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时间:2017-12-14
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1、第二节血液凝固分析仪学习目标掌握:血凝仪的检测原理熟悉:半自动、全自动血凝仪的特点和基本结构、各种检测方法的优缺点了解:血凝仪的分类、临床应用、仪器的维护内容提要一、血凝仪的分型二、血凝仪的检测原理三、血凝仪的基本结构四、血凝仪的临床应用五、血凝仪的维护六、血凝仪的注意事项血凝仪是采用一定分析技术,对血栓与出血有关成分自动检测的临床常规检验仪器。在血栓/出血实验室中最基本的设备就是血液凝固分析仪(简称血凝仪)。一、血凝仪的分型按自动化程度分类:1.半自动血凝仪:需手工加样加试剂、检测方法少、速度慢,但操作简单、价格便宜;检测一些常规检测项目。2.全自
2、动血凝仪:自动化程度高、检测方法多、通道多、速度快、精度好,但价格昂贵;检测常规凝血项目、监测抗凝及溶栓的治疗。3.全自动血凝工作站:自动识别、接收样本,自动离心加样、分析等二、血凝仪的检测原理主要检测方法:凝固法底物显色法免疫学法干化学法1.凝固法原理通过检测血浆在凝血激活剂作用下发生一系列物理量(光、电、超声、机械运动等)的变化,再由计算机分析所得最终结果,也称生物物理法。按具体测量原理分为电流法、超声分析法、光学法和磁珠法四种。血栓/止血实验中最常用、最基本的方法二、血凝仪的检测原理1.凝固法原理(1)电流法:利用纤维蛋白原无导电性而纤维蛋白具
3、有导电性的特点,将待测样品作为电路的一部分,根据凝血过程中电路里电流的变化来判断纤维蛋白的形成。缺点:不可靠、单一二、血凝仪的检测原理1.凝固法原理(2)超声波法依凝血过程使血浆的超声波衰减程度判断终点。只能进行半定量,项目少,目前已经较少使用。二、血凝仪的检测原理(3)光学法(比浊法):是根据血浆凝固过程中浊度的变化导致光强度变化来测定相关因子。当向样品中加入凝血激活剂后,随着样品中纤维蛋白凝块的形成过程,样品的光强度逐步增加,仪器把这种光学变化描绘成凝固曲线,当样品完全凝固以后,光的强度不再变化。纤维蛋白的形成与吸光度光学法(比浊法)透射比浊法光
4、源、样本、接受器成直线,接收器接收到的是很强的透射光和较弱的散射光。当测定物中有溶血、黄疸、脂血等干扰成分或低纤维蛋白原血症的特殊标本时,由于样本本身浊度的影响,测量精度变差。光学法(比浊法)散射比浊法光源、样本、接收器成直角,散射比浊法,接收器接收到的完全是散射光,不受本底浊度的影响。散射比浊法优于透射比浊法1.凝固法原理(4)磁珠法根据磁珠运动的幅度随血浆凝固过程中黏度的增加而变化来测量凝血功能。分为光电探测法和电磁珠探测法。二、血凝仪的检测原理光电探测法测量原理测试时,永久磁铁在测试杯的下面旋转,带动测试杯中磁珠沿杯壁旋转,测试杯侧壁外安有红外
5、反射式光电探测器元件来检测磁珠运动变化。依运动力学原理,磁珠的旋转随血浆黏度的增大逐渐向测试杯中心靠拢,根据磁珠运动规律来判定血浆凝固终点。(4)磁珠法电磁探测法(双磁路磁珠法):测试杯的两侧各有一组驱动线圈,其中一对磁路产生恒定的交变电磁场,使杯内特制的去磁小钢珠保持等幅振荡运动;凝血激活剂加入后,随着纤维蛋白的增多,血浆黏稠度增加,小钢珠运动振幅逐渐减弱,将运动幅度衰减到50时确定为凝固终点。(4)磁珠法双磁路磁珠法原理双磁路磁珠法原理用电磁检测磁珠摆动衰减幅度磁珠法与光学比浊法原理主要区别前者是检测血浆凝固过程中磁电信号变化后者是检测该过程中
6、光信号的变化光学法与磁珠法原理主要区别光学法原理:是用光探测凝固过程中血浆浊度的(吸光度)变化来判断终点;光电磁珠法原理:是用光探测钢珠振幅衰减程度来判断终点;双磁路磁珠法原理:是用电磁探测钢珠振幅衰减程度来判断终点。三、血凝仪的检测原理2.底物显色法通过测定产色底物的吸光度变化来计算所测物质的含量和活性,也称生物化学法,实质为光电比色原理。最常用的多肽底物是对硝基苯胺,呈黄色,波长405nm。二、血凝仪的检测原理3.免疫学方法以纯化的被检物质为抗原,制备相应的抗体,然后利用抗原抗体反应对被检物进行定性或定量测定。血凝仪使用免疫比浊法。二、血凝仪的检
7、测原理4.干化学法将惰性顺磁铁氧化颗粒结合在可产生凝固反应或纤溶反应的干试剂中,在固定垂直磁场的作用下使颗粒来回移动。二、血凝仪的检测原理血凝仪的检测原理(二)底物显色法生物化学法以底物释放产色基团量的变化测定有关因子(一)凝固法生物物理法电流法:纤维蛋白原——纤维蛋白——导电性判定终点光学法散射比浊法—凝固过程中散射光变化透射比浊法—凝固过程中吸光度变化浊度变化光度变化双磁路磁珠法—用电磁探测钢珠振幅衰减程度判断终点光电磁珠法——用光电探测钢珠振幅衰减程度判断终点超声波法——超声波衰减程度判断终点(三)免疫学法抗原抗体免疫比浊三、血凝仪的基本结构(
8、一)半自动血凝仪的基本结构主要由样本预温槽和试剂预温槽、加样器、检测系统(光学、磁场)及微机组成。(二)全自
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