椒目油对豚鼠哮喘模型肥大细胞和类胰蛋白酶的影响论文

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1、椒目油对豚鼠哮喘模型肥大细胞和类胰蛋白酶的影响论文谢柏梅，戚好文，赵睿，林小萍【关键词】椒目油；哮喘；肥大细胞；类胰蛋白酶Effectsofzanthoxylumseedoilonmastcellsandtryptaseofasthmaticmodelsinguineapigs【Abstract】AIM:Toexploretheeffectsofzanthoxylumseedoil（ZSO）onmastcellsinlungtissueandtryptaseinplasmaofasthmaticmodelsing

2、uineapigsandtoprovidetheoreticalbasisforthetreatmentofasthmabyusingZSO.METHODS:Thisexperimentincluded4groups:normalcontrolgroup,asthmaticmodelgroup,dexamethasonetreatmentgroupandZSOtreatmentgroup,9guineapigsinvolvedineachgroup.Asthmaticmodelsinguineapigsmuniz

3、ationofintraperitonealinjectionin(OVA)andchallengeofinspirationicroscopeandtryptaselevelseasuredbyantibodyagainsttryptase.RESULTS:Thenumbersofmastcellsandthepercentageofdegranulationofmastcellsinlungtissueandtheplasmalevelsoftryptaseofasthmaticmodelgroupingui

4、neapigs［（14.87±4.67）,（42.85±5.99）％and（119.78±12.50）］alcontrolgroup［（2.38±0.52）,（24.91±9.79）％and（88.78±4.74）］(P0.01).ACIA公司产品；UniCAPTryptase试剂盒购于瑞典PHARMACIA公司.1.2方法1.2.1豚鼠哮喘模型的建立按参照文献［3］的方法操作.即豚鼠腹腔注射含有100g/LOVA及100g/L氢氧化铝凝胶的生理盐水1mL致敏，第15日用10g/LOVA溶液超声雾化激发，每日1次

5、，连续7d.每次激发直到豚鼠出现咳嗽、呼吸急促，腹肌紧张等哮喘症状为止.1.2.2实验分组及处理将豚鼠随机分为4组：对照组、哮喘模型组、地塞米松治疗组和ZSO治疗组，每组9只.对照组用等量生理盐水注射和雾化吸入;哮喘模型组用OVA致敏激发;地塞米松治疗组致敏激发方法同哮喘模型组，但激发后立即给予5g/L地塞米松溶液雾化吸入5min;ZSO治疗组致敏方法同哮喘模型组，激发后立即给予ZSO以3mL/kg灌胃.1.2.3类胰蛋白酶测定各组豚鼠末次激发后，从心脏直接抽血5mL，立刻置入含EDTA的抗凝管中混匀，静置30m

6、in后以1500r/min离心10min，留取血浆冻存于-80℃.运用UniCAP100全自动体外变应原检测仪及UniCAPTryptase试剂盒测定血浆中类胰蛋白酶的含量.1.2.4细胞形态学观察放血处死动物，取右肺下叶相同部位组织石蜡包埋切片，行HE和Giemsa染色［4］.Giemsa染色后于低倍镜下选择特殊染色阳性的细胞相对密集区，计数9个高倍视野中的肥大细胞总数，计算每个高倍视野中的平均细胞数.计算肥大细胞脱颗粒百分率.统计学处理：所有数据均以x±s表示.将原始数据输入SPSS11.0统计软件包，方差齐

7、同，组间比较运用LSDt检验；方差不齐，采用非参数方法进行组间比较.2结果2.1模型动物大体表现哮喘模型组豚鼠在诱喘过程中出现哮喘发作症状，不同程度地表现为咳嗽、呼吸急促、腹肌紧张、四肢软瘫、行动迟缓或抽搐跌倒，约30min后症状逐渐缓解.ZSO治疗组和地塞米松治疗组豚鼠激发后所表现症状的程度较同期哮喘模型组明显减弱，约5～10min后症状缓解或消失.2.2HE染色病理学表现哮喘模型组豚鼠肺外观体积增大，表面略肿胀，有不规则暗红色充血区及多处小米粒大小的红色出血点，支气管和肺泡腔内黏液分泌明显增多.其肺组织病理切

8、片HE染色显示：支气管壁及支气管周围组织有多处红细胞聚集区，且有大量炎细胞浸润，包括淋巴细胞、嗜酸粒细胞、单核细胞等；气道黏膜上皮增厚，气道变窄，严重者可见脱落.上述病理变化证明哮喘模型建立成功.ZSO治疗组豚鼠肺大体表现：体积无明显变化，表面充血区及出血点有明显吸收的痕迹，面积明显小于哮喘组，出血点数量也明显减少；切片表现为小气道及肺泡壁结构完整，支气管和肺泡腔内分泌物