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1、黄芩有效化学成分及抑菌作用探究研究【摘要】目的观察水煮法及超声提取法提取黄芩有效成分的抑菌效果。方法采用水煮法及超声提取法提取黄芩有效成分然后分别制得两法提取黄芩有效成分结晶物，并对4种提取物对肠炎沙门氏菌体外抑菌活性进行比较。结果黄芩水煮法提取液的最低抑菌浓度范围在125~500mg/ml,超声提取法提取液的最低抑菌浓度范围在62.5~250mg/ml。水煮法提取黄芩结晶物对肠炎沙门氏菌的最低抑菌浓度为1.25~5.00mg/ml,超声提取法提取的黄芩结晶物对肠炎沙门氏菌的最低抑菌浓度为0.625~1.25mg/ml。结论超声提取法提取黄芩有效成分的抑菌效果较水煮法好。�【关键词
2、】黄芩；黄芩有效化学成分；提取法；抑菌作用黄芩(Baicalin)别名黄金茶、山茶根、烂心草,是一种常用中药,有清热燥湿、泻火解毒、凉血止血、除热安胎的功效［1］。现代药理研究表黄芩的有效成分为黄芩苷元、黄芩苷、汉黄芩苷和汉黄芩素等［2］。本研究中通过2种方法提取黄芩中的有效成分，比较其对金黄色葡萄球菌的抑菌作用,为合理选择黄芩的提取方法提供参考。�1资料与方法�1.1仪器5RE-52AA旋转蒸发器,上海亚荣生化仪器厂;SW-CJ-2F超净工作台,DHP9162电热恒温培养箱,上海齐欣科学仪器有限公司；超声波发生器(频率20,800和1100kHz)，苏州安泰空气技术有限公司。�1
3、.2药品和试剂黄芩购自湖北省药材公司;MH肉汤、琼脂购自上海微生物试剂有限公司;其他试剂均为分析纯。�1.3菌种肠炎沙门氏菌ATCC13076购自中国食品药品检验所。�1.4提取方法�1.4.1水煮法水煎提取液：精确称取黄芩饮片50g,分别加500g和400g的水各煎煮1次,每次1小时,过滤,合并滤液,将滤液浓缩至50ml,此时生药浓度为1000mg/ml,灭菌后备用。结晶物制备：精确称取黄芩饮片50g,分别加500g和400g的水各煎煮1次,每次1小时,过滤,合并滤液,在滤液中加浓盐酸调节滤液pH值在1~2范围内,在80℃保持30min，静置12h弃去上清液,沉淀物加适量水，搅拌
4、均匀后加40%NaOH溶液溶解黄芩素,调pH值到6~7,加入等体积95%乙醇,此时溶液含醇量约为50%,加热至50℃,过滤,滤液用10%盐酸调pH值至2~3,保持50℃水浴静置30min,使黄芩结晶物完全析出,过滤出结晶物，用水将结晶物洗至中性,60℃干燥至恒重,得到黄芩结晶物,配制成105mg/ml溶液,灭菌备用。�1.4.2超声提取法取适量黄芩饮片60℃烘干,粉碎后过10目筛,精确称取50g黄芩粗粉,加10倍量水,用20kHz频率的超声处理，随时补充水,以维持液面高度，处理1h后过滤,在滤液中加盐酸调至pH1~2,80℃水浴30min,待黄色结晶物完全析出后,过滤。在沉淀中加蒸
5、馏水搅拌,后加40%NaOH溶液溶解黄芩素,溶液调整至pH6~7,加入等体积95%乙醇,此时溶液含醇量约为50%,加热至50℃,过滤,滤液用10%盐酸调pH值至2~3,保持50℃水浴静置30min,使黄芩结晶物完全析出,过滤出结晶物，用水将结晶物洗至中性,抽滤,60℃干燥至恒重,得到黄芩结晶物,配制成10mg/ml溶液,灭菌备用。�1.5两种方法提取物的抑菌作用比较将受试肠炎沙门氏菌接种于3mlMH肉汤中,在37℃培养18h后,稀释菌液至浊度为105CFU/ml,分别采用二倍稀释法对两种方法提取的4种提取物进行体外抑菌实验,每个浓度溶液重复3次,记录结果。�2结果�2.1黄芩提取液
6、对肠炎沙门氏菌的最低抑菌浓度黄芩水煮法提取液的最低抑菌浓度范围在125~500mg/ml,超声提取法提取液的最低抑菌浓度范围在62.5~250mg/ml,超声提取法提取黄芩的抑菌效果较好。见表1。2.25黄芩提取结晶物对肠炎沙门氏菌的最低抑菌浓度水煮法提取黄芩结晶物对肠炎沙门氏菌的最低抑菌浓度为1.25~5.00mg/ml,超声提取法提取的黄芩结晶物对肠炎沙门氏菌的最低抑菌浓度为0.625~1.25mg/ml,超声提取法提取的结晶物抑菌效果较好。见表2。�3讨论�黄芩具有清热解毒,利胆、保肝、抗炎、抗变态反应等药理作用，其抗菌范围较广，对金葡菌、沙门氏菌和绿脓杆菌的抑制作用较强，临
7、床上用于治疗肺热咳嗽、热病烦燥、烦渴、湿热泻痢等疾病。近来研究认为黄芩素还具有抗病毒作用。�目前黄芩苷提取大都采用水煎煮提取法,但该法加热时间长,且生产效率低。本试验分别用采用水煮法及超声提取法提取黄芩有效成分,并得到两法提取的黄芩有效成分结晶物，并对4种提取物对肠炎沙门氏菌体外抑菌活性进行比较。结果表明,超声提取法提取液、结晶物的体外抑菌活性均较水煮法法高;两种方法提取的黄芩有效成分结晶物对试验肠炎沙门氏菌的抗菌活性均大于提取液约100倍。说明采用超声提取法提取黄芩
