河南省土源性线虫病监测手册

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1、河南省土源性线虫病监测手册第一章病原学监测一、监测对象各监测点年龄在3周岁以上的常住人口和外来人口居住满一年以上者，外出6个月以上者除外。二、监测时间每年9-11月份进行。三、检查方法1．采用改良加藤厚涂片法（Kato-Katz）进行病原学检查（1粪3检）。2．3～12周岁儿童加做透明胶纸肛拭法检测蛲虫卵。（一）、改良加藤法（Kato-Katz）操作步骤1．材料的准备1.1塑料定量模板(统一供应)：规格为30mm×40mm×1mm的聚苯乙烯模板，中央孔为圆台形，其短径3mm，长径4mm，高1mm，容积为38.75mm3；1.2软性塑料刮片(统一供应)：两头刮片型；1.3尼龙

2、绢片(统一供应):规格为80～100目,裁剪成8cm×8cm；1.4透明液的配制：取100ml蒸馏水、100ml纯甘油、3%的孔雀绿（或亚甲蓝）1ml，按此比例混合；1.5亲水性透明玻璃纸(统一供应)：规格为30mm×25mm、厚40µm，使用前需在透明液中浸泡24小时以上，使玻璃纸显示绿色或蓝色；1.6载玻片：规格为75mm×25.5mm、厚1.0mm～1.2mm；1.7其它：原始登记表、镊子、剪刀、记号笔、标本盒、吸水纸、光学显微镜和一次性手套等。2．操作步骤2.1编号：每份粪样取3张载玻片进行编号（与待检粪样的编号相同）；132.2打开待检粪样的包装，将尼龙绢片置于待

3、检粪样上，用塑料刮片轻压尼龙绢片并在其上轻刮，使细粪渣透过尼龙绢片的微孔滤出至绢片表面；2.3将定量板放在载玻片中部，然后用刮片将绢片表面的细粪渣填入定量板的中央孔内，使填满全孔并抹平；2.4小心移去定量板，使粪样留在载玻片上；2.5取一张浸泡好的亲水玻璃纸，抖掉多余的浸泡液，盖在粪样上，用橡皮塞或另一块较厚的载玻片覆于玻璃纸上垂直均匀用力压制，使粪便均匀地展开至玻璃纸边缘；2.6待粪便透明后及时镜检。3．结果观察3.1将透明后的加藤片置于光学显微镜的载物台上在低倍（10×）镜下进行镜检，镜检时仔细检查每一视野，并特别注意受精蛔虫卵与未受精蛔虫卵的鉴别。3.2Kato-Ka

4、tz厚涂片虫卵计数方法。每张涂片发现的蛔虫卵、鞭虫卵、钩虫卵、其他吸虫卵都要计数。镜检所用显微镜统一目镜为10×的镜头。由于一些地区蛔虫感染度特别高，有时一张涂片虫卵数达数千甚至数万个，计数蛔虫卵比较费时，为此对Kato-Katz厚涂片蛔虫卵计数作以下规定：每张涂片首先随意粗查几个视野，若每个视野蛔虫卵数在10个以上，可以暂不计数蛔虫卵。先读完全片的各视野钩虫卵数和鞭虫卵数，再用定视野抽查法推算全片蛔虫卵数。具体步骤是：3.2.1按图1分布固定抽查10个视野，并算出抽查的10个视野蛔虫卵或华支睾吸虫卵总数；图1.10个视野分布3.2.2计算出该涂片粪膜视野数，再推算出全片蛔

5、虫卵数。13按一定的规律，如自左而右，自上而下，再自右而左，一行接一行，一个视野接一个视野地用推行器移动涂片，数出全片粪膜视野数，则：全片粪膜蛔虫卵总数＝抽查的10个视野蛔虫卵数之和×全片粪膜视野÷10例如：抽查的10个视野蛔虫卵数相加为366，全片粪膜视野数为78，则：全片粪膜蛔虫卵总数＝366×78÷10＝2854.8＝28553.3结果登记观察结果即时记录在原始登记表，并及时转登表1。4．注意事项4.1亲水性透明玻璃纸：使用前需全部浸入透明液中，浸泡24小时以上。4.2把刮片上的细粪渣填入定量板时，必须填满中央孔全孔并抹平；压制涂片时尽量使粪便均匀展开至玻璃纸边缘，但

6、应避免粪渣溢出；4.3涂片放置时间长短是关键。一般室温25℃、75%湿度下，涂片放置不宜超过2小时。若温度低，空气湿度大，涂片放置时间可适当延长。总之，涂片放置时间取决于粪样透明度，只要透明了，就应及时镜检，否则透明过渡，薄壳虫卵易变形看不清楚，会造成漏检或误判。4.4用椭圆孔塑料定量板，每孔所容粪便重量平均41.7mg，每片所得虫卵数乘以24即得每克粪便的虫卵数，但每片虫卵数不必乘24，填在表1为实际数的虫卵数（不乘24）。4.5粪样一送三检，三片全计数取平均值。（二）透明胶纸肛拭法操作步骤1．材料牛皮纸（或聚乙烯塑料薄膜）、市售透明粘性胶带纸（宽约2.6cm）、载玻片、

7、小纸袋。2．步骤1）将牛皮纸（或聚乙烯塑料薄膜）剪成长10cm，宽8cm，在中央剪一个直径24mm圆形孔。（略大于1元钱硬币）。2）用透明胶带纸补贴圆形孔。3）再把载玻片盖在胶带纸上（保护胶面），装入纸袋中，纸袋外面写上受检者姓名、年龄、性别和编号。4）13检查时，取下载玻片，将有胶的一面在肛周粘压后，覆回载玻片装入纸袋，带回实验室镜检。第二章土壤中人蛔虫卵检查及活力测定（一）土壤蛔虫卵的改良饱和硝酸钠漂浮检查法1、取土样1.1菜田取从土表至表层以下2cm处泥土；1.2厕所、庭院、厨房取表层土；无土层或土量不够，以