选修三基础知识汇总1

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1、选修三、背诵材料：1、基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。变异类型——基因重组2、基因工程的基本工具限制酶、DNA连接酶、运载体（常见的是质粒）3、限制酶的功能：能够识别特定的脱氧核苷酸序列，并在特定位点将两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。切割时不能破坏目的基因、标记基因。4、酶DNA连接酶：连接两个双链DNA片段形成磷酸二酯键；限制酶：催化磷酸二酯键水解，形成DNA片段；DNA聚合酶：单个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键，解旋酶：氢键断开RNA聚合酶：

2、单个核糖核苷酸之间形成磷酸二酯键DNA酶：催化磷酸二酯键水解，形成脱氧核苷酸5、基因工程的基本操作程序是：①目的基因的获取②基因表达载体的构建③将目的基因导入受体细胞④目的基因的检测与鉴定7、目的基因的来源：（1）从自然界中已有的物种中分离。（2）人工合成【常用方法有逆转录法（提取目的基因的mRNA)_和化学合成法_，】获取目的基因的方法有：从基因文库中获取、利用PCR技术扩增目的基因，人工合成9、基因工程的核心是基因表达载体的构建（限制酶+DNA连接酶处理质粒和目的基因）。基因表达载体的组成是

3、：启动子＋目的基因＋终止子＋标记基因+复制原点。启动子：位于DNA上，其上有RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动转录6起始密码：位于mRNA上，开始翻译标记基因的作用：鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素抗性基因（培养基中加入抗生素进行筛选）。目的基因与标记基因一般不是同一种基因。11、（1）将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法（Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞的染色体），其次还有基因枪法和花粉管通道法等。受体细胞若是体细胞

4、，还要利用植物组织培养技术。（2）将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。受体细胞一般是受精卵（具有全能性），若为体细胞，则需采用细胞核移植技术。（3）将目的基因导入微生物细胞：钙离子处理，使细胞成为感受态细胞。12、目的基因的检测与鉴定：①首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。②其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用分子杂交技术。（①②都用基因探针：用放射性同位素标记的目的基因的单链，原理都是碱基互补配对）③最后检测目的

5、基因是否翻译成蛋白质，方法是抗原－抗体杂交。①②③都是观察有没有杂交带。有时还需进行个体生物学水平的鉴定，即接种实验（即用病原体感染或让虫子吃）。基因工程的优点：定向改造生物的遗传性状14、蛋白质工程通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，而蛋白质工程生产的蛋白质是自然界不存在的。6程序：15、植物组织培养技术原理：植物细胞的全能性；植物体细胞杂交技术原理是：细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，

6、意义：克服了远缘杂交的不亲和的障碍。★植物细胞全能性实现的条件：离体、一定的营养物质、植物激素（生长素、细胞分裂素）、适宜的外界条件。脱分化再分化再分化16、植物组织培养技术(无菌操作)过程：离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织胚状体、丛芽等―→植物体。20、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中到10代（原代培养）→出现接触抑制的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养到5

7、0代左右绝大多数细胞死亡，少数成为无限增殖的细胞系（癌变特征）。原理：细胞增殖21、动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度：哺乳动物多是36.5℃＋0.5℃；pH：7.2～7.4。④气体环境：95%空气＋5%CO2。O2是细胞代谢

8、所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。22、动物体细胞核移植技术中选用去核卵(母)细胞做受体细胞的原因：6含有使细胞核表达全能性的物质原理：细胞核的全能性。25、动物细胞融合最大的应用——制备单克隆抗体。单克隆抗体的制备中必须事先对小鼠注射特定抗原，使其产生浆细胞（B淋巴细胞），然后与骨髓瘤细胞融合，得到3种融合的细胞；因此需要经过两次筛选，第一次用选择性培养基，选出杂交瘤细胞，第二次需要进行克隆化培养和抗体检测，选出能分泌所需单一抗体的杂交瘤细胞。26、（1）杂交瘤细胞的特点：既能大量