抗肺纤ⅰ和ⅱ号中药对大鼠肺间质纤维化的干预作用-论文

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1、抗肺纤Ⅰ和Ⅱ号中药对大鼠肺间质纤维化的干预作用*论文.freelg/(kg·d);(2)强的松组[(2)组]:灌胃强的松6mg/(kg·d);(3)预防Ⅰ组[(3)、(4)组]:灌胃抗肺纤Ⅰ号7.5g/(kg·d)、15g/(kg·d);(4)预防Ⅱ组[(5)、(6)组]:灌胃抗肺纤Ⅱ号7.5g/(kg·d)、15g/(kg·d);(5)治疗组[(7)、(8)组],分别灌胃抗肺纤Ⅰ和Ⅱ号15g/(kg·d)。(1)~(6)各组于气管内滴入博莱霉素(BLMA5)5mg/kg,次日开始给药。(7)、(8)组于气管内滴注BLMA5,5mg/kg,15天后开始给药。各组动物分别

2、于给药14天、28天随机处死10只,然后检测各项观察指标。结果观察28天后,对照组:动物体重增加71%(P<0.05).freelonaryfibrosisagentsⅠandⅡontheratmodelofblemycin-inducedpulmonaryfibrosisZHANGQi-kun,XIAOJi-yuan.TheSecondHospitalofLanzhouUniversity,Lanzhou730030,China【Abstract】ObjectiveTostudytheeffectofantipulmonaryfibrosisagentⅠandⅡont

3、heratmodelofblemycin-inducedpulmonaryfibrosis.MethodsA5,天津河北制药厂,批号9901201)、抗肺纤Ⅰ号(粉剂,自拟,由莪术、川芎、全瓜蒌、车前子、白僵蚕、牛蒡子、石膏、甘草等8味中药组成,兰州大学第二医院制剂部提供)、抗肺纤Ⅱ号(粉剂,自拟,由黄芪、莪术、川芎、全瓜蒌、车前子、白僵蚕、大黄等8味中药组成,兰州大学第二医院制剂部提供)。1.1.2实验仪器日本岛津UV-120—02型分光光度计,MettlerAE-260电子天平(瑞士梅物勒公司),LD4-2A医用离心机,OLYMPUS-B07照相显微镜。1.1.3实

4、验动物分组及给药剂量[1]清洁级A5(5mg/kg),次日开始给药。(7)、(8)组于气管内灌注BLMA5(5mg/kg)后15日开始给药。各组动物在给药第14天、28天分别随机处死10只。全部实验动物在兰州军区总医院实验动物科清洁级动物实验室完成。1.2方法1.2.1IPF动物模型的制备乙醚全身麻醉动物后仰卧固定于大鼠实验台上,将舌拉出,用压舌板压迫舌腹,在额镜直视下趁动物吸气瞬间迅速将连有1ml注射器的平端9号针刺入气管约4~5cm,缓慢注入药物,随后将动物直立旋转,尽量使药液在肺内分布均匀。1.2.2取材动物在给药第14天、28天,用2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,开

5、胸切取左肺,冰冻待生化测定,自气管内向右肺注射2%多聚甲醛-1.25%戊二醛磷酸缓冲液(pH=7.4)后,浸入上述固定液固定48h,石蜡包埋切片,HE染色。1.2.3肺过氧化脂质(LPO)测定按MDA-TBA比色法,用日本岛津UV-120-02型分光光度计532nm处比色测定。1.2.4肺组织胶原蛋白含量测定按Log标准牛血清白蛋白及其A值绘制标准曲线。用回归法公式计算肺组织胶原蛋白含量(x),回归法公式:Y=a+bx(a=0.0182,b=2.6103,r=0.9999,Y:肺组织光密度)。1.2.5肺组织羟脯氨酸测定羟脯氨酸多以寡肽形式存在,测定羟脯酸含量时,先将肺

6、组织用6ml/L的HCl水解成游离羟脯氨酸,再用氯氨T将羟脯氨酸氧化,在加热条件下,羟脯氨酸的氧化产物δ-吡洛啉-4羟基-2羟酸和吡咯-2羟酸与对二甲基氨基苯甲醛作用呈红色,用日本岛津UV-120-02型分光光度计560nm处比色。以0.0124、0.0248、0.0372、0.0496、0.062mg标准羟脯氨酸及其A值绘制标准曲线,用回归法公式Y=a+bx(a=0.1201,b=9.3790,r=0.9985,Y:肺组织光密度),计算肺组织羟脯氨酸含量(x)。1.2.6组织病理学检查在光学显微镜下观察,根据Szapiel等[3]方法确定。肺泡肺炎和纤维化的程度各分为

7、4级:无肺泡肺炎(-);轻度无肺泡肺炎(+);中度无肺泡肺炎(++);重度无肺泡肺炎(+++)。肺间质纤维化分级标准:无纤维化(-);轻度纤维化(+);中度纤维化(++);重度纤维化(+++)。1.3统计学方法所有数据用(x±s)表示,组间比较采用t检验。肺泡炎及肺纤维化程度以等级资料统计。率的比较采用χ2检测,P<0.05为具有统计学意义。2结果实验结果见表1~7。气管灌注博莱霉素后,其他各组给药动物体重增长率显著低于对照组,其中强的松组较给药前体重减轻了80%,见表1。表1抗肺纤Ⅰ和Ⅱ号中药对大鼠体重的影响(x±s,g)注:与对照组比

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