动物生化---核酸的功能与分析技术

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1、细目考查内容考点核酸化学核酸的种类与分布1.种类：a.脱氧核酸核糖（DNA）。b.核糖核酸（RNA）：分为信使RNA（mRNA）、运转RNA（tRNA）、和核糖体RNA（rRNA）。2.分布：a.真核细胞细胞核中有染色体DNA；线粒体中有少量DNA。RNA主要存在与细胞质中。b.原核细胞DNA在核质部分，RNA分布在胞液。c.病毒一般含有DNA或RNA中的一种。核酸的化学组成及组分1.碱基：a.DNA中有T、C、A和G，RNA中有U、C、A和G。b.核酸中还有一些含量甚少的稀有碱基。2.核糖：RNA中是核糖，DNA中2’-脱氧核糖。3.RNA中的称核糖核

2、苷（或称核苷），DNA中的核苷称为脱氧核糖核苷。4.核苷酸：由核苷中戊糖的5’-OH与磷酸缩合而成核苷酸还参与能量代谢，或作为辅酶的成分。核酸的结构1.核酸的一级结构：a.DNA分子由许多脱氧核糖核苷酸以磷酸二酯键连接起来，具5’-末端和3’-末端。b.碱基当量定律：在DNA分子中，A、T、G和C的摩尔比都接近1，称之为碱基当量定律，它是提出DNA分子结构模型的基础。2.DNA的二级结构：a.双螺旋模型。b.核酸超螺旋：DNA在双螺旋基础上再通过弯曲和扭转所形成的特定构象，称为DNA的三级结构。3.RNA的结构：绝大多数RNA分子呈线状的多核苷酸单链。有

3、些RNA分子，形成局部的双螺旋区。核酸的主要理化性质1.嘌呤环和嘧啶环具有紫外吸收特性，在260nm处有最大吸收值。2.变性。3增色效应。4.核酸的复性。5.分子杂交。DNA的复制中心法则遗传信息按DNA→RNA→蛋白质的方向传递，这是经典的分子遗传学的中心法则。后来发现，某些病毒的遗传物质RNA也通过复制传递给下一代；某些RNA病毒的遗传信息可以从RNA传递给DNA。复制的半保留性DNA复制后，两个新的子代DNA分子中除了一股新合成的DNA链外，都保留了一股来自亲代的旧链。复制的主要酶类与蛋白因子1.复制的主要酶类与蛋白因子：a.拓扑异构酶。b.解旋酶

4、。c.单链DNA结合蛋白。d.引发酶。e.原核生物的DNA聚合酶。f.连接酶。g.端粒和端粒酶。2.复制的过程：a.复制原点。b.复制的过程。DNA的损伤与修复方式1.造成损伤的因素：a.生物因素。b.某些物理化学因子。c.DNA在复制过程中也仍然可能产生错配。2.修复方式：a.切除修复。b.重组修复。RNA的转录转录的特点转录是以DNA为模板合成RNA的过程：1.以DNA的一股链为模板。2.转录起始于DNA模板上的特定部位---转录起始位点。3.RNA链延伸的方向为5’→3’。4.RNA转录不需要引物。5.无纠错，转录的忠实性较弱。转录启动子与转录酶1

5、.启动子：A.在转录起始位点的附近有能够被RNA聚合酶识别并与之结合的DNA序列，称之为启动子。B.原核生物基因的启动子：a.含有RNA聚合酶的识别位点、结合位点和起始位点。b.含有保守序列。c.真核生物基因RNA聚合酶II的启动子在-25至-30附近常含有TATA框结构。2.RNA聚合酶：a.原核生物RNA聚合酶。b.真核生物RNA聚合酶。3.转录过程：a.模板的识别和转录的起始。原核生物中，α亚基识别-35序列并与核心酶一起结合在启动子上。b.RNA链的延伸。在核心酶催化下，按碱基互补配对的原则，使RNA链按照5’→3’方向延伸。c.转录的终止。终止

6、有两种方式。d.转录后的加工。逆转录作用一些动物的RNA病毒在反转录酶的催化下有以下功能：1.以其RNA为模板，合成一股与模板RNA互补的DNA链。2.将模板RNA降解。3.以单股的cDNA为模板合成双链互补DNA，整合到宿主细胞染色体DNA中去。蛋白质翻译蛋白质翻译系统模板：mRNA。合成部位：核糖体。氨基酸的运载工具：tRNA。mRNA与遗传密码1.遗传密码。2.起始密码。3.终止密码。4.密码子的共同特性：a.简并性。b.通用性。c.不重叠，即连续性。tRNA的结构与功能1.细胞中有40~60种不同的tRNA，所有tRNA都是单链分子，长度为70~

7、90个核苷酸残基。2.二级结构呈三叶草形，三级结构呈紧密的倒L形状。3.每种tRNA都能特异地携带一种氨基酸。核糖体及其功能1.核糖体都由大小两个亚基组成。2.核糖体上至少有3个功能部位是必需的：P位点、A位点和E位点。翻译过程1.氨基酸的活化：a.不同的氨基酸在不同的氨酰-tRNA化和酶催化下与相应的tRNA相连而活化。该反应消耗ATP。b.翻译起始的氨基酸在原核生物是甲酰甲硫氨酰-tRNAf。2.肽链的起始。3.肽链的延伸。4.合成的终止。5.翻译后加工。核酸分析技术分子杂交技术1.Soutbern-印迹。2.Northern-印迹。3.斑点印迹杂交

8、（dot-印迹）和狭线印迹杂交（slot-印迹）。4.原位杂交。核酸工具酶1.工