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《金丝桃素对慢性高眼压兔视网膜神经节细胞保护作用的组织学观察论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、金丝桃素对慢性高眼压兔视网膜神经节细胞保护作用的组织学观察论文【摘要】目的：探索金丝桃素对慢性高眼压兔视网膜神经节细胞的影响。方法：取成年家兔20只，后房内注射α-糜蛋白酶，建立兔慢性高眼压模型。造模成功的兔眼在10d后玻璃体内分别注入金丝桃素0.1mL或生理盐水0.1mL，1次/odelbyposteriorchamberinjectionofalpha-chymotrypsin.Tendaysaftersuccessfulmodelcreation,hypericin0.1mLorsaline0.1mLalrabbiteyesicroscopyan
2、delectronmicroscopy.Thethincknessofinnerretinalayerined.RESULTS:Thenumberofretinalganglioncellinsaline-treatedgroupdecreasedsignificantly.Thereatinandsa公司)、注射用糜蛋白酶（上海第一生化药业有限公司）、LZL-12型手术显微镜（镇江中天光学仪器有限责任公司）、Tonopen笔式眼压计（MedtronicSolan公司）。1.2方法健康成年家兔24只，随机挑选20只作为实验组，另4只作为对照组。实验组用
3、200g/L乌拉坦5mL/kg，3min内注入耳缘静脉全身麻醉，每只兔随机选一眼作实验眼，的卡因点眼局部麻醉。用1mL注射器抽取400U糜蛋白酶溶液0.2mL，从颞侧角巩膜缘进针，经瞳孔至对侧虹膜下注入后房，四环素眼膏涂眼。每日用Tonopen眼压计测眼压，眼压在30mmHg（1mmHg=0.133kPa）以上为慢性高眼压造模成功2。待高眼压模型眼压稳定升高10d后，随机挑选半数的高眼压兔作玻璃体内金丝桃素注射。金丝桃素用二甲基亚砜溶解，生理盐水稀释，终浓度为2μmol/L,避光保存。实验兔乌拉坦全身麻醉加的卡因局部麻醉，在显微镜下用2mL注射器，从1
4、2点钟角膜缘后3mm处睫状体平坦部进针，抽出玻璃体0.1mL，注入金丝桃素0.1mL。1次/L。1次/mHg,.freelo。2.1光镜观察光镜下见正常兔的视网膜组织结构清晰、完整，可观察到10层结构，外核层细胞数量最多，内核层细胞数量较少，节细胞为单层，形态呈类圆形（图1A）。生理盐水对照组视网膜内层变薄，神经节细胞数量明显减少，细胞出现变性，内、外核层细胞排列稀疏，数量减少（图1B）。金丝桃素治疗组损伤明显轻于生理盐水对照组，神经节细胞数量有所减少,胞核大部分存在，部分出现空泡样变，内核层和外核层结构与正常组所见相似（图1C）。2.2电镜观察透射电
5、镜下见正常视网膜神经节细胞核呈类圆形，染色质颜色清晰，分布均匀，内质网、线粒体等细胞器形态正常，细胞膜完整(图2A)。生理盐水对照组神经节细胞明显减少，部分细胞严重变性，核结构稀疏，核仁固缩及偏位，胞质染色质边集，内质网肿胀，线粒体肿胀，嵴消失，空泡变性（图2B）。金丝桃素治疗组见部分核稍有变形，核染色质略显稀疏,颜色稍淡,线粒体空泡变性,残存线粒体嵴,内质网仅见轻度肿胀（图2C）。视网膜内层平均厚度正常组为78.62±1.87μm,金丝桃素治疗组为73.80±5.61μm,生理盐水对照组为59.30±2.17μm。后两者相比有显著性差异(P＜0.01
6、)。图1兔视网膜神经节细胞(HE×200)A：空白对照组正常；B:生理盐水对照组数量明显减少，出现变性；C：金丝桃素治疗组数量减少,胞核大部分存在图2兔视网膜神经节细胞超微结构(TEM×106)A：空白对照组核居中,细胞器形态正常,细胞膜完整；B：生理盐水对照组核仁固缩，胞质染色质边集，线粒体、内质网等细胞器肿胀；C：金丝桃素治疗组核染色质浓集,线粒体空泡变性,残存线粒体嵴3讨论在临床上作为一种抗病毒药、抗抑郁药应用的金丝桃素是一种PKC的特异性抑制剂，是从金丝桃家族中提取的一种紫色结晶颜料7。目前已经有研究表明，金丝桃素对增生性玻璃体视网膜病变也有治
7、疗作用8。通过本实验我们观察到，应用金丝桃素玻璃体内注射，视网膜神经节细胞的形态结构相比生理盐水对照组损伤明显减轻，视网膜内层平均厚度也比生理盐水对照组厚。这说明金丝桃素可以直接增强节细胞对抗有害因素的能力，促进受损细胞的存活和功能恢复。青光眼的主要危险因素之一是病理性眼压升高。慢性高眼压对视网膜神经节细胞损伤的机制主要是因为眼压升高迫使筛板组织变形，使得节细胞轴浆流受阻于筛板，由此引起逆行运向神经节细胞胞体的神经营养性因子减少，神经节细胞释放谷氨酸，细胞外间隙谷氨酸蓄积，节细胞发生凋亡9-12。本实验中生理盐水对照组节细胞数量明显减少,部分严重变性,
8、核仁固缩，胞质染色质边集，线粒体、内质网等细胞器肿胀就是细胞凋亡的早期表现。PKC是一类钙、磷
