丛枝菌根真菌扩繁实验设计

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1、丛枝菌根真菌扩繁实验设计材料与方法1试验容器采用10cm*15cm的塑料花盆，将花盆用0.1%高锰酸钾溶液侵泡消毒，并用流水清洗干净。2扩繁宿主及供试菌种扩繁宿主选用红三叶；供试菌种：摩西球囊菌（G.mosseae）、缩球囊菌（G.Uersiforme）。3孢子和种子的表面消毒将孢子浸泡在2%的氯胺T和200mgL-1链霉素溶液中15min用无菌水冲洗数次。将三叶草种子用75%酒精进行表面消毒然后用无菌水反复冲洗，置于催芽箱中催芽（或将种子用10%H2O2浸泡10min进行表面消毒，用蒸馏水冲洗干净，浸种24h备用/置于湿润的滤纸上放置24h使之发芽）。4供试基质及营养液土壤采自石河子

2、农学院试验站牧草试验地，过2mm筛，121℃灭湿热灭菌30min并放置2d后备用；取建筑用河砂过3mm筛，流水冲洗直至洗液不再浑浊为止，干热灭菌（1750C）2h备用。营养液采用修改的Hoagland营养液，配方见下表：25培养方法以红三叶草为宿主分别接种G.m、G.v，单孢接种。将洗净灭菌的河沙土装入花盆，约占花盆的2/3，把菌种撒播在沙土基质上，将准备好的三叶草种子20粒均匀播种在菌种上，再覆盖一层河沙，喷水湿润。6管理每2d用营养液浇灌一次，培养温度为20-250C，光照时间为15h/d.每天8-23点用日光灯补充光照。7d后定苗，每盆择优留苗10株，将其余植株的地上部分剪去。7

3、收获及测定培养10周后，停止浇营养液和水，将花盆放在日光下暴晒3-7d，使沙基干燥。去除地上部分植株体，分别收获植株根系和沙土培养基（基质留待筛取孢子）。2