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1、探针/基因片段的硅片、玻片、塑料片〔5〕。探针DNA是指被有序地点样固定在玻片或硅晶片上的DNA片段,这些片段可通过PCR反应扩增细菌质粒上插入的基因组片段或用通过引物从cDNA文库种PCR扩增得到。这些大小和序列不同的片段分别经过纯化后,被高密度有序地点样固定在玻片或硅晶片上从而制备成DNA微阵列,用于检测待测样品中是否有与之互补的序列。待测样品中的mRNA被提取后,通过反转录反应过程获得标记荧光的cDNA,与包含上千个基因的DNA微阵列进行杂交反应,将玻片上未互补结合反应的片段洗去,再对玻片进行激光共聚焦扫
2、描,测定微阵列上各点的荧光强度,推算出待测样品中各种基因的表达水平。若要比较不同的两个细胞系或不同组织来源的细胞中基因表达的差异,则从不同的两个细胞系或不同的组织来源中提取mRNA。反转录反应过程中标记上不同颜色的荧光,等量混合后,与包含上千个基因的DNA微阵列进行杂交反应,对玻片进行激光共聚焦扫描。比较两种荧光在各点阵上分子生物芯片分析是上世纪90年代初发展起来的一门新兴技术,已被美国科学促进会列为1998年自然科学领域十大进展之一〔1〕。对疾病的诊断、预测、药物筛选,基因测序以及在农业、环境保护、司法鉴定等
3、方面都具有广阔的应用前景,是继大规模集成电路之后的又一次具有深远意义的科学技术革命〔2〕。最初的生物芯片是指基因芯片,是由Fodor等在1991年提出的。当前研究和应用最多的分子生物芯片是基因芯片〔3〕。1基因芯片的基本概念和原理1.1基因芯片的基本概念基因芯片(genechip)又称DNA芯片,是专门用于核酸检测的生物芯片,也是目前运用最广泛的微阵列芯片。它是指在固相载体上按照待定的排列方式固定上大量序列已知的DNA片段,形成DNA微矩阵〔4〕。1.2基因芯片的基本原理所谓基因芯片就是按特定的排列方式固定有大
4、量基因伤是ZEA中毒的又一毒性机理〔7〕。Kouadio通过试验证明了玉米赤霉烯酮能够引起脂质过氧化,从而改变细胞膜的形状而引起细胞死亡。ZEA在10mM以上时能诱导人肠细胞系发生脂质过氧化〔11〕。5对细胞缝隙连接间通讯(Gapjunctionalintercel2lularcommunication,GJIC)的影响GJIC是细胞的重要生理过程,对细胞正常增生分化和代谢起着重要的调节作用,GJIC检查是检测非致突变致癌剂的有效手段。严继承利用荧光漂白后恢复(fluorescencere2distributi
5、onafterphotobleaching,FRAP)技术,在激光扫描共聚焦显微镜下观察ZEA在不同浓度下对HaCaT细胞GJIC的影响,结果显示,ZEA在1μmol/L浓度以上对HaCaT细胞的GJIC功能就有明显的抑制作用,且呈明显的剂量反应关系,提示ZEA可能是一种促癌物,它抑制细胞缝隙连接间通讯可能与癌症的发生有关〔12〕。综上所述,ZEA对人及动物体细胞具有遗传毒性。由于现在对于ZEA与肿瘤的关系尚未肯定,可能还受其他一些因素的影响,因此若要很好地阐述ZEA的遗传毒性,还有待于深人研究。参考文献〔1〕
6、LioiMB,SantoroA,BarbieriR,etal.OchratoxinAandzearalenone:acomparativestudyongenotoxiceffectsandcelldeathinducedinbovinelymphocytes〔J〕.MutatRes,2004,557(1):19～27.〔2〕MinerviniaF,Dell’AquilaME,MaritatoF,etal.Toxiceffectsofthemycotoxinzearalenoneanditsderivative
7、soninvitromaturationofbovineoocytesand17b-estradiollevelsinmuralgranulosacellcul2tures〔J〕.ToxicolInVitro,2001,15(4～5):489～495.〔3〕MalekinejadH,SchoeversEJ,DaemenIJ,etal.ExposureofoocytestotheFusariumtoxinszearalenoneanddeoxynivalenolcausesaneu2ploidyandabnorm
8、alembryodevelopmentinpigs〔J〕.BiolReprod,2007,77(5):840～847.〔4〕AbbèsS,OuanesZ,Salah-AbbèsJB,etal.Preventiveroleofalumi2nosilicateclayagainstinductionofmicronucleiandchromosomeaber2rationsinbone-m
