糖类物质的毛细管电泳分析

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1、第15卷第5期化学研究与应用Vol.15,No.52003年10月ChemicalResearchandApplicationOct.,2003文章编号:100421656(2003)0520607205糖类物质的毛细管电泳分析3张　利,陈蓁蓁,王　燕,唐　波(山东师范大学化学系,山东济南　250014)摘要:毛细管电泳(CE)是近二十年发展起来的一种新的分离分析技术,它以快速、高效、高灵敏度、所需样品少等优点被广泛应用于各个领域。八十年代末开始应用于糖类物质的分析,并获得了快速发展。本文对毛细管电泳分离分析糖类物质进行了评述

2、,主要集中在多糖的水解、衍生、检测、分析应用及前景等方面。全文引用文献40篇。关键词:毛细管电泳;多糖;评述中图分类号:O65718文献标识码:A　　糖是自然界和生物体中广泛存在的物质。长其是五元环,六元环最常见,它是构成寡糖和多糖期以来人们认为糖的主要功能是提供能量,而新最基本的结构单元。寡糖一般是指分子中含有2兴的糖生物化学研究发现糖类物质除了提供能量-10个单糖单元的聚合物。多糖是指由超过10外还有其它多方面的生物活性与功能,诸如抗癌、个以上的单糖通过糖链组合而成的高级聚合[4]抗菌、抗病毒、控制细胞分裂,调节细胞生长和

3、人物。糖蛋白和糖肽是糖分别与蛋白质和多肽组[1]体免疫功能等作用,多糖及其衍生物还被用作成的糖缀合物。毛细管电泳是利用带电粒子在高[2,3]分离对映异构体的手性选择剂,所以糖类的压电场中由于迁移速率不同而达到分离目的的一研究受到人们越来越多的重视。但多糖的结构复种新技术。其检测方式有紫外可见检测、激光诱[5]杂,具有很高的微观不均一性,因此对其分离分析导荧光检测、电化学检测等。但糖类物质既不相当困难。毛细管电泳是20世纪80年代发展起带电,也无紫外吸收基团和荧光基团,所以不能直来的一种分离分析技术,它以快速、高效和灵敏度接利用

4、毛细管电泳对其进行分离分析。因此要用高、所需样品少等优点被广泛应用于各个领域。毛细管电泳对糖进行分离应从两个方面考虑:(1)用毛细管电泳分析糖类物质在20世纪90年代发使糖带电,(2)对糖进行衍生化,使其具有紫外吸展迅速,但目前毛细管电泳对糖的分析主要集中收基团和荧光基团。在单糖和寡糖的分离检测方面,对多糖的分离分目前,对多糖及糖缀合物中糖基部分的分离析还不多见。本文依据毛细管电泳分析多糖的步分析是建立在对单糖和寡糖的毛细管电泳分析的骤对糖类物质的分析及其应用前景进行了评述,基础上,先用酶解和化学水解使糖链分解为单糖对影响多糖

5、分析的各种因素进行了较为系统地介和寡糖,再对其进行分离分析,因此对多糖的分析绍。主要是对多糖所含糖元的分析。[4,6,7]1　糖及毛细管电泳分析简介2　多糖及糖缀合物的水解糖是多羟基醛、酮、醇及它们的衍生物。按其使多糖水解的传统方法是酸解,多糖经酸解[8]所含糖元的数目可分为单糖、寡糖、多糖和糖蛋释放出单糖和寡糖,Fontaniella等人用盐酸水解白、糖肽等糖缀合物。单糖常以环状形式存在,尤从死亡甘蔗茎液汁中分离出来的多糖,经毛细管收稿日期:2002209202;修回日期:20032032103通讯联系人©1995-2005

6、TsinghuaTongfangOpticalDiscCo.,Ltd.Allrightsreserved.608化学研究与应用　　　　　　　　　　　　　第15卷电泳分离分析后,发现蔗糖、纤维素二糖、甘露糖、聚糖酶分解葡甘露聚糖,进而研究多糖链的结构[10]葡萄糖、葡萄糖212P、葡萄糖醛酸是这种提取多糖与顺序。ZnangMingquan等人用壳多糖酶和葡的主要成分。酸解方法虽然被广泛利用,但是用聚糖酶分别水解花生霉菌病原体和发面酵母中的酸解释放出的单糖在不同程度上被酸解破坏,而甲壳质和葡聚糖,得到它们相应的糖单体:N2乙酰且糖

7、醛酸阻碍酸解的进行,在此条件下糖醛酸残葡糖胺和葡萄糖,然后用62氨基喹啉对这两种单基仅有一小部分释放出来。另一方面,不饱和的糖进行衍生检测。糖醛酸残基被酸解完全破坏,使其不能通过这种程序检测出来。含有糖醛酸的配糖键通过甲醇分3　糖类物质的衍生解被有效地裂解,甲醇解是应用在无水甲醇中加入强酸使多糖分解的方法,其分解比酸解更有效。衍生的目的是为了引入紫外吸收基团或荧光在甲醇分解过程中释放出的糖醛酸的降解程度也基团以利用毛细管电泳的紫外或荧光检测器对糖比较小。Chambers和Clamp在甲醇解实验中,证进行分离检测。因为包含双键、

8、三键、共轭π键、实了在糖蛋白甲醇解中中性糖、己糖醛酸、乙酰脱孤对电子以及C=0、S=S、N=0、N=N等功能团氧己糖和N2乙酰神经氨酸等单糖的释放。结果的物质都能吸收紫外光,因此在糖分子中引入这表明,在1mol/L的盐酸甲醇溶液中,85℃加热24些功能团可对其进行有效地紫外检