最新微生物与药物变质要点课件PPT.ppt

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1、微生物与药物变质要点药物中微生物的来源1.空气细菌、霉菌、酵母菌无菌操作区－每1000升空气中<10个细菌。2.水3.其它原料、容器、设备、操作人员、包装材料。微生物引起的药物变质1.药物变质的判断（1）有病原微生物存在（2）存在微生物的毒性代谢产物（3）产品发生可被觉察的物理或化学变化（4）口服及外用药物的微生物总数超标（5）无菌制剂中发现有微生物存在药物的体外抗菌试验用于抗菌药物的筛选、提取过程中的追踪、抗菌谱的测定、药物含量的测定、药物血浓度测定、药物敏感试验等。包括抑菌试验和杀菌试验两者并

2、非绝对体外抑菌试验一、连续稀释法可用于测定药物的最低抑菌浓度（minimalinhibitoryconcentration)和最低杀菌浓度（minimalbactericidalconcentration).一、连续稀释法21.液体培养基连续稀释法2.固体培养基连续稀释法——平板法可同时测定大批量试验菌株的MIC，且不受药物颜色及混浊度的影响。MIC检测方法1.药液稀释：对倍稀释法共14管，12管为空白对照（不加菌液），13管为阳性对照（不加药物）。14管为稀释剂或助溶剂对照（浓度与1管相同）。2

3、.加入菌液0.1毫升（1000～100000个细菌），摇匀。3.培养：37度，16～24小时。4.MIC的确定：试验管呈现澄明的最低药物浓度即为MIC。二、琼脂扩散法1.滤纸片法新药的初筛及临床的药敏试验2.打孔法药物血浓度的检测3.挖沟法一种药物对几种试验菌的抗菌作用体外杀菌试验最低杀菌浓度（MBC）也可称之为最低致死浓度（MLC)。取MIC终点以上未长菌的各管培养液，分别移种于另一无菌平板上，培养后平板上无菌生长（或少于5个菌落）的药物最低浓度为该药的MBC（或MLC）。联合抗菌试验两种抗菌药

4、物、药物与不同PH、药物与不同离子溶液的相互影响。1.协同－加强作用2.拮抗－减弱作用3.无关－相互无影响4.累加－作用为二者之和一、纸条试验在已接种试验菌的平板表面垂直放置两条各浸有一种药液的滤纸条，培养后根据抑菌区的加强、减弱或无影响来判断它们在联合应用时的效应。二、棋盘格法A药各稀释度按纵行定量加入各管。B药各稀释度按横排定量加入各管。加入定量菌液，经培养后观察结果。两药同时检测单独MIC。FIC（A）＝A药与B药联合试验时A药的MICA药单独试验时的MICFIC为部分抑菌浓度FIC（B）＝

5、B药与A药联合试验时B药的MICB药单独试验时的MICFIC指数＝FIC(A)+FIC(B)<0.75－协同1－累加1～2－无关>2－拮抗体外抗菌试验的影响因素1.试验菌标准菌株临床新分离菌株2.培养基3.抗菌药物浓度稀释4.对照试验（1）试验菌对照（2）已知药物对照（3）溶剂及稀释液对照药物制剂的微生物学检查一、无菌制剂的无菌检查各种注射剂（针剂、输液）手术及眼科制剂都必须无活的微生物。1.无菌检查的基本原则采用严格的无菌操作方法，将被检药品置不同培养基内培养，观察有无微生物生长，以判断被检药品

6、是否合格。2.无菌检查抽样（1）百分数抽样法：每批的2％～5％（2）固定抽样法：2～203.培养基及培养基灵敏度试验培养基无菌试验用已知不同菌株做生长试验来监控。菌种有：藤黄八叠球菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、铜绿假单胞菌、生孢梭菌、白色念珠菌、黑曲霉。4.阳性对照菌及抑细菌抑真菌试验（1）阳性对照菌液是为供试品做阳性对照试验使用的。其目的是检查阳性菌在加入供试品的培养基中能否生长，以验证供试品有无抑菌活性物质和试验条件是否符合要求。（2）抑细菌抑真菌试验：加供试品的培养管与未加供试品的培养管比较

7、，以判断供试品有无抑菌作用。（如有抑菌作用可加入灭活剂或用薄膜过滤法检测）5.检查法（1）直接接种法：适用于非抗菌作用的供试品。（2）薄膜过滤法：适用于有抗菌作用的或大容量的供试品。特殊药品的无菌检查法供试品中加入1％～3％聚山梨酸80（吐温80），其作用是使油类药物均匀分散，便于检出微生物。油类药物的无菌检查细菌总数的测定口服药及外用药的微生物学检查需要限制性控制微生物的数量和种类。1.细菌总数、霉菌总数低于规定限量（细菌总数1克或1毫升不超过10～104CFU,真菌数1克或1毫升不超过10～

8、103CFU)。2.口服药物不得检出大肠埃希菌、沙门菌。3.外用药不得检出铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、破伤风梭菌。4.不得检出活螨（含糖的剂型应重点检查）。平板菌落计数法限制条件1.菌落形成单位（colonyformingunits,CFU）为计数单位。一个菌落就是一个菌落形成单位，它可以由一个也可以由多个菌细胞形成。2.受特定培养基和培养条件限制普通培养基，需氧或兼性厌氧，30～35度，48小时。3.有繁殖能力的菌细胞才能被认定“活菌”。平板菌落计数法方法1.试验前的准备2.供