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时间:2018-06-11
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1、家鸽铸型透明塑化标本的制作 摘要:目的展示家鸽的呼吸系统(气管、肺、气囊)及全身骨标本的制作技术。方法探讨了将铸型、透明、简易塑化技术结合起来。结果制作结果满意。结论利用铸型、透明、简易塑化技术制作的家鸽标本,兼有3种技术之长,为家鸽标本。关键词:标本;铸型;透明;塑化在解剖学的比较科研项目中,需要展示各类脊椎动物的呼吸系统,而鸟类的呼吸系统极为特殊,为便于观察鸟类的呼吸系统,展现鸟类与人类等呼吸系统的不同,采用铸型、透明、简易塑化三者相结合的技术,制作出鸟的呼吸系统、全身骨的标本,制作过程如下。1药品与器材1.1药品95%酒精、无水酒精、
2、氢氧化钾、双氧水、甘油、自凝牙托水、自凝牙托粉、邻苯二甲酸二丁酯、绿色油画颜料、茜素红、吡咯烷酮(PVPK30)、麝香草酚。1.2器材棉线、100mL一次性注射器、手术刀、镊子、量筒、大容量烧杯、干燥箱(自然通风可不备)、玻璃棒、天平、台秤。2实验过程2.1计算铸型灌注材料的用量5先对家鸽编号,称量家鸽体重并记录。然后计算家鸽体重总和,将体重数据乘以17%(可依据气囊体积17mL/体重100g计算)再除以75%(配制灌注材料时会自然损耗25%),所得数据即为此次试验所需铸型灌注材料的体积总量[1]。2.2家鸽肺和气囊的灌注2.2.1配制铸型材
3、料依据前面计算铸型灌注材料的总量,配置的比例为:自凝牙托粉75g,自凝牙托水100mL,邻苯二甲酸二丁酯44mL[2],配置方法:将少量的绿色油画颜料、邻苯二甲酸二丁酯加入自凝牙托水混合均匀,加入适量的自凝牙托粉充分搅拌即可。配置时应稍多勿少,略有剩余,且随时配制随时使用。2.2.2灌注铸型材料选择30d龄雄性幼鸽,处死排血后,小心拔除上颈部、腹部侧面的羽毛,切开上颈部皮肤,分离出气管,用一次性注射器吸取适量自凝牙托材料,将针头穿入气管,用棉线结扎气管。将自凝牙托材料注入气管,如腹部出现颜色,则表明灌注液已进入腹部的气囊,如阻力加大,停止注射
4、,提起家鸽头部,鸽体下垂,拍打并震动鸽体再行注射,直至腹部颜色范围不再扩大,充满为止,整个灌注过程不可大力、过量、不然会导致气囊壁破裂。灌注完成后,棉线结扎气管,待灌注材料固化变硬后,再灌注余下气管。灌注完成,清除口腔、鼻孔多余灌注材料,转入下一步骤。2.3透明标本5由于家鸽肌肉发达,采用氢氧化钾溶液和甘油2次透明法,具体过程如下。2.3.1固定灌注材料固化后,除去标本羽毛、皮肤、脑、眼、食管、嗉囊,在肛前开口,小心去除内脏,不要触及肺和气囊,然后浸入95%酒精溶液中,固定5~7d,更换固定液1次/2d,至标本充分硬化固定,乙醇还可起到脱脂作
5、用,然后浸入清水中除去乙醇。2.3.2漂白用质量分数3%的过氧化氢溶液浸泡固定后的标本数天,期间标本要经常翻动,刮除趾部的皮肤,肌肉呈现乳白色时,即可停止漂白。2.3.3初次透明在肌肉发达处,用针刺形成密集孔道,同时注射5%的氢氧化钾溶液,将上述处理过的标本,放入1%的氢氧化钾溶液中浸泡数天,待肌肉半透明隐约可见骨骼时,透明完成。期间可更换透明液,可加速透明进程,也可使组织疏松,利于后续步骤各试剂的渗透。2.3.4染色茜素红染色剂配制方法:在质量分数95%的酒精中加入茜素红,配制成饱和溶液,此饱和溶液可长期存放备用,取一份(体积)饱和溶液与9
6、份(体积)70%的酒精混合,配制成稀释溶液,然后取一份(体积)稀释溶液,加入等份(体积)2%氢氧化钾溶液,即配制成染色剂[2]。将标本放入染色剂中进行染色,至骨骼变为紫红色,即可停止染色。2.3.5脱色5先用水洗去表面浮色,取1%的氢氧化钾溶液一份(体积)与质量分数50%甘油溶液一份(体积)配制成混合溶液,将标本放入混合溶液中,直至肌肉颜色退为淡红色为止。2.3.6再次透明将标本依次浸入40%、50%、60%、80%的甘油各2d,然后浸入纯甘油中,直至肌肉无色透明,突显出铸型的气管、气囊、肺和骨骼即可。如果肌肉发达透明效果不好,可往此处注射纯
7、甘油,使其透明。2.4塑化保存塑化剂选用聚乙烯吡咯烷酮,简称PVP,是一种高分子水溶性化合物,塑化剂选用黏着性适中,水溶液为酸性的PVPK30。2.4.1PVP溶液配制PVPK30塑化剂的配制方法:先配制质量分数0.5%的氢氧化钾溶液作为母液,然后配制麝香草酚无水酒精溶液,并加入母液中,使母液中麝香草酚质量分数约为2%,将母液加热到60℃,向母液加入适量聚乙烯比咯烷酮,分别制成25%和50%的PVP液。2.4.2塑化使用浓度梯度脱水塑化法塑化标本。此法操作简单,需要设备少,但塑化剂用量大,时间较长。将透明好的标本依次浸没入25%的PVP溶液浸
8、泡5~7d,再转入50%的PVP溶液浸泡5~7d[3]。2.4.3干燥、保存5将标本整形后,既可以选用自然通风干燥,也可将温度控制在25℃,在干燥箱中对流干燥。干燥
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