推拿加功能训练对膝骨关节炎家兔模型关节液中自由基的影响

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1、推拿加功能训练对膝骨关节炎家兔模型关节液中自由基的影响【摘要】目的观察推拿加功能训练对膝骨关节炎家兔模型关节液中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）的影响，探讨推拿加功能训练治疗膝骨关节炎的机制。方法将新西兰大白兔40只随机分为空白对照组(A组)、模型对照组(B组)、电针治疗组(C组)、推拿加功能训练治疗组（D组）。除A组外，B，C，D组动物造模。造模后，A组和B组正常饲养,不处理；C组给予电针治疗；D组采用手法加功能训练治疗，连续治疗21d。结果推拿加功能训练和电针治疗组连续治疗3周，均可以显著降低关节液中MDA和NO的含量，升高SOD的活性，与模型对照组比较有显著

2、性差异(P<0.05)；推拿加功能训练组处理前后比较有显著性差异(P<0.05)。结论推拿加功能训练和电针治疗可通过降低膝骨关节炎关节液中MDA和NO的含量，升高SOD活性，抑制了膝骨关节炎中过多的自由基对软骨细胞的破坏，提高了氧自由基的清除能力，从而发挥对骨关节炎的防治作用。【关键词】膝骨关节炎推拿加功能训练自由基Abstract：ObjectiveToobservetheeffectsofmassageonsynoviaSOD，MDAandNOcontentsinrabbitslydividedintothecontrol,model,electroacupunctur(EA

3、)groupsandmassageone.KOAmodelfixingmethod.Formassagegroup,theaffectedkneejointineverytime,follo.Theintra-jointsynovial)fordetectingthecontentsofSOD,MOAandNOmunoassay．ResultsAftermassageaarkedly,assagehaspreventiveandcurativeeffectsonOsteoarthritisbyloin，离心10min)和推拿加功能训练仪(广东省汕头市医用设备厂,6805-β)等。1.3动物模

4、型实验动物同等条件下稳定饲养7d后，B，C，D组按照膝关节石膏制动法造模。先剪去所有动物左后肢踝关节以上的兔毛，用管型石膏将其左后肢伸直位固定，石膏外以透明胶纸封好，以防兔撕咬，若石膏松动或脱落者及时重新固定［2］。1.4组织学检查分别于造模成功后和治疗结束后随机从B，C，D各组中抽出一只家兔处死，处死后立即切取家兔胫骨平台内侧关节面的完整软骨及软骨下骨组织标本，用10％的甲醛溶液固定48h，脱钙2～3d，石蜡纵向包埋固定，常规切片，HE染色。观察滑膜与软骨的病理变化［3］。1.5关节液中SOD，MDA和NO的测定分别于造模成功后和治疗结束后，采集A，B，C，D4组动物的关节液，获得4组动物

5、膝关节冲洗液，回收量0.4～0.6ml，平均0.5ml，经离心后,取上清液于-20℃低温冰箱中保存待测。具体方法：施行膝关节穿刺，证实刺入关节腔后，注入0.9%的生理盐水0.5ml，反复回抽、注入3次后，再尽量抽出腔内液体。抽取关节液后，每只兔肌注2万u庆大霉素，以防膝关节感染［4］。采集标本后,用黄嘌呤氧化酶法(羟胺法)测定SOD活力，硫代巴比妥(TBA)法在532nm波长处测定吸光度以测定MDA，用硝酸还原酶法测定NO，操作分别按试剂盒说明书进行。1.6针刺方法C组于造模成功后，参照《实验针灸学》［5］与《动物针灸学》［6］取“血海、梁丘、阳陵泉和足三里4个穴位”，以30号、1寸毫针针刺

6、，直刺或斜刺20～30mm，得气后，针柄接电针仪治疗，每次留针25min，1次/d，连续治疗21d。正常组、模型组正常饲养。推拿加功能训练治疗组(D组)：每天用按摩、揉捏、点压、分筋、理筋等手法以松解股四头肌，顺逆时针旋揉髌骨，再作内旋内收、外展外旋、屈伸髋和膝关节各5次，15min/次，最后平地赶跑100m。1.7图像分析将各组中动物的病理切片，放在光学显微镜下进行图像分析。观察软骨和滑膜的病理改变。1.8统计学处理方法所有实验数据用SAS10.0以上软件进行分析,以±s表示,组间差异采用方差分析(ANOVA)中的SNK法，各组治疗前后差异采用t检验，以P<0.05作为显著性差异的标

7、准。2结果2.1病理切片观察造模后随机从各组中取出一只动物处死,解剖A组动物,肉眼观察膝关节面光滑呈淡蓝色；B，C，D组动物关节软骨面粗糙呈黄色，边缘骨质破坏，有骨赘增生。病理切片采用HE染色，观察发现A组动物关节滑膜无增厚，软骨细胞排列均匀，无增生，软骨边缘光滑；B，C，D组关节滑膜增厚，有炎性细胞浸润，软骨细胞排列不均，边缘破坏，粗糙不平，有软骨细胞增生。见图1～2。2.2处理前后各组关节液中SOD，MD