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1、HPLC-1100型高效液相色谱仪-化学工作站操作步骤———二极管阵列检测器(DAD)——一、开机关机开机1.开PC机,进入WindowN.T4.0桌面。2.开LC各部件。接通电源后,各部件LED指示灯显绿色。待通讯自检成功,在线脱气机的右上角黄灯灭,而四元泵、柱温箱和检测器的右上角黄灯亮。点击Start→Programs→Chemstation→instrument2online图标,进入online工作站的Method&RunControl界面。3.系统初始化(目的:排气泡)(1)打开LC仪的Purge阀,调大流量至5ml/min,分别以100%A(H2O)和
2、100%B溶剂(如MeOH)冲洗A、B通道至无气泡。(2)调低流量及调节B溶剂百分比至所需值后,关闭Purge阀。1.系统平衡(目的:稳定色谱柱、柱温箱温度、及DAD灯能量等)。(1)调出方法。由Method菜单→点击LoadMethod→选中所需方法,OK。(以5倍以上死体积的流动相冲洗平衡色谱柱,约需30min)(2)适当时刻(进样前10分钟)点击systemon,以保证温度及灯能量稳定。(3)打开onlinesignal窗口,测基线。待基线平稳后即可进样。5填写样品信息。由Runcontrol菜单,点击sampleinformation,输入对样品的描述。6
3、运行方法或进样。对自动进样器,点Runmethod;对手动进样,则先将手动进样阀搬至Load8位置,再将吸好样品的平头针注射器插入阀的进样孔推针进样,并快速将进样阀由Load位置顺时针搬至inject位置,然后再取下注射器洗净备用,并用干净的溶剂清洗进样口。5由进样阀注入定量环中的样品,在inject位置被高压系统的淋洗液带入分离柱分离,化学工作站控制自动检测信号、收集并分析处理数据。样品分析完毕,屏幕即根据Method所设定的积分参数及报告格式,自动积分并显示结果。选print打印结果;点击close则回到主画面。重复5、6步骤进行多个样品分析。关机1.样品分析
4、完毕后,先关检测器的UV/VIS灯,登记仪器运行时间及使用情况。2.用较强的溶剂如:100%的(MeOH)甲醇或(CAN)乙腈以1ml/min的流量,冲洗柱子20~30分钟,注射器洗净放好。3.关闭各程序窗口,关闭显示屏仪器各部件图标,关计算机,然后关仪器各部件电源。4.废液拿走,妥善处理或回收再用,注意保护环境,切勿乱倒。二、建立方法步骤一)优化仪器参数,建立分离方法1.进入工作站的Method&RunControl界面。单击Method,选EditEntireMethod。2.在EditMethodInstrument2对话框,从方法所包含的下列4项,通过点中
5、前面的空白格选欲编缉项。MethodInformationInstrument/AcquisitionDataanalysisRunTimechecklist(注:未选中的项表示不被编缉,使用原方法参数设置)3.在弹出的MethodInformationInstrument2对话框,填写对方法描述信息。4.进入仪器参数设置(1)在弹出的Setuppump对话框,输入泵操作参数。在control栏,输入流量Flow,*stoptime,**posttime在solvents栏,输入溶剂A如(H2O)的%、溶剂B如(MeOH)的%。8在pressurelimits栏的
6、Max和Min右边,输入压力高限和低限(可设为正常操作压力±20bar,或设Max为柱子最高承受压力的1/2)在timetable栏,输入梯度洗脱时间表。(也可通过单击任一图标,即可进入该模块参数设置。如溶剂的设置:点输液泵图标,选Setuppump,在Solvents栏中输入A、B、C、D溶剂名称;点溶剂瓶图标,在SolventBottlesFilling中输入A、B、C、D各溶剂的实际体积数,点OK确定并退出。)*stoptime泵停止采集数据时间,但泵仍在运行。**posttime由采样结束,至下一次采样时间。(1)在柱温箱参数设置界面,选Notcontro
7、lled点OK.(2)检测器DAD参数设置在Signals栏,输入A~E5个可选通道的样品检测波长Sample和带宽BW及参比波长Refrence和带宽BW。在Spectrum栏,Range-输入光谱波长采集范围Store-输入存储方式Step-输入采谱步长在time栏,输入与泵相同的参数在Requiredlamp—选所需的灯UVorVIS在Peakwidth输响应时间(一般选0.1)在Outbalance选prerun在Slit输入可选狭缝值如:1,2,4,816nm在timetable输时间表。所有参数设好后,点OK。1.输入运行时间表(RunTimechec
8、klist