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时间:2018-07-15
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1、上皮性卵巢癌患者外周血Th1/Th2细胞因子表达水平的变化作者:袁少洋,王爱丽,庞启贞,林英姿,王历,卢单位:1海南省人民医院妇产科,海南海口,2海口市人民医院妇产科,海南海口,海南医学院:3检验系,4附属医院妇产科,海南海口【摘要】目的:探讨上皮性卵巢癌患者外周血Th1/Th2细胞因子表达水平.方法:用刺激物刺激细胞,增加细胞内细胞因子的表达,再加入荧光标记的特异性抗细胞因子单克隆抗体,流式细胞仪检测特异性细胞因子表达水平.结果:上皮性卵巢癌患者Thl型细胞因子IL2,IFNγ表达水平依次
2、为(9.47±3.56)ng/L,(10.12±2.51)ng/L,而正常对照组依次为(12.20±2.48)ng/L,(13.38±2.89)ng/L,差异均有统计学意义(P<0.05);而Th2型细胞因子IL4,IL10表达水平依次为(4.56±0.78)ng/L,(5.26±2.27)ng/L,而正常对照组依次为(1.24±0.39)ng/L,(1.46±0.52)ng/L,两组差
3、异有统计学意义(P<0.05).结论:卵巢癌患者Thl/Th2失调,Th1型反应弱,Th2型反应优,可使肿瘤细胞发生免疫逃逸.【关键词】卵巢肿瘤;Th1/Th2型细胞因子;基因表达0引言辅助性T细胞(Thelper,Th)亚群Thl/Th2的变化在恶性肿瘤免疫逃逸中起着重要的作用,Th2类细胞因子高表达而Thl类因子低表达是引起恶性肿瘤免疫逃逸的原因之一.在正常生理情况下Thl,Th2两类细胞处于相互抑制,相互转化的平衡状态,一旦平衡被打破,机体会处于Thl优势或Th2优势的漂移状态,从而出现各种病理
4、反应,甚至发生肿瘤.大量研究表明,恶性肿瘤患者体内细胞因子的表达以Th2型细胞因子占优势.卵巢恶性肿瘤患者是否存在类似现象,国内鲜见报道.我们采用流式细胞仪通过Cytodetect试剂盒检测上皮性卵巢癌患者外周血Thl/Th2细胞分泌细胞因子的表达水平,观察Thl/Th2表达状况及与肿瘤发生、发展和预后的关系,为卵巢恶性肿瘤的免疫治疗提供实验依据.1对象和方法1.1对象海南省人民医院、海口市人民医院、海南医学院附属医院妇产科200606/200706收治上皮性卵巢癌患者62例,年龄(42.5&plusm
5、n;5.3)岁;诊断标准以手术分期及术后病理为依据.组织学分型:浆液性腺癌41例,黏液性腺癌21例.高分化37例,中分化19例,低分化6例.临床分期:Ⅰ期25例,Ⅱ期18例,Ⅲ期11例,Ⅳ期8例;其中26例有淋巴结转移.所有病例均无急慢性疾病史及自身免疫疾病史,同时排除妊娠、严重感染,抽血前未接受任何治疗.对照组20例健康妇女来自妇科门诊常规体检的健康女性,年龄(43.7±4.6)岁,妇检正常,无疾病史.人Thl/Th2细胞因子流式检测试剂盒,购于美国BD公司.主要组分:人Th1/Th2细胞因
6、子原液;分析稀释液;被覆抗人Thl/Th2细胞因子抗体的微球液(Beads);PE试剂.FACSCalibur型流式细胞仪购自美国BD公司,Thl型细胞因子主要检测IFNY和IL2,Th2型细胞因子主要检测IL4和IL10.1.2方法术前3~6d抽患者外周静脉血2mL,取新鲜血清备用.按试剂盒操作流程说明进行.主要步骤:配制混合Beads液;加样、反应,每只试管均加入Beads液、PE试剂、待测血清各50μL,充分混匀,室温闭光3h;加1mL洗液至每管,2000r/min离心5min,弃上清液
7、,加200μL洗液混匀后立即上机检测;使用相应数据处理软件,根据由标准品制作的曲线得出受检样品浓度.统计学处理:计量数据采用x±s表示,应用SPSS13.0统计软件进行t检验,P<0.05为差异有统计学意义.2结果2.1上皮性卵巢癌患者Th1/Th2细胞因子表达上皮性卵巢癌患者Th2型细胞因子IL4,IL10细胞百分比较正常对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01).Thl型细胞因子IL2,IFNγ较正常组降低(P<0.01),差异有统计学意义(表
8、1).表1上皮性卵巢癌患者Th1/Th2细胞因子表达(2.2Th1/Th2细胞因子表达与上皮性卵巢癌临床病理的关系IL2,IFNγ,IL4,IL10的表达水平在浆液性和黏液性组织学分型中无统计学差异(P>0.05);但是与上皮性卵巢癌的分化程度相关,低分化性癌组织中IL2,IFNγ的表达下降;IL4,IL10的表达升高(P<0.05);而且,Th1/Th2细胞因
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