不同频率的电刺激蟾蜍离体坐骨神经对腓肠肌收缩的影响

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1、不同频率的电刺激蟾蜍离体坐骨神经对腓肠肌收缩的影响周晓泉09临床1班，20091090128【摘要】目的观察在刺激时间、强度变化频率恒定的条件下，不同频率的电刺激对肌肉收缩的影响。学习微机生物信号采集处理系统和换能器的使用。方法对以解剖好的蟾蜍骨神经-腓肠肌标本进行不同频率的电刺激，观察腓肠肌的收缩及张力的变化和屏幕上的图像变化。结果在刺激强度变化率恒定的条件下，在2Hz的刺激下表现为单收缩，在10Hz的刺激下表现为不完全强直收缩；在20Hz刺激下表现为强直收缩；在大于21Hz刺激下，肌肉已经出现疲劳从而表现为收缩强度减少。结论当刺激频率较小，刺激的间隔大

2、于一次肌肉收缩舒张的持续时间，则肌肉收缩表现为一连串的单收缩；增大频率刺激，使刺激的频率大于一次肌肉收缩的时间、小于一次肌肉收缩舒张的持续时间，则肌肉产生不完全强直收缩；继续增加刺激频率，使刺激的时间小于一次肌肉收缩时间，则肌肉出产生完全强直收缩。【关键词】频率腓肠肌强直收缩2+骨骼肌收缩机制是肌丝滑行学说,当肌纤维兴奋时，终池内的Ca2+2+进入肌浆，致使肌浆中Ca浓度升高，Ca与肌钙蛋白结合，引起肌钙蛋白构型发生改变，牵拉原肌球蛋白移位，将肌动蛋白上与横桥结合的位点暴露出来，引发横桥与肌动蛋白结合。横桥一旦与肌动蛋白结合，便激活横桥上的ATP酶，使AT

3、P分解释放能量，使横桥发生扭动，牵拉细肌丝向M线肌节中心方向滑行，结果是肌节缩短，肌纤维收缩。1【材料与方法】1.1实验动物蟾蜍体重适宜，雌雄不限，浙江中医药大学动物实验中心提供1.2实验药品任氏液1.3实验器材锌铜弓微调固定器张力换能器微机生物信号采集处理系统1.4实验方法1.4.1破坏脑和脊髓取蟾蜍一只，左手握住蟾蜍，用食指按压其头部前端使其尽量前俯，右手持探针于枕骨大孔处垂直刺入，然后向前通过枕骨大孔刺入颅腔，左右搅动充分捣毁脑组织。然后将探针抽回至进针处，再向后刺入脊椎管，反复提插捣毁脊髓。此时如蟾蜍四肢松软，呼吸消失，表明脑和脊髓已完全破坏，否则

4、应按上法反复进行。1.4.2剪除躯干上部及内脏在骶骼关节水平以上1～2cm处剪断脊柱，左手握住蟾蜍后肢，用拇指压住骶骨，使蟾蜍头与内脏自然下垂，右手持普通剪刀，沿脊柱两侧剪除一切内脏及头胸部，留下后肢、骶骨、脊柱以及紧贴于脊柱两侧的坐骨神经。剪除过程中注意勿损伤坐骨神经。1.4.3剥皮左手握紧脊柱断端（注意不要握住或压迫神经），右手握住其上的皮肤边缘，用力向下剥掉全部后肢的皮肤。把标本放在盛有任氏液的培养皿中。1.4.4分离两腿用镊子夹住脊柱将标本提起，背面朝上，剪去向上突起的尾骨（注意勿损伤坐骨神经）。然后沿正中线用剪刀将脊柱和耻骨联合中央劈开两侧大腿，

5、并完全分离，注意保护脊柱两侧2灰白色的神经。将两条腿浸入盛有任氏液的培养皿中。1.4.5制作坐骨神经腓肠肌标本取一条腿放置于蛙板上或置于蛙板上的小块玻璃板上。（1）游离坐骨神经将腿标本腹面朝上放置。用玻璃分针沿脊柱旁游离坐骨神经，并于近脊柱处穿线结扎神经。再将标本背面朝上放置，把梨状肌及其附近的结缔组织剪去。循坐骨神经沟（股二头肌与半膜肌之间的裂缝处），找出坐骨神经的大腿段。用玻璃分针仔细剥离，手执结扎神经的线将神经轻轻提起，剪断坐骨神经的所有分支，并将神经一直游离至腘窝。（2）完成坐骨神经小腿标本将游离干净的坐骨神经搭于腓肠肌上，在膝关节周围剪掉全部大腿

6、肌肉，并用普通剪刀将股骨刮干净。然后从股骨中部剪去上段股骨，保留的部分就是坐骨神经小腿标本。（3）完成坐骨神经腓肠肌标本将上述坐骨神经小腿标本在跟腱处穿线结扎后，于结扎处远端剪断跟腱。游离腓肠肌至膝关节处，然后从膝关节处将小腿其余部分剪掉，这样就制得一个具有附着在股骨上的腓肠肌并带有支配腓肠肌的坐骨神经的标本。1.4.6检查标本兴奋性用经任氏液湿润的锌铜弓轻轻接触一下坐骨神经，如腓肠肌发生迅速而明显的收缩，则表明标本的兴奋性良好，即可将标本放在盛有任氏液的培养皿中，以备实验用。1.4.7实验系统连接和参数设置张力换能器的输出端与生物信号采集处理系统的出入通

7、道相连。启动RM6240系统软件，在“选择”下拉菜单中选择“强度∕频率”项，显示刺激参数。1.4.8将腓肠肌跟腱的扎线固定在张力换能器的悬梁上,不宜太紧,此线应与桌面垂直,调节微距调节器.31.4.9把穿好线的坐骨神经轻轻提起,放在刺激电极上,应保证神经与刺激电极接触良好。1.4.10实验观察（1）刺激方式：最大刺激强度，波宽：0.1ms。RM6240系统采用连续单刺激（或频率递增）。采用自动频率方式，起始频率1Hz，结束频率30Hz，步长1Hz，组间延时（串间隔）大于5s。（2）刺激频率按1Hz、2Hz、3Hz、3Hz、4Hz、5Hz、…、30Hz逐渐增

8、加（或刺激间隔逐渐减小），连续记录不同频率时的肌肉收缩曲线，观察不