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时间:2018-06-11
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1、水禽禽流感灭活疫苗免疫程序初探陈阿明夏建强朱国良(吴江市畜牧兽医站)吴江市畜牧兽医学会疫苗免疫是预防禽流感的主要手段。在种水禽生产中,需要制定一个较为合理的免疫程序,以确保种禽体内维持较高免疫抗体水平,又能避开产蛋高峰,且不影响种禽生产性能的充分发挥,为此进行以下试验。1材料与方法1.1试验种禽樱桃谷鸭,太湖鹅。1.2灭活疫苗禽流感H5亚型油乳剂灭活疫苗(哈尔滨兽医研究所生产,批号为)。疫苗免疫方法:2月龄以下颈下部皮下注射,2月龄以上胸肌注射。免疫剂量:14日龄以下雏禽0.5mL/只;14日龄以上1mL/只。1.
2、3试验设计1.3.1试验分组试验动物为种鹅、种鸭,分别在吴江市同里、横扇、盛泽、桃源等4个镇的4个养殖户饲养,每户400只,其中,两户在盛泽、桃源养鸭,分别编号为Ds组和DT组,两户在同里、横扇养鹅,分别编号为GT组和GH组。1.3.2免疫与监测方法设计在10日龄统一进行初免,免疫后1个月内,每隔3d进行一次抗体监测,1个月后,每隔10d进行一次抗体监测,每次每组抽10个样本。当抗体滴度下降到1:32左右时,每组随机抽取300只进行第二次免疫,余下的100只继续跟踪监测。对二免后的种禽在免疫后1个月内每隔3d进行一
3、次抗体监测,1个月后,每隔10d进行一次抗体监测,每次每组抽10个样本。当抗体滴度再次下降到1:32左右时,每组随机抽取200只进行第三次免疫,余下的100只继续跟踪监测。对三免后的种禽在免疫后每隔10d进行一次抗体监测,每次每组抽10个样本。当抗体滴度再次下降到1:32左右时,每组随机抽取取100只进行第四次免疫。对四免后的种禽仍按每隔10d进行一次抗体监测,每次每组抽10个样本,直至一个产蛋周期结束。1.3.3雏鹅母源抗体消退趋势监测选择6日龄H5AIV母源抗体水平在1:128左右的雏鹅50只,隔离饲养,每隔4
4、d采血1次,监测雏鹅母源HI抗体的消长情况。1.4血清学检测方法采用血凝(HA)试验(微量法)和血凝(HI)试验(微量法)进行检测。结果判定:以完全抑制4个HAu抗原的血清最高稀释倍数作为HI滴度。只有阴性对照孔血清滴度不大于2log2,阳性对照孔血清误差不超过1个滴度,试验结果才有效。HI效价小于或等于3log2判定HI试验阴性;HI价等于4log2为阳性。2结果与分析2.1鸭和鹅群首次免疫后的H5AIVHI抗体水平结果从图1可知,鸭和鹅一次免疫后HI抗体水平逐渐上升,于免疫后第20天左右HI抗体水平达到高峰,一
5、次免疫后鸭与鹅HI抗体水平达到高峰的时间基本相同。当抗体降至接近临界点时,如不及时加强免疫,则在10d以内抗体平均效价可降至4log2左右。二免后,鸭或鹅群HI抗体水平急剧升高,于免疫后第18天左右抗体水平达到高峰,二免后100d仍维持较高的HI抗体水平。加强免疫后的鸭或鹅群明显比仅免疫一次的鸭或鹅群的HI抗体上升幅度高,抗体的维持时间长(见图2)。2.2雏鹅母源抗体的下降趋势6日龄鹅平均抗体效价为7.8log2,以每4天近1个单位的速度下降;28日龄时抗体几乎完全消失(见图3)。2.3试验鹅的抗体消长规律试验鹅1
6、0日龄首免后第21天HI抗体效价开始下降,二免后,抗体水平出现快速反弹,于二免后第18天时HI抗体水平达到高峰,然后开始缓慢下降,二免后第80天仍维持在较高的抗体水平。二免后第120天抗体降到临界点1:32,三免(160d)、四免(280d)后抗体可维持在临界点1:32以上5个月。因为种鹅饲养期长,因此可根据实际情况进行五次免疫。2.4试验鸭的抗体消长规律10日龄首免的鸭群,免疫后的第20天HI抗体达到高峰,然后逐渐开始下降。于40日龄二免后第18天时HI抗体水平达到高峰,然后开始缓慢下降,二免后第80天仍维持在较
7、高的抗体水平。二免后第90天抗体降到临界点1:32,三免(160d)、四免(290d)后抗体可维持在临界点1:32以上5个月。由于蛋鸭的生产期比较长,因此建议种鸭进行第5次免疫。3小结与讨论本研究表明,雏鹅H5AIVHI母源抗体几乎以每4天下降1个HI效价单位的速度消退。水禽对高致病性禽流感具有明显的年龄易感性,有研究表明,在3日龄、7日龄首免,还是在12日龄首免,对禽流感疫苗的免疫应答影响不大,这为临床生产实践中水禽最佳首免日龄的确定提供了参考依据。H5禽流感疫苗免疫鸭或鹅群在二免后第18天左右抗体水平达到高峰,
8、但鹅群与鸭群抗体增长幅度存在一定差异,这一方面可能与水禽本身对禽流感疫苗免疫的敏感性有关,另一方面可能与免疫剂量有关。有的文献报道二免后在14d可达到抗体高峰。首免后,鸭或鹅群H5禽流感抗体效价不高,抗体水平维持时间不长;而加强免疫后抗体效价明显升高,且维持时间较长。如果抗体降至临界点时,如不及时加强免疫,则在10d以内抗体平均效价可降至2。左右。因此,实践
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