脑力智宝对实验性脑缺血大鼠学习记忆与神经细胞凋亡

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1、脑力智宝对实验性脑缺血大鼠学习记忆与神经细胞凋亡【摘要】目的研究脑力智宝对实验性脑缺血大鼠学习记忆功能与神经细胞凋亡的影响。方法结扎实验大鼠双侧颈总动脉制作脑缺血模型，Morris水迷宫法测试其学习记忆功能，HE染色法观察其神经细胞形态学改变，TUNEL法检测凋亡细胞。结果脑力智宝能显著缩短实验性脑缺血大鼠的逃避潜伏期，增加跨越原平台位置的次数；显著减少顶叶皮层及海马CA1区凋亡细胞的数量。结论脑力智宝对脑缺血损伤所致学习记忆功能减退具有改善作用，可能与其能减少神经细胞凋亡有关。【关键词】脑力智宝脑缺血学习记忆细胞凋亡Abstra

2、ct:ObjectiveToobservetheeffectsofNaolizhibao(NLZB)onlearningandmemoryandneuronapoptosisofcerebralischemiarats.MethodsCerebralischemiamodelinratsoncarotidarteries.Morrisazetestinethelearningandmemoryability.ThebraintissueofratsorphologicalobservationusingHEstain,andTUN

3、ELassayazetestshoesoftraversingflatroof,andreducedtheapoptoticcellsincerebralcortexandhippocampalCA1region.ConclusionNLZBcanimprovelearningandmemoryofcerebralischemiarats,andthemechanismmightbereducingtoreduceapoptoticcells.Keyia;Learningandmemory;Apoptosis脑力智宝用于治疗精神发

4、育迟滞、脑瘫、脑血管病后遗症、脑外伤后遗症、脑炎后遗症、老年性痴呆等脑病伴发的智力和肢体功能障碍，具有一定的疗效。临床研究表明脑力智宝能明显改善脑梗塞后遗症患者运动、语言及精神方面的症状［1］。离体细胞研究表明脑力智宝及其含药血清可能通过促进Bcl-2蛋白的表达、增加细胞膜流动性等途径对硝普钠诱导的PC12细胞凋亡具有保护作用［2］。本实验观察了脑力智宝对实验性脑缺血损伤大鼠学习记忆功能与神经细胞凋亡的影响，旨在阐明脑力智宝用于治疗脑缺血损伤性疾病后遗症的机理。1材料与方法1.1动物健康ANNHEIM）产品。1.3脑缺血损伤致学习

5、记忆障碍模型的制备［3］大鼠经10%乌拉坦1g/kg腹腔注射麻醉后，仰卧位固定，行颈正中切口，分离双侧颈总动脉，用丝线结扎，缝合皮肤。假手术组大鼠同法分离双侧颈总动脉，但不结扎。1.4分组与给药将造模成功动物随机分为4组：模型组、尼莫地平组、脑力智宝小剂量组与脑力智宝大剂量组，每组8只，雌雄各半。假手术组大鼠8只，雌雄各半。待大鼠苏醒后，尼莫地平组按12mg/kg灌胃给予尼莫地平混悬液；脑力智宝不同剂量组分别按小剂量4g/kg、大剂量8g/kg灌胃给予脑力智宝供试液；假手术组和模型组分别给予等容量生理盐水，1次/d，连续30d。1

6、.5Morris水迷宫测试各组大鼠在药物干预结束后开始水迷宫测试。水迷宫由直径130cm，高50cm圆形水池组成，水深30cm，水温（26±1）℃，在水池壁标明4个入水点，由此将水池分为4个象限，任选一象限，正中放一个直径12cm，高29cm的平台，没于水下1cm，水面覆盖泡沫塑料。测试包括：①定位航行实验：历时6d，分别从4个不同的标记入水点，将大鼠面向池壁放入水中，记录在120s内寻找平台所需的时间（逃避潜伏期）。若大鼠入水后120s内未能找到平台，则将其置于平台上并停留15s，逃避潜伏期记录为120s。②空间探索实验：定位航

7、行实验结束后，撤除平台，任选一个入水点将大鼠面向池壁放入水中，记录120s内跨越原平台位置的次数。1.6脑组织形态学观察将进行学习记忆能力测试后的大鼠麻醉下处死，快速断头取脑，浸泡于10%中性甲醛液中固定。切片进行HE染色，光镜下观察拍片。普通光镜400×倍下计数海马CA1区锥体细胞层500μm范围内核完整椎体细胞数目与顶叶皮层每个视野下核完整神经细胞数目，每张切片计数5个不重叠视野。1.7原位细胞凋亡检测切片经脱蜡、水洗、蛋白酶K消化、TUNEL反应，按试剂盒指示常规操作。光镜下观察拍片，普通光镜400×下计数海马CA1区锥体细

8、胞层500μm长范围内凋亡细胞数目与顶叶皮层每高倍视野下凋亡细胞数目，每张切片计数5个不重叠视野。1.8统计学处理实验数据用±s表示，运用统计软件SPSS11.0forwindows11.5进行重复测量方差分析与单因素方差分析。2结果2.1定位航行