通便功能评价方法(征求意见稿)及修订说明

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1、附件10：通便功能评价方法（征求意见稿）保健食品评价试验项目、试验原则及结果判定Items,PrinciplesandResultAssessment1试验项目1.1动物实验1.1.1体重1.1.2小肠运动实验1.1.3排便时间1.1.4粪便重量1.1.5粪便粒数1.1.6粪便性状1.2人体试食试验1.2.1症状体征1.2.2粪便性状1.2.3排便次数1.2.4排便状况2试验原则2.1动物实验和人体试食试验所列指标均为必做项目。2.2实验中复方地芬诺酯或洛哌丁胺的造模剂量应通过预实验确定。2.3除对便秘模型动物各项必

2、测指标进行观察外，还应对正常动物进行观察，不得引起动物明显腹泻。2.4排便实验中模型成立的条件为排首粒黑便时间、5或6小时内排粪便重量和粪便粒数与阴性对照组差异均有显著性。2.5排便次数的观察时间试验前后应保持一致。2.6在进行人体试食试验时，应对受试样品的食用安全性作进一步的观察。3结果判定3.1动物实验：5或6小时内排粪便重量和粪便粒数任2一项结果阳性，同时小肠运动实验和排便时间任一项结果阳性，可判定该受试样品通便功能动物实验结果阳性。3.2人体试食试验：排便次数明显增加，同时粪便性状和排便状况任一项结果明显改善

3、，可判定该受试样品具有通便功能的作用。2通便功能检验方法MethodfortheAssessmentofFacitatingFecesExcretionFunction1动物实验1.1小肠运动实验1.1.1原理经口灌胃给予造模药物复方地芬诺酯或洛哌丁胺，建立小鼠小肠蠕动抑制模型，计算一定时间内小肠的墨汁推进率，来判断模型小鼠胃肠蠕动功能。1.1.2仪器和材料1.1.2.1仪器和试剂手术剪、眼科镊、直尺、注射器、天平、活性碳粉、阿拉伯树胶、复方地芬诺酯或洛哌丁胺。1.2.2.2试剂配制1.1.2.2.1墨汁的配制：精确

4、称取阿拉伯树胶100g，加水800ml，煮沸至溶液透明，称取活性碳粉100g加至上述溶液中煮沸三次，待溶液凉后定容到1000ml，于冰箱中4℃保存，用前摇匀。1.1.2.2.2复方地芬诺酯或洛哌丁胺混悬液的配制：复方地芬诺酯剂量为5-6mg/kgBW,洛哌丁胺剂量为5-6mg/kgBW。依据复方地芬诺酯或洛哌丁胺的实用剂量取用，用研钵研碎呈粉末后按实验所需浓度配制，注意要待溶质完全溶解、充分摇匀后使用。1.1.3实验方法1.1.3.1实验动物选用成年健康雄性小鼠，体重在18-22g，每组10-15只。1.1.3.2剂

5、量分组及受试样品给予时间实验设三个剂量组，一个阴性对照组，一个模型对照组。以人体推荐量的10倍为其中一个剂量组，另设二个剂量组，必要时设阳性对照组。阴性对照组和模型对照组同样途径给溶剂。受试样品连续给予时间7天，必要时可延长至15天。1.1.3.3实验步骤111.1.3.3.1模型的建立给受试样品7天后，各组小鼠禁食不禁水20小时。模型对照组和三个剂量组灌胃给予复方地芬诺酯5-6mg/kgBW,或洛哌丁胺5-6mg/kgBW，阴性对照组给蒸馏水。1.1.3.3.2指标测定的方法给复方地芬诺酯或洛哌丁胺0.5小时后，剂

6、量组灌胃给予含相应浓度受试样品的墨汁（含10%活性碳粉、10%阿拉伯树胶），阴性和模型对照组给墨汁灌胃。25分钟后立即脱颈椎处死动物，打开肠腔分离肠系膜，剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管，置于托盘上，轻轻将小肠拉成直线，测量肠管长度为“小肠总长度”，从幽门至墨汁前沿为“墨汁推进长度”。按下式计算墨汁推进率：墨汁推进率（%）=墨汁推进长度（cm）/小肠总长度（cm）×100%。1.1.4数据处理及结果判定墨汁推进率需进行数据转换，X=Sin-1√p(p为墨汁推进率，需用小数表示)。进行方差分析时，需按方差齐性的程序进

7、行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值＜F0.05，结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。在模型成立的前提下，受试样品剂量组小鼠的墨汁推进率显著高于模型对照组的墨汁推进率时，可判定该项实验为阳性。1.2排便时间、粪便粒数和粪便重量的测定1.2.1原理经口灌胃给予造模药物复方地芬诺酯或洛哌丁

8、胺，建立小鼠便秘模型，测定小鼠首粒排黑便排便时间、5或6小时内排便粒数和排便重量（干重，下同），来反映模型小鼠的排便情况。1.2.2仪器和材料1.2.2.1仪器和试剂眼科镊、注射器、分析天平、活性碳粉、阿拉伯树胶、复方地芬诺酯或洛哌丁胺。111.2.2.2试剂配制1.2.2.2.1墨汁的配制：同小肠推进实验。1.2.2.2.2复方地芬诺酯或洛哌