薄层色谱-培训讲稿培训课件.ppt

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1、朋友们新春快乐！春节九天耍安逸了撒，现在该静下心了哈。薄层色谱分离原理、条件选择和操作方法薄层色谱在有机合成与有机分析中的应用1、分离混合物：一些结构类似、理化性质也相似的化合物组成的混合物，一般应用化学方法分离很困难，但应用色谱法分离，有时可得到满意的结果。2、精制提纯化合物：有机化合物中含有少量结构类似的杂质，不易除去，可利用色谱法分离以除去杂质，得到纯品。3、鉴定化合物：在条件完全一致的情况，纯粹的化合物在薄层色谱或纸色谱中都呈现一定的移动距离，称比移值（Rf值），所以利用色谱法可以鉴定化合

2、物的纯度或确定两种性质相似的化合物是否为同一物质。4、追踪化学反应进程：观察一些化学反应是否完成，可以利用薄层色谱观察原料色点的逐步消失，以证明反应完成与否。什么是“比移值”？在相同的展开条件下，一种化合物移动离开样品原点的距离Li（cm或mm）与展开剂前沿距样品原点中心的距离Lo（cm或mm）之比值，称为相对移动值，或比移值，用Rf表示：Rf=Li/Lo在不同的展开条件下，各化合物的移动距离不会相同，而在同一展开条件下，相对于展开剂的移动距离，各化合物有可比较的展开数据即相同的比移值Rf。在相同

3、条件下测得的比移值可以用于化合物的薄层色谱特征值进行比较对照。但影响比移值的因素很多，如薄层的厚度、吸附剂颗粒的大小、酸碱性、活性、外界温度和展开剂纯度、组成、挥发性等。所以，要获得重现的比移值就比较困难。为此，在测定某一试样时，最好用已知样品进行对照。薄层色谱条件固定相（吸附剂和支持剂）选择薄层色谱用的吸附剂：薄层吸附色谱的吸附剂最常用的是氧化铝和硅胶；分配色谱的支持剂为硅藻土和纤维素。硅胶是无定形多孔性物质，略具酸性，适用于酸性物质的分离和分析。薄层色谱用的硅胶分为：硅胶H不含粘合剂；硅胶G含

4、煅石膏粘合剂；硅胶HF254含荧光物质，可用于波长为254nm紫外光下观察荧光；硅胶GF254既含煅石膏又含荧光剂等类型。与硅胶相似，氧化铝也因含粘合剂或含荧光剂而分为氧化铝G、氧化铝GF254及氧化铝HF254。粘合剂除上述的煅石膏（半水合硫酸钙：2CaSO4·H2O）外，还可用淀粉、羧甲基纤维素钠（CMC）。薄层色谱条件2.展开剂选择薄层色谱展开剂的选择和柱色谱一样，主要根据样品中各组分的极性、溶剂对于样品中各组分溶解度等因素来考虑。展开剂的极性越大，对化合物的洗脱力也越大选择展开剂时，除参照

5、溶剂极性来选择外，更多地采用试验的方法，在一块薄层板上进行试验：（1）若所选展开剂使混合物中所有的组分点都移到了溶剂前沿，此溶剂的极性过强；（2）若所选展开剂几乎不能使混合物中的组分点移动，留在了原点上，此溶剂的极性过弱。当一种溶剂不能很好地展开各组分时，常选择用混合溶剂作为展开剂。先用一种极性较小的溶剂为基础溶剂展开混合物，若展开不好，用极性较大的溶剂与前一溶剂混合，调整极性，再次试验，直到选出合适的展开剂组合。合适的混合展开剂常需多次仔细选择才能确定。薄层色谱的使用操作1.制板通常将薄层板分为

6、硬板（加粘合剂）和软板（不加粘合剂）薄层吸附色谱和柱吸附色谱一样，化合物的吸附能力与它们的极性成正比，具有较大极性的化合物吸附较强，因而Rf值较小。因此利用化合物极性的不同，用硅胶和氧化铝薄层色谱可将一些结构相近或順、反异构体分开。薄层板制备的好坏直接影响色谱分离的效果。薄层应尽量均匀且厚度（0.25～1mm）要固定。太厚展开时会出现拖尾，太薄样品分不开。薄层色谱的使用操作A.湿板的制备选择合适尺寸的玻璃板，依次用水和乙醇洗净，晾干。取适量薄层色谱用的硅胶，加适量清水（如一份硅胶G加三份水）调成糊

7、。为提高薄层板涂层的粘合强度，也常采用0.5%的羧甲基纤维素钠水溶液替代清水调制硅胶糊。调制时慢慢搅拌，勿使产生气泡。然后按下法制板：（1）平铺法：用薄层涂布器涂布，它适合于科研工作中数量较大要求较高的需要。（2）浸渍法：把两块干净的玻片叠合，浸入调制好的吸附剂浆料中，取出后分开、凉干。（3）简易平铺法（倾注法）：将配制好的浆料倾注到清洁干燥的载玻片上，拿在手中轻轻的左右摇晃，使其表面均匀平滑，在室温下凉干。薄层色谱的使用操作B.薄层板的活化将涂布好的薄层板置于室温凉干后，放在烘箱内加热活化，活化

8、条件根据需要而定。硅胶板一般在烘箱中渐渐升温，维持105～110℃活化30～40min。当分离某些易吸附的化合物时，可以不活化。活化好的薄层板若短期内不使用，应放入干燥器存放。薄层色谱的使用操作2.点样通常将样品溶于低沸点溶剂（丙酮、甲醇、乙醇、氯仿、苯、乙醚和四氯化碳等）配成1%的溶液，用内径小于1mm管口平整的毛细管点样。（1）先用铅笔在距薄层板一端1cm处轻轻划一横线作为起始线，然后用毛细管吸取样品，在起始线上小心点样，斑点直径一般不超过2mm。（2）若样品溶液太稀，可重复点