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时间:2018-05-01
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1、不同粒径磁性纳米FeOx在外加磁场作用下对肝癌细胞生物学特性的影响:居会祥,戴真煜,孙明忠,吕晶晶【摘要】 目的:研究不同粒径磁性纳米FeOx在外加磁场作用下对肝癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:采用共沉淀法制备得到不同粒径FeOx,将不同粒径FeOx吸附于细胞表面,并加载静磁场(SMF)及100Hz交变磁场(EMF)照射。运用CCK8检测纳米粒子吸附后在外加磁场作用下Bel7402细胞增殖情况,运用流式细胞仪检测细胞凋亡、死亡率及细胞周期变化。结果:不同粒径磁性纳米FeOx在SMF照射时间低于72h时能使Bel7402细胞增殖速度增快,当照射时间大于72h时,细
2、胞增殖速度未发生明显变化但部分细胞发生凋亡,凋亡率为(3.1±0.78)%。而经EMF照射后37nmFeOx吸附细胞增殖被抑制,细胞周期实验结果表明大部分细胞被阻滞在G0/G1期,细胞出现大量死亡与凋亡,凋亡率达到(23.34±3.6)%、死亡率达到(57.24±2.7)%。结论:纳米粒子未有外加磁场照射时不能对细胞产生明显的影响,外加SMF照射时,细胞的增殖及DNA代谢未发生明显的变化,但细胞发生凋亡;外加EMF照射时,细胞增殖被抑制并发生明显的凋亡及死亡,细胞DNA代谢明显紊乱,且具有较小粒径的磁性纳米FeOx在EMF作用下对肝癌细胞影响最为显著。【关键词】磁性纳
3、米FeOx;增殖;凋亡;DNA周期 [Abstract]Objective:TostudytheeffectsofdifferentdiametersofnanoFeOxpoetabolismofheptomacelllinesBel7402.Methods:DifferentdiametersofnanoFeOxpoacelllinesBel7402throughthecoprecipitationmeanings,thencellsagicfield(SMF)andextremelyloagicfield(EMF)etabolism.Results:
4、DifferentdiametersnanoFeOxcouldnotinfluencethecellatallunderSMFexposurebutcouldinfluencethecellsunderEMF,eterthehighestapoptosisanddeathrationostofcellsagicfieldexposure.UnderSMFexposuretheproliferationandDNAmetabolismofcellsabsorbingbynanopoetabolism,furthermore,alltheeffectsoreobvious
5、inthecellsabsorbingbynanopoeterunderEMFexposure. [KeyagicnanoFeOx;proliferation;apoptosis;DNAcycle 磁性纳米材料具有良好的磁导向性、较好的生物相容性、生物降解性和活性能基团等特点[1-3],它可结合各种功能分子,如酶、抗体、细胞、DNA或RNA等,因而在靶向药物、控制释放、酶的固定化、免疫测定、DNA和细胞的分离与分类等领域可望有广泛的应用。磁性纳米材料特别是Fe属纳米颗粒已经被广泛应用于药物靶向治疗及干细胞定向移植治疗中[4]。当粒径在30~200nm之间时,矫顽力
6、和饱和磁化强度均达到最大值,且具有单畴特性。目前已有纳米磁性氧化铁等颗粒作为药物或干细胞载体用于肝癌动物实验的研究,但对磁性纳米氧化铁粒子本体对人体研究相对较少[5]。本研究以肝癌细胞Bel7402为对象,观察不同粒径磁性纳米FeOx在外加磁场作用下对其生物学特性的影响,旨在为FeOx用于治疗肝癌提供实验依据。 1材料和方法 1.1试剂及仪器 肝癌细胞株Bel7402购自中国科学院上海细胞库。静磁场发生仪为两块强磁场稀有金属镍/铁永磁体,当两块磁体间距为2.5cm时其场强为0.7特斯拉(T)。TYU2002HII型特斯拉计/高斯计为上海亨通磁电科技有限公司
7、产品。变频仪(FT1000型)为南京万臣电子有限公司产品,变压器(PT800型)为上海富济电子公司产品。胰蛋白酶、Primilar1640培养基、胎牛血清(FBS)购自Gibco公司,二甲基亚砜(DMSO)购自美国Sigma公司,维生素C、青霉素、链霉素为杭州四季青公司产品。CCK8试剂盒为美国ADL公司产品,细胞凋亡及周期试剂盒均购自美国BD公司。FeSO4、醋酸锌均为分析纯,购自南京化学试剂有限公司。扫描电镜(SEM)型号为HITACHIX650,X射线衍射仪(XRD)型号为PhilipsX′pertXRDsystem型。 1.2方法
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