穴位埋线合并胰岛素对拟阿尔茨海默病大鼠学习记忆的影响论文

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1、穴位埋线合并胰岛素对拟阿尔茨海默病大鼠学习记忆的影响论文杨雨,苗婷,潘娅,徐国强,蒋乃昌【摘要】目的观察穴位埋线和胰岛素联合应用对拟阿尔茨海默病（Alzheimer’sdisease,AD）大鼠学习记忆的影响，并探讨其可能的治疗机制。方法大鼠海马CA1区微量注射冈田酸（Okadaicacid，OA）建立拟AD模型大鼠。肾腧、大椎穴位埋线、胰岛素侧脑室注射。用Morris水迷宫实验检测其学习记忆能力，电镜观察海马CA1区神经元超微结构变化，免疫组化方法观察胆碱乙酰转移酶（ChAT）的表达。结果与模型组

2、比较，穴位埋线组、联合组的学习记忆能力明显改善（P0.01），海马CA1区神经元凋亡现象明显改善，ChAT表达增加（P0.05）.freelechanismofCatgutimplantationatacupointandInsulinonthelearningandmemoryabilitiesofAlzheimer’sDisease(AD)rats.MethodsOkadaicacid(OA)palCA1regionofratsicrodosisrepeatedlytoestablishAlzh

3、eimer’sdisease-likemodel，andtheninsulinandcatgutplantedinShenshuandDazhuiacupucturepoint.ThelearningandmemorycapacityofratsiscroscopeandtheexpressionsofChATapoptosisofneuronsinedbyimmunohistochemistryinhippocampusCA1regionoftherats.Resultsparedodelgrou

4、p,learningandmemorycapacityprovedobviously,andtheexpressionofChATinhippocampalCA1regionplantationatacupointgroupandbinationgroup,moreover,theeffectsplantationatacupointandInsulinismoreeffectivethanonlyCatgutimplantationatacupointinAlzheimer’sdiseaserat

5、s，themechanismmightberelatedprovingultrastructureinhippocampalCA1regionandfunctionofcentralcholinergicsystem.Keyer’sdisease;Catgutimplantationatacupoint;Insulin;Learningandmemory;Apoptosis;Cholineacetyl-transferase阿尔茨海默病（Alzheimer’sdisease,AD)主要表现为记忆障碍

6、、认知功能减退等胆碱能神经受损所致的神经功能紊乱。其病理特点为老年斑（senileplaques，SP）、神经原纤维缠结（neurofibrillarytangles，NFT）及神经元丢失。胆碱乙酰转移酶（ChAT）活性下降被认为是AD的一个标志性生化特征［1］。目前AD的防治尚无重要突破。针灸通过激发机体潜能、调节全身脏腑功能干预AD的病理过程［2，3］，而胰岛素在促进神经生长发育、调节神经元生长及递质的释放等方面起着重要作用［4］。本课题组前期报道胰岛素具有改善拟AD大鼠学习记忆的功效。本研究采

7、用穴位埋线联合胰岛素处理拟AD大鼠，通过观察海马神经元超微结构，ChAT阳性表达以探讨埋线联合胰岛素对拟AD大鼠学习记忆的影响和可能机制，为中西医结合治疗AD提供实验依据。1器材与方法1.1动物分组SD大鼠80只，3～5月龄，体重(280±20)g，雄性、健康，由贵阳医学院动物中心［合格证号：SCXK（黔）2002-0001］提供。所有大鼠随机分为4组：①对照组；②拟AD模型组（模型组）；③肾腧（双）、大椎穴位埋线组（埋线组）；④穴位埋线+胰岛素组（联合组）。每组20只。自然条件下饲养，自由饮食。1

8、.2试剂和仪器Okadaicacid（OA）（美国Sigma公司），临用前溶解于10%二甲亚砜（DMSO）中，配制成浓度为0.4mmol/L的溶液;抗ChAT多克隆抗体（基因公司）。研究用生物显微镜（德国Leica）；日立－600型透射电镜（日本日立）；Morris水迷宫。1.3制作拟AD模型模型组、埋线组、联合组大鼠用10%水合氯醛腹腔麻醉（30mg/100g）后，固定于大鼠脑立体定位仪上。参照大鼠脑立体定位图谱，将自行设计的十字形套管插入海马CA1区（前囟后3.6