丁肉汤培养基，37℃需氧培养24h后革兰氏染色镜鉴疑似物接种于鲜血琼脂平板37℃培养24h挑取单个可疑菌落革兰氏染色镜检目的菌接种于马丁肉汤无杂菌生长者备用分离菌株的鉴定生化实验血清学鉴定毒力实验药敏试验药物治疗试验数据整理及实验结果分析4、研究进度安排2010年12月：确定主题，明确研究内容，拟订计划。2011年3-4月：收集资料，进行试验。2011年5月：总结经验教训，整理数据，写出初稿。2011年6月

8、初：在指导教师帮助下，修改、补充论文，定稿。2011年6月中旬：进行答辩。5、预期研究结果通过分离细菌的形态观察、培养特性、生化试验、毒力试验和药敏试