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1、实验室工程标准的PCR实验室[车城热线www.sy110.com]实验室工程标准的PCR实验室2011年10月24日 车城热线www.sy110.commendations 在理想情况下,PCR实验室试剂预备、标本制备、扩增三个区域可设置缓冲间.在缓冲间内,可设置正压,使室内空气不流向室外,室外空气不流向室内. PCR实验室平面布置示意图 一般实验室间隔材料分:彩钢板,不锈钢板,理化板等,价格依次而上, 主要考虑不产尘,不滋菌,轻易清理就行 一般实验室间隔材料分:彩钢板,不锈钢板,理化板等,价格依次而上, 主要考虑不产尘,不滋菌,轻易清理就行 **卫生部PCR研究员李金明(卫
2、生部临床检验中心临床免疫室主任,研究员)的PCR建设方案再说吧!国外的资料不一定是最好.个人觉得李金明的实验室区正压(扩增分析区由于没有缓冲,所以为负压),缓冲间负压的作法可以更好的防止气体的外泄及防止试剂预备区、标本制备区、产物扩增区、扩增分析区四区之间的气体相互渗漏.PCR实验室也可以分为三个区,即第三、四区合为一区,必须设立缓冲间.有条件建设实验室采用三十万级的标准来建设.空调系统采用制冷剂各区独立循环,可以防止气流交叉. **疾病预防控制中心实验室建设之PCR实验室基本要求: PCR实验室可以是分散形式,也可以是组合形式.完成一组PCR实验,通常应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增
3、及产物分析四个实验过程,若实验工艺需要,还应增加样品粉碎过程. 一、分散形式PCR实验室 所谓分散形式PCR实验室,是指完成上述实验过程的实验用房彼此相距较远,呈分散布置形式.对于这种布置形式的PCR实验室,由于各个实验之间不易相互干扰,因此无需特殊条件要求. 二、组合形式PCR实验室 所谓组合形式PCR实验室,是指完成PCR四个实验过程的实验用房相邻布置,组成独立实验区域的形式.对于组合形式PCR实验室,由于各个实验间集中布置,轻易造成相互干扰,因此,对总体布局以及屏障系统具有一定的要求.各室在进口处设缓冲间,以减少室内外空气交换.试剂配制室及样品处理室宜呈微正压,以防外界含核酸气
4、溶胶的空气进进,造成污染;核酸扩增室及产物分析室应呈微负压,以防含核酸的气溶胶扩散出往污染试剂与样品. 假如使用荧光PCR仪,扩增室和产物分析室可以合并. 若房间进深答应,可设PCR内部专用走廊.需要指出的是在减少室内外空气交换方面,缓冲间比专用走廊更有意义. **PCR实验区的设置,几个要留意的题目: 1、几个区域的大小设置情况,应该是试剂预备区、产物扩增区、扩增分析区,要小一些.标本制备区应大一些.由于,标本制备室要放置一个生物安全柜为一个低温冰箱. 2、试剂预备区、标本制备区就设立紧急洗眼器,以备不时之需. 3、PCR实验室的洁净度可以根据用户的实际使用情况和资金的投进来设
5、计. **临床基因扩增检验实验室基本设置标准 根据《临床检验扩增检验实验室治理暂行办法》,制定本标准 一、临床基因扩增检验实验室区域设置原则 (一)临床基因扩增检验实验室区域设置原则 1、试剂储存和预备区 2、标本制备区 3、扩增反应混合物配制和扩增区 4、扩增产物分析区 如使用全自动分析仪,区域可适当合并. (二)各工作区域必须有明确的标记,避免不同工作区域内的设备、物品混用. (三)进进各工作区域必须严格按照单一方向进行,即试剂储存和预备区m>标本制备区m>扩增反应混合物配制和扩增区m>扩增产物分析区. (四)不同的工作区域使用不同的工作服(例如不同的颜色).工作
6、职员离开各工作区域时,不得将工作服带出. 二、工作区域仪器设备配置标准 (一)试剂储存和预备区 1、2-8C和-15C冰箱 2、混匀器 3、微量加样器(覆盖1-1000ul) 4、移动紫外灯(近工作台面) 5、消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心) 6、专用工作服和工作鞋 7、专用办公用品 (二)标本制备区 1、2-8C冰箱、-20C或-80C冰箱 2、高速台式冷冻离心机 3、混允器 4、水浴箱或加热模块 5、微量加样器(覆盖1-1000ul) 6、可移动紫外灯(近工作台面) 7、超净工作台 8、消耗品:一次性手套、一次
7、性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心) 9、专用工作服和工作鞋 10、专用办公用品 如需处理大分子DNA,应具有超声波水浴仪. (三)扩增反应混合物配制和扩增区 1、核酸扩增仪 2、微量加样器(覆盖1-1000ul) 3、可移动紫外灯(近工作台面) 4、消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心) 5、专用工作服和工作鞋 6、专用办公用品 (四)
