基因遗传工程师高级职称论文

《基因遗传工程师高级职称论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、基因遗传工程师高级职称论文植物抗病基因工程研究进展[摘要]综合评述了近5年世界各国在植物抗病基因工程方面取得的进展.包括转植物病毒基因组成分(CP基因、复制酶基因、反义RNA及satRNA)、转核酶基因和转植物抗生物质编码基因的抗病毒病植株;转病原细菌解毒基因、转抗菌肤基因和转溶菌酶基因的抗细菌病植株;转几丁质酶基因、转葡聚糖酶基因、转RIP基因、转茂合成酶基因的抗真菌病植株等研究所取得的成果.[关键词]植物;抗病性;遗传工程;进展植物遗传转化技术的发展启动并促进了植物抗病基因工程的发展.近5年来，在植物抗病毒病基

2、因工程方面，取得了新的进展，在抗细菌病和抗真菌病方面，有了喜人的突破.本文就植物抗病基因工程研究进展作一综合评述.1植物抗病毒病基因工程植物抗病毒基因工程起步于转病毒外壳蛋白(CP)基因研究，其后发展到转病毒基因的其它成分和转植物抗病基因的研究，以转CP基因研究取得的成就最大.1.1转植物病毒基因组成分1929年MoKinney首次报道先接种烟草花叶病毒(TMV)弱株系的烟草不易受TMV强株系的后续侵染.Hamilton198o年预测将病毒RNA基因组某些区段的。DNA导入植物，可诱发这类交叉保护作用，不过，当时基

3、因导入技术在植物中还不成熟.1986年Beachy等证明TMV外壳蛋白基因在烟草转基因植株中表达，赋予较高水平的抗病毒侵染作用，此后，已报道转入双子叶植物的CP基因对20多种植物病毒有效.最近单子叶植物也转入了CP基因.1.1.1转病毒CP基因(l)转病毒CP基因的程序.转病毒CP基因的程序大致分三步:首先构建编码CP蛋白的嵌合基因，包括分离代表CP开放读码区(ORF)的。DNA克隆，选择合适的转录启动子(最有效的是花椰菜花叶病毒355启动子)，配上终止密码子并polyA其次，将嵌合基因导入植物中，一般用根癌农杆菌

4、转化系统.最后，从组织培养物再生出转基因植株.1.首蓓花叶病毒(AIMV)CP介导的抗性.AIMV有4种RNA，其中RNA4是相对分子质量为2.4xlo4的CP的mRNA，若无RNA4或CP存在，该病毒便不能复制，CP与RNA3末端附近结合，可能是病毒复制的识别信号.AIMV的CP基因已被转入烟草、番茄和首楷中.转基因植株中CP积累，一般占叶片总蛋白的0.05%~0.4%，最高达0.8%;CP积累量与转基因植株的抗病程度成正比，含0.006写CP的植株不抗病，CP含量为0.05%的转基因首楷接种AIMV后5个月内不

5、发病.转基因植株除了抗AIMV之外，还抗PVX，CMV，TMVUI等病毒一些含有迁码突变CP基因的植株可生成CPmRNA但不积累CP，不抗AIMV，说明是由CP而不是由转录本决定抗性.转基因植株不抗AIMV的RNA.2.黄瓜花叶病毒(CMV)CP介导的抗性.CMV具有三分体基因组，相对分子质量为2.4xl少的CP由衍生自病毒基因组最小片段的亚基因组RNA所编码.RNAI和RNAZ被蛋白分别包被，而RNA3和CPRNA即RNA4包被在同一粒体中.嵌合基因含P35S，CP基因和E一9的3末端，E一9的3末端衍生自编码1

6、，5一二磷酸核酮糖梭化酶小亚基的一个基因.转基因烟草中CMv的CP约占细胞蛋白的。.002%，2个CP(+)植株抗CMVC株系侵染，用5拜9CMV/ml』接种，每一CP(一)植株均发病，而CP(+)植株不发病或近乎不发病.3.烟草线条病毒(TSV)CP介导的抗性.TSV含有3条RNA正链，这3条链分别包被在不同的粒体中，如AIMV一样，CP的合成依赖于自RNA3衍生的亚基因组RNA(RNA4)，TSV的复制也需要CP或RNA4，不过这两种病毒的CP序列却不十分相近.嵌合基因(P355/TSV一CP/NOS3末端)被

7、导入三生NN烟和珊西n。烟，用TSV接种(10陀/ml一)后，对照植株形成病斑，3周内形成系统症状，而在转基因植株上不形成病斑也无系统症状，接种后3周分离不出TSV.TSV一CP(+)烟草不抗AIMV侵染，同样.AIMV一CP(+)烟草也不抗TSV侵染.4.烟草斑萎病毒(TS株系而来的CP基因与P35S启动子和NOS3末端相接，导入NN烟.当接种TCM株系之后，CP(一)植株上即形成坏死斑并系统侵染茎叶，而CP(+)植株(含0.05%CP)只形成轻度坏死，体内病毒含量极低甚至检测不出.CP(+)植株不抗TRV的PL

8、B株系，却抗豌豆早褐病毒(PEBV)，这一现象尚无令人满意的解释.6.烟草花叶病毒(TMV)CP介导的抗性.TMV是一种单分体杆状病毒，正链RNA，6.4沐1护个碱基，相对分子质量为1.75xl少的CP由衍生自3末端的亚基因组RNA编码•嵌合基因(P35S/TMVCP/NOS3)被导入烟草和番茄中，转基因植株中CP占总蛋白的0.001%至0.2%.