cjt149-2001 城市供水 亚硫酸盐还原厌氧菌(梭状芽胞杆菌)孢子的测定

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1、CJ中华人民共和国城镇建设行业标准CJ/'r141-150-2001城市供水水质检验方法标准及编制说明和研究报告2001一07门7发布2001门2一01实施中华人民共和国建设部发布一、城市供水水质检验方法标准Standardmethodsfortheexaminationofwaterofurbanwatersupply标准分享网www.bzfxw.com免费下载cJ/T149-2001前言本标准由建设部标准定额研究所提出。本标准由建设部给水排水产品标准化技术委员会归口本标准由国家城市供水水质监测网广州监测站负责起草本标准起草人:林朝晖。本标准参加验证单位:北京监

2、测站、上海监测站、天津监测站、深圳监测站、成都监测站及顺德监测站(省级)。中华人民共和国城镇建设行业标准城市供水亚硫酸盐还原厌氧菌CJ/T149一2001(梭状芽胞杆菌)抱子的测定Urbanwatersupply-Determinationofthesporesofsulfite-reducinganaerobes(clostridia)，.液体培养基增菌法Methodbyenrichmentinliquidmedium范围本标准规定了用液体培养基增菌法测定城市供水及水源水中亚硫酸盐还原厌氧细菌抱子。本标准适用于城市供水及水源水中亚硫酸盐还原厌氧细菌抱子的测定。2

3、方法取一定体积的水样。首先用加热法选择水样中的抱子，加热时间应足以杀死营养型细菌。将水样接种于培养液中，然后于37C土1C厌氧培养44h士4h。由于亚硫酸盐还原厌氧细菌能把培养液中的亚硫酸盐还原为硫化铁(t)是黑色沉淀，则培养液变黑为阳性。3试剂和材料I1单一强度的基本培养基3.1.1成分蛋白陈log牛肉膏10g酵母浸膏1.59淀粉19乙酸钠(含水)59L一半胧氨酸盐酸盐。5g葡萄糖19蒸馏水1000ML3.1.2制法将蛋白陈、牛肉膏、乙酸钠和酵母浸膏混合于800ml水中。用200ml,蒸馏水制备淀粉液，步骤如下:把淀粉置于少量的冷水中调成浆糊状。把剩下的水加热至

4、沸，在搅拌中慢慢倒人浆糊状淀粉中。将此淀粉液与前述800mL混合液混合，加热至沸，使全部溶解。中华人民共和国建设部2001一07-17批准2001一12一01实施标准分享网www.bzfxw.com免费下载52CJ/T149一2001最后再加人葡萄搪和L一半肤氨酸盐酸盐，使其溶解。用NaOH(1mol/L)溶液调pH值至7.1-7.2，分装10mL培养基溶液到25mL带盖螺口玻璃瓶中.冷却后，拧紧瓶盖121'C11‘C高压灭菌15min.3.2双强度基本培养基制备双强度基本培养基的过程与单一强度的基本培养基(3.1)同，但水的体积要减少一半。将10mL或50mL双

5、强度培养基溶液分别将在25mL或100ml螺口瓶中，121'C士1℃高压下灭茵15mine3.3亚硫酸钠(Na2$03)溶液4g无水亚硫酸钠溶于100mL水中，用。.2pm滤膜过滤除菌。保存温度2'C-5C。保存期14天。3.4柠檬酸铁(C,H,O,Fe)溶液7g柠檬酸铁溶于100mL水中，用。.2pm滤膜过滤除菌。保存温度2C--5'C。保存期14天。I5完全培养基3-5.1分析时，将等体积的亚硫酸钠溶液(3.3)和柠檬酸铁溶液(3.4)混合。15.2在每瓶单一强度培养基中各加人。5mL的混合溶液(3.5.1)，此培养基应重新在沸水水浴上加热15min并冷却。3

6、.5.3在每瓶10ml的双强度培养基中各加人。4ml的混合溶液(3.5.1),50mL的双强度培养基中各加人2m工的混合溶液，此培养基也应重新在沸水水浴上加热15min并冷却。4仪器100mL和25ml螺口带盖玻璃瓶4.250mL,100ml,,10mL和1mL移液管。们恒温水浴锅。4*试管(150mmX13mm)4.5接种环。仍恒温培养箱(保持温度37C士1C).4.7细菌过滤器5测定步骤5.1抱子的选择水样在试验前须放置于75C士5C水浴锅中，加热15min，用同样带盖螺口瓶子作空白，检查加热温度。5.2接种与培养将50mL水样置于含50mL双强度完全培养基(

7、3.5-3)的100mL螺口瓶中向5个含有10MI双强度完全培养基(3-5-3)的25mL螺口瓶中，加人10mL水样。向5个含有10mL单一强度完全培养基(3-5.2)的25mI螺Q瓶中，加人1mL水样。如果有必要，可向5个含有10mL单一强度完全培养基(3.5-2)的25mL螺口瓶中分别加人1mL稀释度为1^10倍的水样稀释液。为定性检验100mL水样而无需进行最可能数(MPN)计算时。可向含有100mL双强度完全培养基(3.5.3)的200mL螺口瓶中加人100m1,水样。53CJ/T149一2001如有必要，可将单一强度完全培养基加至瓶颈处，以保证瓶中残留极

8、少量的空气