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1、波尔山羊精子体外获能和体外受精研究《黑龙江畜牧兽医}2007年第2期47肌内脂肪胆固醇含量比皮下脂肪丰富,3组试验羊肌内胆固醇含量均极显着高于皮下脂肪(P<0.01).3小结有研究报道,引起羊肉膻味的主要脂肪酸有4一甲基辛酸(bC9:0),4一甲基壬酸(bC10:0)和硬脂酸(C18:0).此次试验仅检测到了硬脂酸(C18:0),肌内脂肪和皮下脂肪中C18:0的含量3组间均无显着差异(P>0.05).研究首次检测到了十九碳烯酸(C19:1),它和十六烷醛(C16)在滩羊肌内和皮下脂肪中的含
2、量都显着高于其余2组,它与羊肉风味有何关系还有待于进一步研究.同时试验也进一步证实,羊脂肪内不含易堆积于人体血管内的芥子酸(C22:1).皮下脂肪必需脂肪酸(EFA)总量滩羊显着高于滩寒F.(P<O.05);可以预防人类心血管疾病且有助于脑发育的EPA和DHA在皮下脂肪中的含量以滩羊为最高,滩羊的EPA(C20:5)含量显着高于小尾寒羊和滩寒F.(P<0.05),DHA(C22:6)含量滩羊显着高于滩寒F.(P<0.05).对肌内和皮下脂肪酸的比较发现,部位间的差异很大.在检测到的3
3、5个有机物中,约有24个在不同部位间差异显着(P<0.05)或极显着(P<0.01).可引起羊肉擅味的硬脂酸(C18:0)在各品种相同部位的含量相近,但均是肌内脂肪低于皮下脂肪.各组必需脂肪酸(EFA)和多不饱和脂肪酸(PUFA)在肌内的含量均是皮下脂肪中的7倍左右.试验检测还发现,胆固醇在肌内脂肪中的含量极显着高于皮下脂肪(P<0.01),Ladipo也得到了相同的研究结果.参考文献:[1]粱庭敏,周万能.黔东南小香羊肌肉组织中氨基酸和脂肪组成的研究[J].中国草食动物,1999(
4、5):38—4o.[2]WONGE,NIXONLN,JOHNSONCB.Volatilemediumchainfattyacidsandmuttonflavor[J].JAcFoodChem,1975,23:495—498.(010)尔I!革精俸获莉俸精研究梁鑫,马恒东,李鹰.(1.四川生殖卫生学院附属医院,四川成都610041;2.四川农业大学动物科技学院,四川雅安650214;3.畜禽业杂志社,四川成都610041)中图分类号:$814.3文献标识码:B文章编号:1004—7034(2007)02
5、—0047—03肝素和钙离子载体在多种动物身上被证实对精子的体外获能有很好的诱导作用.试验着重研究肝素,钙离子载体对波尔山羊精子体外获能体系的适用性,从而寻找一套适合波尔山羊精子体外获能的培养体系,并对波尔山羊体外受精进行简单的探讨.l材料与方法1.1试验材料鲜精采自四川农业大学羊场有生育能力的成年波尔山羊;冷冻精液购自四川省冻精总站;山羊卵母细胞来自四川雅安市区附近的养殖户和屠宰场.1.2试验方法1.2.1精子的准备(1)上游法.鲜精,从采集的新鲜精液中抽取约0.2mL;冻精,取l一2粒颗粒冻精,分
6、别置于含有1.0一1.5mL精子洗涤液的灭菌锥形试管底部(洗涤液和获能液此前已放人39℃,5%收稿日期:2006—04—19基金项目:四川省教育厅重点资助项目"山羊体外受精胚胎的生产研究"(2003A016)作者简介:梁鑫(1977一),男,助教,硕士.CO培养箱孵育至少2h).冻精在38—40℃水浴中解冻.分别在培养箱中将装有鲜精和冻精的试管倾斜约45.,孵育3O一60min后,吸取上层含高活力精子的液体放到灭菌离心管,而后离心洗涤2次(2000r/min,5min),弃上清液.(2)离心法.将精子
7、与洗涤液直接混匀离心后,进行获能处理.1.2.2精子的获能处理(1)钙离子载体处理.将冷冻保存的IA解冻,加温后用微量移液器添加所需浓度的lA洗涤后的精子悬液(无BSA的BO液)洗涤.加入时,一边轻轻振荡,一边加温2min,以刺激获能.然后加入等量的含BSA的BO液终止IA的作用.采用血细胞计数板计数,然后将精子浓度调到(2O一30)×10爪/mL.(2)肝素处理.在洗涤后的精子悬液(mTyro-de.)中添加所需剂量的肝素,调节精子的浓度为(2O一30)×10个/mL,置于培养箱中孵育,记录不同受试
8、时间的获能状况.1.2.3获能精子的评价将获能后的精子用台盼兰一姬姆萨染色,检测精子的顶体.计算有顶体反应HeilongjiangAnimalScienceandVeterinaryMedicine№22007的活精子占精子总数的百分数,即精子的顶体反应率.1.2.4获能精子与山羊卵母细胞进行体外受精卵母细胞成熟培养所用培养液成分:基础培养液,M199干粉+2.2ms/mLNaHCO3+25I~g/mL丙酮酸钠+4.8mg/mLHEPES+75I.Lg/
