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1、第二节 害虫抗药性监测与测定技术一、测定抗药性的条件1、发育阶段一致：幼虫取同一龄期，成虫为羽化后3－5天为好。2、性别一致：一般用♀虫。3、营养一致，一般采集低龄幼虫，饲养一段时间，用高龄幼虫测试。4、温度一致：一般处理前后都在28℃左右。5、世代一致：不能用一年中初代的测试结果与末代相比。6、溶剂一致：不同溶剂对昆虫表皮的穿透率是不同的。7、药剂有效成分一致。8、药剂处理的部位要一致：一般点滴于中胸背板或腹面。害虫抗药性测定抗药性程度,一般通过比较抗性品系和敏感品系的致死中量(LD50)的倍数来确定；对
2、农业害虫来说,如果抗性倍数在5倍以上,或抗性个体的百分率在20%以上,就认为该害虫已产生了抗药性。昆虫或螨类对药剂的抗性发展过程①敏感阶段(抗性比<3);②敏感性下降(抗性比为3～5);③低水平抗性(抗性比为5～10);④中等水平抗性(抗性比为10～40);⑤高水平抗性(抗性比为40～160)⑥极高水平抗性(抗性比>160)。抗药性测定的指标1、敏感度基数：用从未用该种杀虫剂地区的测定结果，或用室内饲养多年的未接触药剂的敏感品系的数据作比较，这些数据称为baselinedata。2、抗性指数：resistan
3、cefactor抗性昆虫的半数致死量与敏感昆虫的半数致死量（即敏感度基数）之比。抗性昆虫的半数致死量抗性指数＝————————————————————敏感昆虫的半数致死量烟粉虱对吡虫啉的抗药性敏感基线诊断剂量二、抗性监测内容1、抗性确证（resistancedocumentation）指确定田间防治失效是由抗性引起的还是由用药不当或其他原因引起的，或了解抗性产生的时间和地区，以便及时换药，通过抗药性测定实现。2、抗性监测（resistancedetection）指田间防治失效前就要了解群体中是否已出现抗性个体
4、及其变化的情况。3、诊断剂量：将敏感基线延长到死亡率99.9％或99％的机率值处，划一垂直线与底线相交处的剂量。（LD99.9或LD99）这两个剂量对敏感的虫种来说几乎是100％死亡。害虫抗性监测的意义通过监测可以及时准确地测出抗性水平及其分布,对其实施治理可争得时间上的主动,还可以明确重点保护的药剂类别及品种。通过监测害虫抗性水平的变化,对整个治理方案的治理效果提供评估,也为抗性治理方案的修订提供依据。通过监测,可明确目标害虫对主要药剂的抗性水平、分布以及抗药性变化时空动态,从而筛选出可替代药剂的农药品种,
5、并在此基础上,研究制订害虫抗药性的综合治理技术,并组织试验,示范和推广。药剂抗性风险评估抗性治理成败的关键是建立早期预警系统,只有在抗性水平还没上升之前就采取措施,方能使抗性的发展得到延缓。为搞好预报,要对常用药剂的作用对象进行研究,建立多种预报模型,重点监测抗性个体的频率变化,以便掌握其中抗性的突然爆发。对一种药剂在开发之后,是否能引起害虫产生抗性也需要有一套风险评估技术。抗药性风险评估方法害虫抗药性现实遗传力分析Tabashnik(1992).根据数量遗传学的原理,一般可以把抗性作为一个具有正态分布的阈性
6、状来考虑,其分布的平均数和方差可由剂量对数-死亡率概率值的回归方程来计算。抗性种群的现实遗传力(h2)被估计为选择压(R)与选择差异(S)之比,即:h2=R/S。R=[log(终代LC50)–log(初始LC50)]/nS=i﹒σpi=1.583-0.0193336p+0.0000428p2+3.65194/pσp=[1/2(初始斜率+终代斜率)]-110-倍抗性增长计算公式：G=R-1抗性种群的现实遗传力R:汰选反应S:选择差异终代LC50:第n代汰选后子代的LC50值初始LC50:初LC50是指选择前的亲
7、本LC50值n:筛选的代数i:选择压力σp：表现型的标准差P=100%-平均校正死亡率;三、抗性监测方法Brown（1980）在《害虫抗药性监测的推荐方法》（Recommended.Methods.forMeasurementofPestResistancetoPesticides）一书中提出。在测定条件和虫态一致时，用LD99.9反复处理时，每次都出现有20％存活者，这构成一个危险信号，表明很可能已产生抗药性。常用的监测方法：点滴法浸漬法（一）生物检测法未用药区自然种群敏感品系室内选育药剂特性作用特点害虫种
8、类敏感基线LD50或LC50测试区种群1测试区种群2测试区种群3测试区种群4农药生物测定的基本原则1.相对的控制环境2.必须设立对照3.处理必须重复4.运用生物统计分析试验结果生物检测法优缺点生物检测法操作简单,结果直观,能测得抗性谱但该方法对所获得资料有严格的统计要求,必须严格控制试验条件,需反复多次试验,而且在实践中亦显示出较明显的局限性测定法比较繁琐,从虫源、饲养到测定难于做到真正的标准化而且
