植物生理学实验(考研复试专用)

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1、植物生理学实验讲义吴恩岐内蒙古师范大学生命科学与技术学院2007.4实验1植物组织水势的测定（小液流法）一、目的学会用小液流法测定植物组织的水势二、材料用具及仪器药品花生叶片、试管、移液管（10ml,0.1ml）、吸球、镊子、小方块、钻孔器、牙签、玻棒、蔗糖、次甲基蓝三、原理当把植物组织或细胞放在溶液中时，两者便会发生水分交换。如果植物组织（或细胞）的水势低于溶液的水势，组织（或细胞）则吸水，使外溶液浓度增大，比重也增大；若植物组织（或细胞）的水势高于溶液的水势时，组织（或细胞）则失水，使溶液的浓度变小，

2、比重也变小；如果植物组织（或细胞）的水势与溶液的水势相等时，外溶液的浓度不变，其比重也不变，若把浸过组织的溶液慢慢滴回同一浓度而未浸过组织或细胞的溶液中。比重小的液流便往上浮，比重大的则往下沉。如果小液流停止不动，则说明溶液的浓度未有发生改变。此溶液的渗透势（水势）即等于所测组织（或细胞）的水势。根据溶液的浓度，可以用公式（ψs=-CiRT）,计算出溶液的渗透势（ψwso1=ψsso1）ψs表示渗透势。R表示气体常数：0.0083MPa·l/mol·K。T表示绝对温度，即273+实验时(℃)i表示解离系数

3、。四、方法步骤1．将1mol/L蔗糖溶液的母液分别配成0.1、0.2、0.3、04、0.5、0.6mol/L的蔗糖溶液各10ml，分别注入6支大试管中，摇匀。2．从上述的大试管中各取2ml溶液，分别放到另6支小试管中，各试管塞上软木塞。3．用钻孔器钻取叶圆片（花生叶、菠菜均可），依次分别在小试管的蔗糖溶液中各放入叶圆片40片（钻孔器的直径为6mm），叶圆片要全部浸在溶液中，塞上塞子，每隔5分钟摇动一次。4．30分钟后，用牙签取次甲基蓝结晶少许，分别投入小试管中，摇匀。5．用0.1ml的移液管从小试管中吸取

4、溶液约0.1ml，然后将之插之相对应浓度的大试管中的中部，慢慢放出蓝色液，并观察记录小液流的流向，从中找出小液流停止不动的该溶液的浓度（每一浓度配备0.1ml移液管一支）。6．量出该蔗糖溶液的温度。7．根据公式ψs=-CiRT，求出组织的水势。五、实验报告计算所测材料的水势。六、思考题在干旱地方生长的植物其水势较高还是较低？为什么？实验2植物细胞质壁分离和复原现象的观察一、目的了解细胞质壁分离与质壁分离复原现象与水势的关系。二、材料用具及仪器药品洋葱、大红花、显微镜、镊子、载玻片及盖玻片、滴管、0.8mo

5、l/L蔗糖溶液、滴管、天平、容量瓶、纯水三、原理当把细胞放在水势较低的溶液中时，细胞液的水分则流向溶液中，如果细胞失水过多时，则会产生质壁分离现象。若把已发生质壁分离的细胞放在水势较高的稀溶液或清水中时，水分便进入细胞，使细胞产生质壁分离复原。四、方法步骤用镊子撕取带有色素的植物组织（如大红花花瓣内表皮，洋葱鳞片外表皮）一小块放在滴有清水的载玻片上，盖上盖玻片，于显微镜下观察细胞正常情况（细胞膜层紧贴着细胞壁）。然后从盖玻片的一侧滴入0.8mol/L蔗糖溶液，并在盖玻片的另一侧用吸水纸吸去溶液（边操作边观

6、察）。当表皮浸入糖液之后，在显微镜下可见到细胞膜与细胞壁逐渐分离，最后从盖玻片的一侧又滴入清水，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸去溶液（边操作边观察）。当水分进入细胞后，在显微镜下便可见到整个细胞质层慢慢地恢复到原状，即产生质壁分离复原现象。蔗糖摩尔浓度（mol/L）渗透势（MPа）质壁分离的相对程度（作图表示）0.50  0.45  0.40  0.35  0.30  0.25  0.20  0.15  0.10  五、实验报告解释细胞质壁分离与质壁分离复原现象与外界溶液水势高低的关系。六、思考题能产生质壁分

7、离和质壁分离复原现象的细胞是死细胞还是活细胞？未发生质壁分离洋葱表皮细胞发生质壁分离洋葱表皮细胞实验3钾离子对气孔开度的影响一、目的了解钾离子对气孔开度的影响。二、材料用具及仪器药品蚕豆叶片、显微镜、温箱、盖玻片、培养皿、0.5%硝酸钾、0.5%硝酸钠、纯水、滴管三、原理保卫细胞的渗透系统可由钾离子所调节，无论是环式或非环式光合磷酸化都可形成ATP，ATP不断供给保卫细胞膜上的H+—泵作功，使保卫细胞中的H+泵出，并从周围表皮细胞吸收钾离子，降低保卫细胞的水势，使保卫细胞吸水，气孔张开。四、方法步骤1、

8、在三个培养皿中各加入0.5%KNO3。5%NaNO3及蒸馏水15m1。2、撕蚕豆叶下表皮若干放入上述三个培养皿中。3、将培养皿放入25℃温箱中，使溶液温度达到25℃。4、将培养皿置于光照条件下照光半小时，然后分别在显微镜下观察气孔开度。五、实验报告根据实验结果，解释钾离子引起气孔张开的机理。六、思考题钾离子引起气孔张开的原理是什么？实验4硝酸还原酶活性的测定一、目的学会植物组织中硝酸还原酶活性的测定方法。二、材料用具及仪器药品