723分光光度计使用细则

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1、723N分光光度计使用细则曲新鹤（哈尔滨工程大学）摘要本文以723N分光光度计为载体，简要介绍了一些分光光度计的使用问题，包括测量物质颜色、浓度、成分等要求；调“0”“100”操作；波长扫描作用、操作；定量分析等。关键词723N分光光度计调“0”“100”空白液波长扫描基线校正分光光度计是现代化分析实验室必备的常规仪器之一，适用于化学工业、冶金工业、食品工业、制药工业、临床分析化验、环境保护等部门对各种物质的定性定量分析。723N分光光度计使用YOKE3.0专业分析软件，可实现标准曲线建立、动力学测试等功能，有丰富的测量方法，具有波长扫描、时间扫描、多波长测定、多阶导数测定（选）

2、、双波长、三波长等多种测量方法，可满足不同测量的要求。另外，723N分光光度计采用微机技术，自动调整“0”“100”，可直接消除比色皿配对误差。很多新增的功能，使723N分光光度计使用起来更方便，同时也给操作人员带来很多新的困难。下面简单讨论723N分光光度计的一些使用细则，以便操作人员使用。1被测量物质要求1.1浓度要求由于吸收定律只适用于稀溶液，高浓度的溶液必须稀释后测量。溶液过浓会使吸光度过大，溶液过稀会使吸光度过小，测量均不准确。据有关资料报道，当所配溶液的吸光度为0.434（透射比为36.8%）时，获得的测量准确度最高，误差最小。不过在实际应用中，一般保证所配溶液吸光度

3、在0.2-0.8范围内即可。1.1溶剂颜色要求所测溶液应是有色溶液，如溶液本身没有颜色，应加入显色剂后测量。因为光照到无色溶液上时，除小部分从物体表面反射外，绝大部分将透过穿射物体，使吸光度接近于零。比如测量空气中碘的吸光度，需在吸收液中中加入淀粉，使之显色。1.2有机溶剂要求对于某些有机化合物，像分子中存在烯醇（）结构的化合物常会发生互变异构现象，生成酮式异构体和醇式异构体。有的由于分子中碳碳双键（）的存在，而产生顺式异构体和反式异构体。有的又因碳链结构不同，而出现同分异构体等。由于这些化合物结构不同，因而表现出吸光度的差异。另外，由于某些溶质分子中由于存在某些极性基团或原子，

4、如氢、羟基等，从而常会出现缔合现象，形成氢键或类似二聚体或多聚体的结构，会引起吸收峰的偏移或吸收曲线形状的改变，使测量结果不准确。2调“0”“100”2.1调“0”“100”的定义723型分光光度计具有自动调“0”“100”的功能。调“0”即揭开比色皿暗箱盖（切断光路）时，使吸光度为0；调“100”即合上比色皿暗箱盖（闭合光路）时，使透射比为100%。2.2空白液的选择调“0”“100”应对空白溶液进行，按下“调零/调满度”键即可。空白液即测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液。空白液可按以下规则选择:A当试剂及显色剂本身均无色时，可用蒸馏水作参比溶液。

5、B显色剂为无色，而被测试液中存在其它有色离子，可用不加显色剂的被测试液作为参比溶液。C显色剂有颜色，可选择不加试样溶液的试剂空白作参比溶液。D显色剂和试液均有颜色，可将一份试液加入适当掩蔽剂，将被测组分掩蔽起来，使之不再与显色剂作用，而显色剂及其它试剂均按试液测定方法加入，以此作为参比溶液，这样就可以消除显色剂和一些共存组分的干扰。E如果改变加入试剂的顺序，使被测组分不发生显色反应，可以把此溶液作为参比溶液消除干扰。2.2消除比色皿配对误差在做比色分析时,各种分析仪器都要求有配对良好的比色皿,国家检定规程中规定比色皿间的偏差不得超过0.5%。对于723N分光光度计，在调“0”“1

6、00”的同时具有自动消除比色皿配对误差的功能，故调“0”“100”后不应再调换比色皿在比色皿架上位置。1波长扫描3.1波长扫描的功能针对单物质样品，通过对其进行波长扫描，得出吸收图谱，与标准物质进行比对，可确定物质的性质或种类，即定性分析。对于已知样品，波长扫描可找出样品的最大吸收峰，在最大吸收峰处可进行定量分析。3.2基线校正在波长扫描模式下有一个选项为基线校正，它的的功能也是进行调零。光度计模式下的调零是对一特定波长而言，而基线校正是对全波长上的各个点进行调零。值得注意的是，基线校正只能在R档进行。虽然只在R档进行了基线校正，但相当于对S1、S2、S3都进行了调零，因为他们都

7、是以R档为参考的。3.2具体操作波长扫描的具体操作为，首先进入波长扫描模式，用空白液对R档进行基线校正，然后换上待测液进行波长扫描。对于未知样品需进行全波长扫描，得扫描图谱，与标准物质对照，可得测量物质的种类或性质。对于已知样品，可进行全波长扫描，也可进行分波段扫描，得出最大吸收峰。3.3注意事项如果误对S1、S2、S3中任意档进行了基线校正，就会造成系统混乱，使测量出现错误，此时需在仪器操作模式下，对系统进行内存清除，然后重新扫描。另外，在基线校正的时候，屏幕右上角显示的吸光度