基因工程细胞工程

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1、阶段测试五1.(2013·山东二模)(10分)下图为利用农杆菌转化法培育转基因抗虫棉的技术流程图。请据图回答:(1)图中A为__________,在构建该结构时,Bt毒蛋白基因与Ti质粒结合的部位是__________。(2)①过程是__________________________________,利用农杆菌的优点在于__________________________________。(3)③过程为__________,包括__________和________过程。(4)通过______

2、____________________实验,才能最终确定是否成功培育出了抗虫棉植株。解析:基因表达载体的构建是基因工程的核心内容。质粒上插入目的基因的位置是在T-DNA片段内。农杆菌可以感染受伤的植物细胞,通过基因转化把T-DNA上的外源基因导入植物细胞并整合到受体细胞核基因组上。植物组织培养主要包括脱分化和再分化两个过程。要确定是否成功培育出了抗虫棉植株,需要在植物个体水平上进行抗虫接种实验,如果该植株表现出了抗虫的特性,说明培育成功了,反之,则没有成功。答案:(1)基因表达载体 T-DNA

3、片段内(2)将基因表达载体转移到农杆菌细胞内 农杆菌可以感染受伤的植物细胞,通过基因转化把T-DNA上的外源基因导入植物细胞并整合到受体细胞核基因组上(3)植物组织培养 脱分化 再分化(4)植物个体水平上的抗虫接种2.(2013·新课标全国卷Ⅰ)(10分)阅读如下资料:资料甲:科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中,得到了体型巨大的“超级小鼠”;科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。资料乙:T4溶菌酶在温度较高时易失去活性。科学家对编码T4溶菌酶的基因进行了改造,使其表达的T4溶菌酶第3位的异

4、亮氨酸变为半胱氨酸,在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键,提高了T4溶菌酶的耐热性。资料丙:兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体,科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙体内,成功产出兔甲的后代,证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。回答下列问题:(1)资料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用__________法。构建基因表达载体常用的工具酶是__________和__________。在培育有些转基因植物时,常用农杆菌转化法,农杆菌的作用是_____

5、_____________________________________________。(2)资料乙中的技术属于__________工程的范畴,该工程是指以分子生物学相关理论为基础,通过基因修饰或基因合成,对__________进行改造,或制造一种__________的技术。在该实例中,引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的__________序列发生了改变。(3)资料丙属于胚胎工程的范畴。胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到__________种的、生理状态相同的另一个雌性动物体内

6、,使之继续发育成新个体的技术。在资料丙的实例中,兔甲称为__________体,兔乙称为__________体。解析:(1)将目的基因导入动物细胞常用显微注射法;构建基因表达载体需要限制性内切酶对目的基因所在的DNA和载体进行切割,还需要DNA连接酶将目的基因与载体结合;农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上,故可用农杆菌感染植物,将目的基因导入植物细胞。(2)资料乙中的技术属于蛋白质工程的范畴,通过改造基因,对T4溶菌酶这种蛋白质进行了改造,使组成

7、该酶的氨基酸序列发生了改变,从而提高了T4溶菌酶的耐热性。(3)由于同一物种的生理特性相同,因此进行胚胎移植时,受体与供体物种相同,易于成功;兔甲是供胚胎的个体,称为供体,兔乙是接受胚胎的个体,称为受体。答案:(1)显微注射 限制性内切酶 DNA连接酶 农杆菌可感染植物,将目的基因转移到受体细胞中(2)蛋白质 现有的蛋白质 新蛋白质 氨基酸(3)同 供 受3.(2013·安徽质检)(10分)绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因,可以合成一种抗TMV蛋白,叶片对TMV具有抗感染性。烟草是重

8、要的经济作物,由于TMV的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草,主要流程如下图所示。(1)科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA,然后合成目的基因。图中①过程表示__________________。(2)由图分析,在过程③构建的重组Ti质粒上应该含有的标记基因是________基因,重组Ti质粒导入烟草体细胞的方法是________。(3)在过程⑤培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外,还必须添加________,以保证受体细胞能培养成再生

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