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时间:2018-07-15
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1、1.实验动物的微生物、遗传学分类及概念(1)按遗传学控制原理分类近交系动物:纯系动物。繁殖方法采用兄妹交配、亲子交配连续繁殖20代以上而培育出纯品系动物(以小鼠为代表)。20代后,基因中一般不存在暗藏的隐性基因。特征:基因纯合性,遗传稳定性,表型均一性,个体性,分布广泛性,资料可查性。突变系动物:保持有特殊突变基因品系动物,正常染色体发生变异或碱基对改变,具有各种遗传缺陷,没有明确遗传等位点,经淘汰选拔,仍能维持稳定的遗传物质。杂交群动物:杂交一代动物或系统杂交动物。两个近交品系之间进行有计划的交配所获得第一代动物(简称F1动物)。特征:具有较
2、强生命力,对疾病抵抗力强,寿命较长,易饲养。封闭群动物:不从外部引进其它任何品种新血缘,由同一血缘动物以非近亲方式进行随意交配,在固定场所至少繁殖四代以上动物群。(避免亲子、表兄妹之间相互交配,保持有一定遗传差异,既有群体一般遗传特性,又具备杂合性)。(2)按微生物学的控制原理分类:无菌动物(GF):在当前的检测水平下,体内外无法检出任何寄生物(寄生虫、微生物)的动物。悉生动物(GN):体内带已知微生物的动物。原是无菌动物,系人为将微生物丛投入到动物体内。较无菌动物生活力强,分为单菌、双菌和多菌动物。SPF级动物:机体内无特定微生物和寄生虫存在
3、动物(非特定微生物和寄生虫允许存在)。清洁级动物(CL):较积极微生物学控制,不带对动物危害大、对科研干扰大的病原菌,饲养在屏障卫生环境里的动物,称最低限度疾病动物。普通级动物(CV):教学和示教动物,不带人蓄共患病病原体及体外寄生虫(结核杆菌、痢疾、沙门氏菌、肝炎病毒、出血热和螨虫等)。2.转基因动物概念,如何制备转基因动物:用物理、化学、生物手段将确定外源基因通过生殖细胞或早期胚胎导入动物染色体,其基因组内稳定整合导入外源基因,能遗传给后代的一类动物,使其获得人类需要新功能。技术程序:(1)分离编码某一目的产物基因或分离对动物表型有作用某一
4、基因。(2)制备DNA重组子(subset),使其能在选定组织中表达,从而饶过正常存在于动物机体的代谢过程。(3)将DNA重组子在体外转移到一个刚刚受精单细胞卵中。导入法有显微注射法;逆转录病毒感染法;精子载入法;胚胎干细胞介导法;电转移法。其目的是使动物基因组中包括一个外源性DNA片段(4)将受精卵培育成个体3.动物实验的对照类型(1)空白对照:不给任何措施的情况下观察动物自发变化的规律。(2)实验对照:采用与实验组相同操作条件下对照(3)有效(标准)对照:常用于药物研究。对一新药疗效可用一已知有效药或能引起标准反应药物做对照,可考核实验方法
5、可靠性,又可通过比较,了解新药疗效和特点(4)配对对照:同一种动物后代分成左右两部分进行对照和实验以比较差异,此法可大大减少抽样误差,如不同眼睛比较对照期和实验期差异(左眼试验,右眼对照)。实验中还可用同卵双胎或同窝动物配对。(5)组间对照:将实验对象分成两组或几组比较其差异。这种对照个体差异和抽样误差比较大,可用交叉对照方法以减少误差。(6)历史对照与正常值对照:此种对照要慎重,条件、背景、指标和技术方法相同才进行对比,否则得出不恰当的甚至错误结论。4.成年大小鼠的日龄,体重及平均寿命小鼠大鼠成年日龄(天)65-9085-110成年体重(克)
6、20-28200-280平均寿命(年)1-22-35.急慢性动物实验各自的优缺点(1)急性动物实验:大多数急性动物实验是用活体解剖方法,把失去知觉动物(全麻或局麻下)某一功能系统,器官,组织暴露于直视之下或置于实验仪器准确控制之下;或用适当方法,取出到动物体外,置于人工环境中,给予人工处理,观察其反应与活动,研究其功能,或对某种加予因素反应及反应机制一些动物实验的总称。1)优点:在短时间内可获得较多有价值分析性资料。把研究的器官、组织,放在眼前或仪器准确控制之下,直接观察并记录它的活动与反应,可排除一些复杂因素影响,从而使所观察某一因素、某几个
7、因素起作用。2)缺点:动物在急性实验中处于失常状态,全身麻醉,失去知觉,失去高级神经系统对机体整体的调节作用,必然会导致失去调节器官或组织功能状态发生变化,从而使它对某些因素反应反常。其次,动物在实验中遭受手术创伤、失血等损伤。急性动物实验不能完全说明整体动物在生理条件下功能活动规律。(2)慢性动物实验:无菌条件下,给动物施行一定的实验外科手术(各种瘘管,脏器的切除或移植),待其恢复健康后再行实验或观察;把一定物理性、化学性、生物性等致病因素作用于动物,复制成各种疾病模型,详细研究和观察疾病的发生,发展规律;在动物模型制成后细致研究和观察各种实
8、验性措施的效果。1)优点:保持了实验动物机体的完整性与外界环境统一性。动物处于比较接近自然的生活状态,所观察到结果较符合客观实际,比较正确可靠。2)缺
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