科研指标测定方法

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1、指标：1、品质指标硬度、色泽、褐变指数、失重率、腐烂率、可溶性固型物、呼吸强度、乙烯释放率、可滴定酸、Vc2、抗性指标抗氧化衰老的有：SODCATAPXGSHMDA原果胶（可溶性果胶）抗病相关指标有：PPOPODCHTGULPAL总酚类黄酮木质素3、测定方法：褐变指数色泽失重率腐烂率呼吸强度乙烯释放率硬度可溶性固型物可滴定酸：试剂：0.1mol/LNaOH(4g纯+1000ml蒸馏水，邻苯二甲酸氢钾标定)1%酚酞试剂（1g酚酞加入到100ml50%的乙醇溶液中溶解）方法：1、NaOH的标定：准确称取105℃下烘干至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾0.6g，加入50ml新煮

2、沸过的冷水，振摇，使其尽量溶解，再滴加2滴1%酚酞指示剂，用配置的NaOH溶液标定，滴定至溶液呈粉红色。每1mlNaOH相当于20.42mg邻苯二甲酸氢钾，计算出NaOH滴定液的浓度。2、测定步骤：称10g苹果，研磨，转移到100ml容量瓶中，蒸馏水洗研钵3次再定容，摇匀，静置30min后过滤。吸取20ml滤液，转入三角瓶中，加入两滴1%酚酞试剂，用已标定的氢氧化钠溶液进行标定，滴定至溶液初现粉色并30秒内不退色为终点（PH8.1-8.3）,重复三次，再用蒸馏水作为滤液进行滴定作为空白对照。可定丁酸含量=【样品提取液总体积*氢氧化钠滴定液浓度*（滴定滤液消耗的氢氧

3、化钠体积—滴定蒸馏水消耗的氢氧化钠体积）】/（滴定时所取滤液体积*样品质量）Vc：试剂：5%钼酸铵溶液（称取5g钼酸铵溶于蒸馏水中，并定容至100ml）草酸-EDTA溶液（称取6.3g草酸和0.75gEDTA-Na2溶于蒸馏水中并定容至1000ml）5%H2SO4(体积分数)偏磷酸-乙酸溶液（取棒状偏磷酸3g加20%冰醋酸48ml，溶解后加蒸馏水稀释至100ml,必要时过滤，在冰箱中可保存3天）Vc标准溶液（称取Vc100mg，置100ml容量瓶中，加适量草酸-EDTA溶液溶解后，在用该溶液定容到100ml，即成1mg/ml标准液，此溶液随配随用（如果纯度不够应进

4、行标定））提取及测定：1、制作标准曲线：7支25ml具塞试管，按下表加入各种试剂试剂试管号1234567Vc标准液/ml00.10.20.40.60.81.0草酸EDTA溶液/ml5.04.94.84.64.44.24.0偏磷酸-乙酸溶液/ml0.50.50.50.50.50.50.51:19H2SO4/ml1.01.01.01.01.01.01.05%钼酸铵/ml2.02.02.02.02.02.02.0Vc含量/mg01020406080100加完试剂摇匀后，置30℃水浴中保温15min，用蒸馏水稀释至25ml，混匀，用1号空白管调零，在760nm波长下比色，

5、记录吸光度，以Vc含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。2、提取及测定：称取5g果蔬组织，加5ml草酸-EDTA溶液研磨成匀浆，并仔细转入25ml容量瓶中，再用提取介质冲洗研钵，冲洗液一并倒入容量瓶中。取一部分匀浆液经3000g离心10min后，取1ml上清液与标准管同法测定，若样品显色液中出现沉淀，可过滤后进行比色，不影响测定结果。计算公式：Vc含量（mg*100g-1FW）=标准曲线上查的的Vc的量*样品提取液总体积/(测定时所用样品液体积*样品鲜重)注意：显色温度和加入显色剂后的时间要一致。GSH：试剂：50g/L三氯乙酸（5g三氯乙酸和蒸馏水溶解稀释

6、至100ml，再加入186mgEDTA-Na2.2H2O）0.1mol/LPH7.7磷酸钠缓冲液和0.1mol/LPH6.8磷酸钠缓冲液4mmol/L二硫代硝基苯甲酸（15.8mgDTNB，用0.1mol/L、PH6.8磷酸缓冲液溶解，定容至10ml，摇匀，4℃保存）100umol/L还原性谷胱甘肽标准液（3g还原型谷胱甘肽加入少量无水乙醇用蒸馏水定容至100ml）实验步骤：1、标准曲线制作：取六只试管编号，按下表加入各种试剂，混匀，于25℃保温反应10min，以0号管为参比调零，测定显色液在波长412nm处的吸光度值，以吸光度值为纵坐标，还原型谷胱甘肽为横坐标，

7、绘制标准曲线。项目管号012345还原型谷胱甘肽标液/ml00.20.40.60.81.0蒸馏水/ml1.00.80.60.40.20PH7.7磷酸缓冲液/ml1.01.01.01.01.01.0DTNB试剂/ml0.50.50.50.50.50.5相当于还原型谷胱甘肽物质的量/umol0204060801002、提取和测定：5g果实加入经预冷的三氯乙酸，在冰浴下研磨匀浆，于4℃、12000xg离心20min，收集上清液测定。取一只试管，依次加入1ml蒸馏水、1mlPH7.7磷酸缓冲液和0.5mlDTNB，混匀即为绘制标准曲线的0号管溶液，此液作为参比调零。另取两

8、支试管，分