结核病实验室诊断技术及其进展 - 结核病防治网

《结核病实验室诊断技术及其进展 - 结核病防治网》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、结核病实验室诊断技术及其进展中国疾病预防控制中心结核病防治临床中心国家结核病参比实验室赵雁林2006年5月结核病的诊断实验室诊断需要关注的问题WHO推荐的肺结核的诊断标准肺结核的实验室诊断结核病的实验室诊断新技术内容1.结构基因组学向功能基因组学转变2.基因组学向蛋白组学转变3.以作图为基础的基因鉴定向以序列为基础的基因鉴定转变4.单基因病研究向多基因病研究转变生物医学研究模式发生变化趋势生物医学研究模式发生变化趋势（续）5.对疾病的特异性DNA诊断向疾病易感性鉴定转变6.分析单个基因作用向研究基因作用的调控机制转变7.研究疾病的病因向研究疾病的病理发生机制转变

2、8.研究单一种属向研究多种种属转变。M.tuberculosisH37RvColeSTetal.Nature1998;393:537.441.1万碱基对3924预测基因（3995predictedprotein-codinggenes)65.6%GC含量重复DNARepetitiveDNAintheMycobacteriumtuberculosisComplex分类：1.串联重复序列TandemRepeats(TRs）卫星DNA、小卫星DNA、微卫星DNAVNTR2.散在重复序列InterpersedRepeatsGC富含重复序列和主要的串联重复序列Polymo

3、rphicGC-RichRepetitiveSequence&MajorPolymorphicTandemRepeatsPGRS&MPTSPEPPEMycobacterialInterspersedRepetitiveUnitsMIRUs根据长度、序列组成分为三个subfamilies,在H37Rv中大小在46到101bp,有65个拷贝的MIRU在41个loci中出现。MIRU与其它已知重复序列的不同点：结构特点（无明显的回文结构）插入位点编码能力具有散在重复序列和VNTR序列的双重特点散在重复序列范围：基因复制短的序列重复移动的遗传元件ISElementsR

4、EP13E12FamilyProphageCRISPRSequences(spoligotyping)clusteredregularlyinterspacedshortpalindromicrepeats实验室检查实验室检查的目的是为了疾病的诊断，要求检测出标本中某物质的真实含量和反应。真实物理含量，即所谓“真值”由于人类认识能力的局限性，使得误差不能完全避免。误差分类：过失误差方法误差（系统误差、随机误差）抽样误差生物误差肺结核的诊断结核病人因症就诊是病人发现的主要方式涂片显微镜检查对于传染性、预后和治疗评价有一定作用。X-线对于结核病的诊断不是一种特异性的

5、方法核酸扩增试验和血清学方法对于结核病的诊断有一定的价值（有待进一步研究）Ⅰ缓慢生长光产色堪萨斯、海、猿分枝杆菌Ⅱ缓慢生长暗产色瘰疬、苏加Ⅲ缓慢生长不产色鸟胞内蟾分枝杆菌Ⅳ快速生长偶发、龟非结核分枝杆菌不能使豚鼠致病1886年Lenman和Neaman命名结核分枝杆菌非结核分枝杆菌生物标本生物样本成分千差万别合格的标本如果每毫升灌洗液中超过105个集落形成单位，某一微生物存在，且有该微生物感染的其他临床表现，则该微生物可能就是病原菌流感病毒和呼吸道合胞体病毒正常情况下不存在于呼吸道。经典免疫学认为，结核的免疫属于传染免疫（infectionimmunity),又

6、称有菌免疫，即只有当结核菌在体内存在时才有免疫力，一旦体内的细菌被杀灭，免疫力随即消失。机体对结核分枝杆菌能产生抗体，但无免疫保护作用。TBacceleratestheprogressionofHIVdisease结核免疫结核病的诊断咳嗽、咯痰大于等于3周AFBX3广谱抗生素治疗10-14天如果症状没有改善,重复AFB,X-线诊断TB抗结核治疗If1positive,X-rayandevaluationIf2/3positive:Anti-TBRx阴性显微镜涂片检查较X-线检查更客观、可信专家组一直同意诊断特异性显微镜涂片检查的特异性较X-线检查好X-线诊断结核

7、病的过诊问题NTI,IndJTuberc,1974过诊HIV/AIDS中涂阳肺结核病人的比例010203040506070HIVNegativeEarlyHIVLateHIVAFBpositivityinTBpatients积极治疗传染源可以减少结核病的传播涂阳病人的传染性是涂阴病人的4-20倍如果不给予治疗一个涂阳病人可以传染10-15人/年如果不给予治疗涂阳病人更容易死亡RouillonA.Tubercle1976;57:275-99结核病变在体内的演变和播散传染途径结核病的传染系由细小飞沫而发生饮用来自病牛的牛奶而罹患肠结核在没有HIV感染的人群中，结核杆

8、菌感染者在其一生中大约有