中药提取物syzg抗肿瘤作用探究

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1、中药提取物SYZG抗肿瘤作用探究【摘要】目的观察中药提取物SYZG体内和体外抗肿瘤作用。方法体内试验采用4种小鼠移植性肿瘤［S-180、HepA、U14和EAC］腋部皮下接种，于接种后次日开始给药，10日内每天给药1次，计算各给药组瘤肿抑制率。体外试验采用4种肿瘤细胞株［MCF、L929、A375-S2、HeLa］，分别与不同浓度的药物共同培养，染色后计算其抑瘤率。结果①两种给药途径(ig、ip)下，SYZG对S-180、HepA、U14小鼠移植肿瘤具有抑制作用，抑制率在30%~50%，而对EAC没有抑制作用；②体外SYZG对L929、HeLa、MCF肿瘤细胞株具有抑制瘤作用

2、，IC50分别为1.2、18.2和19．8μg/ml，而对A375-S2细胞则效果不明显。结论SYZG对S180、HepA、U14等小鼠移植肿瘤和L929、HeLa、MCF肿瘤细胞株具有明显抑制作用。【关键词】中药；肿瘤；瘤株中药提取物SYZG是从我国特有的薯蓣科植物穿龙薯蓣(Dioscoreanipponica6Makino)中分离得到的甾体皂苷元，俗称薯蓣皂素。该化合物具有溶血、降血脂、抗菌、消炎等作用。近些年来，国内外已有许多学者报告薯蓣皂苷有抗肿瘤作用[1-3]。我们观察了SYZG对4种小鼠移植性肿瘤［肉瘤-180(S-180)、肝癌腹水型(HepA)、小鼠宫颈癌-1

3、4(U14)和艾氏腹水癌(EAC)］的体内抗肿瘤作用。并观察了在离体条件下，SYZG对4种肿瘤细胞株［人乳腺癌细胞(MCF)、小鼠肺上皮癌细胞(L929)、黑色素瘤细胞(A375-S2)、人宫颈癌细胞(HeLa)］的细胞毒作用。1材料和方法1．1动物4种肿瘤腹水传代小鼠，均购自吉林省肿瘤研究所。昆明种小鼠，18~22g，雌雄兼用，购自中国人民解放军农牧大学实验动物中心(动物合格证号：10-5112)。1．2试剂与药品薯蓣皂苷元粉，纯度>90%,由吉林天然药物研究所提供。注射用环磷酰胺,规格:200mg/支,批号:980101,上海华联制药有限公司产品。DMSO(Gibco)，

4、MTT(Sigma),5-氟脲嘧啶(5-FU)，批号：010114，上海旭东海普药业有限公司产品；1．3细胞株MCF、A375-S2购自美国ATCC(AmericanTypeCultureCollection),L929、HeLa由日本横滨市立大学医学部�惠赠�。1．4细胞培养RPMI-1640培养液，加入10%的胎牛血清，1%的抗菌素(10，000U/ml青霉素和1，000μg/ml)，2mmoL/L谷氨酰胺，置于5%的CO2培养箱中培养。1．5仪器CO2培养箱(RCO3000TVBA,Revco)；光学倒置显微镜(37XA8，01ympus)；酶标仪(M450，BIORA

5、D)。1．6方法61．6．1体内抗肿瘤实验方法[4]实验小鼠按常规接种肿瘤，次日给药，随机分为对照(ig蒸馏水20mL/kg)、环磷酰胺(ip20mg/kg)、SYZG(ig200mg/kg、100mg/kg和50mg/kg)、和SYZG(ip100mg/kg、50mg/kg和25mg/kg)8组(每组10只)，每日给药1次，连续10d。给药结束次日，将动物称重后脱臼处死，剥离出皮下肿块称重，比较各组肿瘤生长情况。1．6．2体外细胞毒性实验方法[5]MCF、L929、A375-S2、HeLa肿瘤细胞，按常规方法培养，细胞贴壁后，吸出培养液，将细胞分为5-FU阳性对照组、各不同

6、浓度SYZG药物组，每组设3个平行孔，每孔加入含药物的培养液100μL，同时设不加药物的阴性对照组、不含细胞的空白组。继续培养，弃上清，每孔加入100μL新鲜配制的含0．2mg/ml，MTT无血清培养液，继续培养，弃上清，DMSO溶解，超声波混匀，用酶标仪在570nm测吸收度(A)，计算肿瘤细胞生长抑制率。肿瘤细胞生长抑制率(%)=A阴性对照组-A药物组A阴性对照组-A空白组×100%1．6．3统计处理实验数据采用t检验，以x±s表示。2结果2．1SYZG对4种实验性肿瘤的抗肿瘤作用ig给药后结果见表1-4。6表1-4的结果表明，SYZG经ig给药后，对S-180、HepA、

7、U14小鼠移植肿瘤具有抑制作用，而对EAC小鼠没有明显的抑制作用；并且经ip给药的结果也可得出相同的结论(数据未列出)2．2SYZG的体外细胞毒活性SYZG在0．1-100μg/ml的药物浓度范围内，对3种肿瘤细胞株(L929、HeLA、MCF)具有明显的抑瘤效果，且呈现较好的量效依赖关系，而对A375-S2的作用则不明显。经量效曲线作图可求得L929、HeLa、MCF三种细胞的IC50分别为：1．2、18．2和19．8μg/ml，均小于20μg/ml，且药物浓度在100μg/ml时，对三种细胞的抑瘤率